摘要：目的:探讨结核感染T细胞斑点试验(***)联合血清糖类抗原125(CA125)、γ干扰素诱导蛋白10(IP-10)对肺结核合并糖尿病的诊断价值。方法:选取2021年1月~2023年1月上海中医药大学附属第七人民医院收治的480例疑似肺结核患者,根据诊断结果分为A组(肺结核合并糖尿病患者)166例、B组(单纯肺结核患者)214例、C组(非结核分枝杆菌感染和非糖尿病患者)100例。所有研究对象均进行***,并采用酶联免疫吸附法检测血清CA125、IP-10水平。通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析***联合血清CA125、IP-10水平对肺结核合并糖尿病的诊断价值。结果:A组***阳性率低于B组,但高于C组,B组***阳性率高于C组(P<0.05);A组抗原培养滤液蛋白10(CFP10)、早期分泌性抗原靶蛋白6-kD(ESAT-6)原值高于B组、C组,B组抗原CFP10、抗原ESAT-6原值高于C组(P<0.05)。A组血清CA125、IP-10水平高于B组和C,B组血清CA125、IP-10水平高于C组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,***、CA125、IP-10、***+CA125、***+IP-10、三项联合诊断肺结核合并糖尿病的曲线下面积(AUC)分别为0.771、0.769、0.779、0.880、0.885、0.937;三项联合诊断肺结核合并糖尿病的AUC大于***、CA125、IP-10单独和联合诊断。结论:肺结核合并糖尿病患者***阳性率和血清CA125、IP-10水平升高,***联合血清CA125、IP-10能提升肺结核合并糖尿病的诊断价值。

摘要：目的探究低载量HBV DNA S区基因扩增的可行性并对实验条件进行优化,为隐匿性HBV感染(OBI)患者HBV DNA S区基因突变检测提供依据。方法采用传统巢式PCR和自建两轮PCR方法扩增6例低HBV DNA载量(100~200 IU/mL)和22例更低HBV DNA载量(20~99 IU/mL)的血清样本中HBV DNA S区基因,并对引物序列、引物量、PCR产物模板稀释倍数、退火温度、PCR反应循环数、PCR总反应体系等条件进行优化。PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,切割目的条带凝胶进行克隆测序,然后对克隆测序结果进行核酸序列BLAST比对确认。结果设计3对巢式PCR引物(P1~P3),扩增产物理论上包含整个HBV DNA S区基因。经过PCR扩增条件优化后,6例低HBV DNA载量的血清样本中仅2例经巢式PCR扩增出HBV DNA S区基因特异性靶序列,22例更低HBV DNA载量样本无一例扩增成功。自建两轮PCR法设计了P4~P15共12对引物,扩增产物理论上包含整个HBV DNA S区基因。经过PCR扩增条件优化并筛选出P13为最佳引物后,6例低HBV DNA载量的血清样本全部扩增出HBV DNA S区基因特异性靶序列;15例(15/22,68.18%)更低HBV DNA载量的样本扩增出HBV DNA S区基因特异性靶序列,经PCR产物克隆测序均证实为HBV DNA S区基因,该15例样本中HBV DNA载量最低为20.1 IU/mL。结论基于引物P13自建的两轮PCR法更适用于低载量HBV DNA S区基因的扩增,扩增效率和特异性均优于传统巢式PCR;扩增产物可进一步应用于OBI者HBV DNA S区基因序列突变分析。

摘要：目的分析隐匿性乙型肝炎病毒(HBV)感染(OBI)者血清样本中HBV S区基因跨膜结构(TM)突变导致的氨基酸替换现象,探讨造成HBV表面抗原(HBsAg)漏检的原因和临床意义。方法选取上海中医药大学附属第七人民医院检验科采集的28例OBI患者血清样本(OBI组)和10例慢性HBV感染(CHB)患者血清样本(CHB组)。采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增OBI组和CHB组HBV S区基因,扩增产物分别进行克隆测序和直接测序,进而进行核苷酸序列比对分析。结果OBI组TM1~TM4共26个位点发生185次突变,突变率为3.1%(185/6052),TM1、TM2、TM3、TM4突变率分别为1.6%(16/1020)、2.2%(28/1292)、4.2%(97/2312)、3.1%(44/1428)。CHB组TM发生4次突变,突变率为0.4%(4/890),TM1、TM2、TM3均未发生突变,TM4突变率为1.9%(4/210)。OBI组TM突变率、TM4突变率均高于CHB组,差异均有统计学意义(χ^(2)=19.92,P<0.01;χ^(2)=0.89,P=0.03)。OBI组TM1、TM2、TM3、TM4亲水性突变率分别为62.5%(10/16)、71.4%(20/28)、38.1%(37/97)、20.5%(9/44),4者比较差异有统计学意义(P<0.01)。OBI组共发现7种精氨酸替换突变,分别为C85R、L162R、W163R、W172R、L186R、W191R、C211R。结论HBV S区基因TM突变导致疏水性氨基酸替换为亲水性氨基酸,会导致临床上HBsAg的漏检,产生OBI现象。

