摘要：:以含传染性支气管炎病毒 ( ZJ971毒株 ) s1基因的质粒 PBs为模板 ,根据其序列设计引物进行PCR扩增 ,得到 1.7kb左右的 s1基因产物 ;用 Xbal I和 Bam HI酶切纯化 ,并在 T4 DNA连接酶的作用下 ,定向克隆到植物表达载体 PBI12 1中 ,PCR及酶切鉴定表明 。

摘要：根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)s1基因序列 ,设计了两对引物并以RT_PCR特异性扩增出嗜肾型IBVW93疫苗株的s1基因 ,基因产物大小为 1.6 2kb ,与设计相符 ,对其进行序列测定后 ,与标准毒株H5 2、H12 0、M41、BEAU株的s1基因进行同源性比较 ,结果表明 ,W93株与H5 2、H12 0、M41和BEAU株的核苷酸序列的同源性分别为 96 .8%、97.1%、96 .9%和 96 .8% 。

摘要：根据GenBank公开序列自行设计一对引物,通过RT-PCR扩增出小鼠肝炎病毒的全长s1基因,并将其插入真核表达质粒pVAX1中,构建出重组真核表达质粒pVAX1-s1。将重组质粒转染COs-7细胞,采用间接免疫荧光检测出s1蛋白的体外表达。将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌sL7207中,构建出运送DNA疫苗的重组沙门氏菌sL7207(pVAX1-s1)。分别以5×108CFU、1×109CFU、2×109CFU剂量的重组菌口服接种6周龄BALB/c小鼠,试验结果表明,重组菌对小鼠具有良好的安全性。以1×109CFU剂量的重组菌口服免疫小鼠,抗体检测结果显示,在二免后两周和三免后两周,重组菌免疫组的血清抗体水平与sL7207(pVAX1)空载体免疫组间分别存在显著性差异(P<0.05)和极显著性差异(P<0.01)。在三免后两周重组菌免疫组出现了较高水平的肠黏膜抗体。

摘要：根据G enB ank中报道的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)s1基因序列,设计了1对引物,克隆了IBV强毒株X的s1基因,基因大小为1.62 kb。将其导入真核表达载体系统pIREs1neo中,表达蛋白为61 000。

摘要：根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV) s1基因序列 ,设计了 2对引物并以 RT- PCR特异性扩增出IBV X株的 s1基因 ,基因产物大小为 1.6 4kb,与设计相符 ,对其进行序列测定后 ,与标准毒株 H5 2、H12 0、M41、BEAU和澳大利亚 T株的 s1基因进行同源性比较。结果表明 ,X株与 H5 2、H12 0、M41、BEAU和澳大利亚 T株的核苷酸序列的同源性分别为 75 .8%、76 .1%、76 .3%、75 .5 %和 76 .9%,由此可以看出 ,IBV X株与标准毒株在 s1基因上存在较大差异。

摘要：用自行设计的 1对引物 you1+和 you2 -对 5个传染性支气管炎病毒 (IBV)地方分离株 (HN2 ,HN4,JX1,sC2和sC4)的基因组 RNA进行 RT- PCR,均成功地扩增出预期大小 (约 16 30 bp)的目的片段 ,经 PCR、酶切鉴定为 s1基因。将 5个毒株的 s1基因克隆到 p GEM- T载体中 ,重组质粒经 Eco R 和 Hind 单酶切以及用引物 you1+和 you2 -进行质粒 PCR扩增鉴定 ,证明 IBV- s1基因已成功地克隆到了 p GEM- T载体中。同时 ,为了测序的方便 ,还将 IBV- s1基因作了目的片段 (约 10 6 0 bp)

摘要：根据GenBank已公布的传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)株s1基因序列及pPIC9K表达载体序列,设计1对IBV s1基因表达片段的PCR引物,用RT-PCR方法扩增出长度为1 566 bp IBV s1基因表达片段,5′端不含信号肽序列,3′端添加了终止密码子。用限制性内切酶snaB和Not将s1基因和载体pPIC9K酶切回收后连接,构建了重组表达载体pPIC9K-s1。用限制性内切酶Bgl将表达质粒pPIC9K-s1线性化,然后用电转化的方法导入毕赤酵母Gs115,在MD平板上生长的转化子经过PCR鉴定和表型筛选后,获得了整合型阳性重组菌株Gs115/pPIC9K-s1 His+Muts。将重组菌株在1%甲醇中进行诱导分泌表达,并对表达产物进行sDs-PAGE、Western blot分析。结果显示,IBV s1基因在毕赤酵母中成功获得了表达,表达蛋白的分子量约为76 000,能与IBV阳性血清特异性结合,表达的蛋白占上清中总蛋白量的12.5%。

摘要：根据GenBank中发表的猪的IgG Fc段基因及鸡传染性支气管炎病毒(IBV)s1基因序列,设计并合成引物。以猪肝组织总RNA为模板扩增出猪IgG Fc基因,以含全长IBV M41s基因的质粒为模板扩增出IBVs1基因,分别克隆至T载体。DNA测序表明,所获得的IBV s1基因大小为1.5kb,IgG Fc大小为1kb,序列正确。将IBVs1与IgG Fc基因串连,插入含有人组织型纤维蛋白溶酶原激活物分泌信号肽序列(tPA)的真核表达载体pcD-NA3.1-tPA上,在HeLa细胞上进行瞬时融合表达。经免疫光和斑点杂交检测,表达产物同时具有IBV s1蛋白和IgG Fc活性。

摘要：参考GenBank番鸭呼肠孤病毒(muscovyduckreovirus,MDRV)s1基因序列设计合成一对引物,对番鸭呼肠孤病毒MW9710株s1基因进行RT＿PCR扩增,并对PCR产物进行了克隆和测序。结果显示扩增产物为300bp,与预期的目的片段大小一致,经PCR、酶切反应鉴定后克隆到pGEM＿Teasy载体中,核苷酸序列经BLAsT软件分析表明:番鸭呼肠孤病毒MW9170株s1基因的目的片段与番鸭呼肠孤病毒法国89026株同源性为91 7%,与鸡关节炎病毒s2基因同源性为68 7%,结果提示番鸭呼肠孤病毒MW9710株与鸡关节炎病毒亲缘距离较远。

摘要：根据已发表的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)s1基因序列设计了1对引物,通过RT-PCR特异性扩增出DN-1株的s1基因,产物为1.7kb,与设计相符。同源性比较结果显示,DN-1株与H52、H120株的s1基因核苷酸序列的同源性分别为99.7%、99.2%,表明IBVDN-1分离株与疫苗株的s1基因具有高度的同源性。