摘要：目的探讨高迁移率族蛋白A2(HMGA2)在脂肪间充质干细胞(ADSCs)成骨分化进程中的作用及其在骨缺损修复中的应用。方法通过GEO数据库和Rstudio软件,挖掘出在ADSCs“成脂-成骨”分化平衡中的关键节点因子HMGA2,并通过在线蛋白互作网络分析工具String和绘图软件Cytoscape,绘制HMGA2在成骨分化中的互作关系网络,预测其下游作用靶点。设计Hmga2 siRNA并转染小鼠原代脂肪间充质干细胞(mADSCs),诱导其体外成骨分化,在不同时间点(Day 3,Day 7,Day 14)收集样本,通过碱性磷酸酶染色和茜素红染色评估成骨分化能力,并通过RT-qPCR和Western blotting检测成骨特异性标志物Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨桥蛋白(OPN)和骨钙素(OCN)的表达。将敲低Hmga2的mADSCs移植至小鼠不可自愈合颅骨缺损处,术后6周通过μCT扫描、骨组织学染色检测成骨标志物,评价骨缺损修复效果。结果GEO数据库分析结果显示HMGA2在ADSCs成脂分化进程中表达上调。蛋白互作网络分析提示在ADSCs成骨分化中,HMGA2的潜在作用靶点包括SMAD7、CDH1、CDH2、SNAI1、SMAD9、IGF2BP3、ALDH1A1。抑制Hmga2后,mADSCs中成骨分化相关标志物RUNX2、OPN和OCN的表达显著上调,且碱性磷酸酶的表达和钙结节的形成增加(P<0.05)。在小鼠颅骨缺损模型中,敲低Hmga2促进了骨缺损部位的新骨形成(P<0.05)。结论HMGA2是调控ADSCs成骨分化的重要因子,抑制Hmga2能显著促进ADSCs成骨分化,并加速体内骨缺损的修复。

摘要：仪器分析实验是医学预防及医学检验等专业的重要实验课程之一。为提升本科生的创新实践能力,设计了分别利用高效液相色谱仪(HPLC)和超高效合相色谱仪(UPC2)测定复方阿司匹林片中乙酰水杨酸和咖啡因含量的实验,并将思政元素有机地融入其中。教学实践表明,通过对不同仪器原理、功能特点的比较学习,可以激发学生的实验兴趣和探索精神,增强学生解决问题的能力,进而提升学生的科学素养。

摘要：为实现医学实验试剂管理的信息化、网络化建设,以提升医学实验室管理质量和能力,设计了一套医学实验室试剂管理系统。该系统集成了基础设置、试剂入库、试剂出库、库存管理模块,通过钉钉平台及氚云开发工具实现低成本、定制化的管理功能定制。该系统的构建遵循CNAS按照国际标准ISO15189:2022对医学实验室质量和能力认可的要求,实现了自助扫码出库、过期与低库存预警、多仓库管理和多项目独立管理等功能,兼具开发周期短、管理高效、便于维护等特点。实践表明,该系统可以满足医学实验室教学、科研工作中试剂管理的需求以及精准实验室标准化的管理要求,并在医学实验室试剂管理中起到了良好示范作用,为实验室其他应用场景提供有益借鉴。

摘要：目的构建SD大鼠颅颌面发育相关基因MSX-2与PcDNA3．1融合的高效真核表达载体，为研究MSX-2基因的功能奠定基础。方法根据SD大鼠MSX-2基因的核苷酸序列，设计并合成引物，采用PCR技术，扩增编码MSX-2基因，TA克隆到PMD18-T载体上，再亚克隆到真核表达载体PcDNA3．1的BamHI和Xhol位点。对该重组体进行酶切鉴定，以及测序验证。重组体转染HEK293细胞，RT-PCR和Western blot检测重组MSX-2基因的RNA和蛋白表达情况。结果重组真核表达载体PcDNA3．1-MSX-2经PCR扩增、酶切鉴定均显示有476bp左右的特异性基因片断，证明MSX-2基因正向插入真核表达载体中；碱基序列的测定证明重组质粒中含有SD大鼠的MSX-2基因序列。重组体转染HEK293细胞，RT-PCR和Western blot可检测到重组MSX-2基因的mRNA和蛋白的特异表达。结论成功构建SD大鼠MSX-2基因的高效真核表达载体，为进一步研究MSX-2基因的功能及基因治疗奠定了基础。