摘要：目的:评价检测铜绿假单胞菌外膜孔蛋白OprD2基因缺失的环介导等温扩增技术(LAMP)的应用价值,从而为临床早期诊断耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPA)以及治疗方案的制定提供参考依据。方法:收集2016年1月至2016年12月上海中医药大学附属第七人民医院临床分离的IRPA,MicroScan WalkAway-96 plus全自动鉴定及药敏系统检测最低抑菌浓度(MIC),应用LAMP法检测OprD2基因的缺失,并与实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法进行比较。结果:50株样本中,DNA A260/280均≧1.72,而DNA浓度均>370 ng/μL,6号和49号样本甚至>2000 ng/μL。LAMP法检测50株IRPA的OprD2基因,结果显示26株阳性,其余24株为阴性,缺失率为48.0%;Real-time PCR法检测结果显示,50株IRPA的OprD2基因阳性和阴性分别为26株、24株,LAMP法检测结果与Real-time PCR法具有一致性。结论:针对靶点OprD2基因设计引物的LAMP法是一种快速、简便且便于临床实验室应用的方法,其检测结果与Real-time PCR法具有高度一致性。

摘要：目的对双扩增法RNA恒温扩增技术进行方法学性能评价。方法选取2020年5—9月因呼吸道感染就诊于上海中医药大学附属第七人民医院患者的咽拭子标本40例(含经聚合酶链反应荧光探针法判定的甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、腺病毒、肺炎支原体和肺炎衣原体7种病原体阳性标本各5例,阴性标本5例),通过检测对比评价双扩增法检测7种常见呼吸道病原体RNA的准确性、灵敏度、重复性、交叉反应及抗干扰性能力。结果对已知结果的40例呼吸道咽拭子标本进行7种病原体双扩增法检测,检测结果与原诊断结果一致,准确性100%;对稀释后的LOD1、LOD2和LOD33个梯度的灵敏度样品进行检测,各病原体灵敏度验证结果符合要求;7例病原体阳性标本和1例阴性标本每天分别重复检测3次,连续重复检测5 d,与原诊断结果一致,符合率100%;7种病原体之间及7种病原体与其他多种病原体之间无交叉反应;2 g/L的血红蛋白和1%(W/V)的黏蛋白对病原体检测结果无干扰。结论双扩增法检测RNA的准确性、灵敏度、重复性、交叉反应及抗干扰性能力均符合要求,具有准确、速度快、通量高等优点,是临床实验室病原体测定的可靠方法。

摘要：目的探讨项目导向教学法在检验医学专业实习生临床实习的教学效果。方法通过将我院检验本科专业48名学生随机均等分为实验组和对照组两组,实验组和对照组分别采用项目导向教学法和传统面授教学方法进行教学,教学人员及教学内容相同,课程结束后分别对两组实习同学进行相同的理论知识及实践技能操作等方面的测评。结果实验组学生理论知识成绩、实践技能操作成绩均高于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05);通过对学生的匿名问卷调查显示,项目导向教学法可以有效的提升学生实习效果,同时在提升学生团队协作项目上有显著作用。结论项目导向教学法明显提高了医学检验专业实习生的各项能力;提升了临床带教效果。

摘要：结直肠癌是最常见的恶性肿瘤相关死亡原因之一。肿瘤抑制基因启动子区域的超甲基化使抑癌基因长期处于沉默状态,可引发肿瘤形成、免疫逃逸和转移,并与结直肠癌的发生发展密切相关,发生于肿瘤发生的早期阶段,可能成为结直肠癌早期检测的分子标志物。改善结直肠癌筛查质量以及提高结直肠癌患者治疗依从性成为近年的研究热点,通过检测血液和粪便中的肿瘤相关标志物积极探索新的筛查方法,粪便DNA甲基化检测较目前临床粪便隐血试验和血清标志物测定的灵敏度和特异性更优,有助于降低结直肠癌的患病率及相关死亡率。

摘要：目的了解不同年龄段孕产妇血清维生素A水平,为孕产妇维生素A的合理补充提供依据。方法回顾分析2016年1月1日-2017年9月21日于上海第七人民医院就诊的1 629例孕产期妇女血清维生素A检测数据,年龄为24.5±3.5(18～46)岁,同时以年龄匹配的396名健康女性为对照。结果高龄(36～47岁)孕产妇组与低年龄段(18～27岁)孕产妇组血清维生素A水平差异有统计学意义[(0.75±0.21)μmol/L vs (0.80±0.23)μmol/L,P <0.05];此外,高龄(36～47岁)段妊娠组与正常组血清维生素A水平差异也有统计学意义(P <0.05);孕产妇随年龄增加血清维生素A呈现下降趋势(Cochran Armitageχ~2=6.546,P=0.038)。结论高龄孕产妇较低年龄段妊娠女性更易缺乏维生素A。及时检测血清维生素A水平,对促进高龄孕产妇身体健康及胎儿正常生长发育具有重要意义。

摘要：目的分析呼吸道感染病原体的流行特征,为感控及预防提供科学依据。方法采用间接免疫荧光法检测患者血清9种呼吸道病原体IgM抗体,收集2016-2017年4590例患者检测数据,分析不同病原体在不同性别、年龄患者及季节的流行趋势及特点。结果2016-2017年9种病原体总阳性检出率为30.74%,主要由肺炎支原体(MP)、副流感病毒1、2、3型(PIV-1、2、3)、乙型流感病毒(IVB)组成,阳性检出率分别为21.63%、6.17%、1.68%。2016、2017年女性患者MP阳性检出率明显高于男性患者(P0.05)。IVB感染好发于春、夏季,PIV-1、2、3感染好发于夏、秋季,MP感染好发于夏、秋、冬季;其他病原体阳性检出率无明显季节性差异。各年龄段患者IVB阳性检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05),PIV-1、2、3和MP感染主要以40岁以下人群为主。结论该地区呼吸道感染病原体总阳性检出率较低,主要病原体在不同年龄、不同性别患者及不同季节间存在差异。