摘要：目的探讨10号染色体磷酸酶和张力同源蛋白(phosphatase and tensin homolog,PTEN)对叉头框转录因子M1(forkhead box M1,FoxM1)可变剪接的调控,以及该调控作用对肿瘤细胞迁移的影响。方法在人胚肾293T细胞,人前列腺癌DU145细胞,人结肠腺癌RKO细胞,人结肠癌SW480、SW620细胞中用短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)敲低PTEN的mRNA水平。设计针对FoxM1及其亚型FoxM1B和FoxM1C的特异性引物,用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测FoxM1B和FoxM1C的mRNA表达水平在PTEN敲低前后的差异。在DU145细胞中分别过表达FoxM1B和FoxM1C,利用Transwell细胞迁移实验和划痕实验检测两者对肿瘤细胞迁移的影响。通过免疫荧光和双荧光素酶报告基因检测实验,探索FoxM1B和FoxM1C对肿瘤细胞迁移调控差异的潜在机制。结果①将293T、DU145、RKO、SW480和SW620细胞内的PTEN敲低后,qRT-PCR检测发现,与对照细胞相比,在PTEN敲低的细胞中FoxM1B的mRNA均显著增多,而FoxM1C的mRNA表现为减少或不变。PTEN敲低不影响FoxM1的转录水平,而影响FoxM1的可变剪接,促进了FoxM1B亚型的生成。②Transwell细胞迁移实验结果显示,与对照细胞相比,FoxM1B过表达组DU145细胞迁移数量增多(P=0.024),FoxM1C过表达组DU145细胞迁移数量减少(P=0.000)。细胞划痕实验结果显示,过表达FoxM1B的DU145细胞愈合能力显著增强(P=0.001),过表达FoxM1C的DU145细胞愈合能力减弱(P=0.021)。FoxM1B和FoxM1C对肿瘤细胞迁移具有相反的调节作用:FoxM1B促进肿瘤细胞迁移,而FoxM1C则抑制肿瘤细胞迁移。③FoxM1B和FoxM1C过表达,均未引起β连环蛋白入核。双荧光素酶报告基因检测实验发现FoxM1B和FoxM1C的转录活性没有差别,FoxM1B和FoxM1C在调控肿瘤转移方面的差异不是由β连环蛋白转位介导的。结论PTEN敲低影响肿瘤细胞内FoxM1的可变剪接,导致促迁移的FoxM1B表达增加,从而促进肿瘤细胞迁移。

摘要：病理切片中肾小球的识别和分类是诊断肾脏病变程度和病变类型的关键,为解决肾小球的识别和分类问题,从中检测出肾小球并进行分类,设计了一个基于深度学习的完整的肾小球检测及分类框架.该框架包括肾小球识别的4个阶段,第1阶段的扫描窗生成中,设计一种网络框架RGNet,用于初步判断肾小球可能出现的位置;第2阶段的检测和粗分类中,针对肾小球数据改进了Faster R-CNN;第3阶段基于NMS算法设计了NMS-Lite算法,将检测到的肾小球进行合并;在第4阶段的细分类中,使用数据增强等技巧训练2个神经网络,实现肾小球的病变程度分类.实验结果表明,所提肾小球检测方法在测试集上取得了与同类方法可比的精度,且在一定程度上解决了相似类别的肾小球难以区分的问题.

摘要：目的：探讨儿童、父母的行为生活方式及室内环境暴露与儿童急性白血病（AL）发病关系。方法以2011年4月至2014年1月常住上海市年龄〈15岁的66例新发AL患儿为病例组，通过1∶2配对的病例-对照研究对性别、年龄、居住地进行匹配，排除有血液系统疾病、肿瘤等恶性疾病的儿童，选取132名儿童作为对照组。两组研究对象均排除领养儿童及同时患有唐氏综合征或HIV阳性或其他能够增高白血病发病风险的遗传性疾病者。对两组儿童的父母或监护人进行面对面的访谈式调查，获取研究对象的一般人口学特征、行为生活方式和室内环境暴露等信息。采用多因素条件logistic回归模型分析影响儿童AL发病的因素，计算OR（95%CI）值。结果病例组与对照组年龄分别为（5.0±3.7）、（6.0±3.8）岁（t=0.48,P=0.523）。病例组与对照组父亲日常饮酒率分别为57.6%（38/66）、31.1%（41/132）（χ2=4.91, P=0.027）。两组在最近1年内杀虫剂使用率分别为78.8%（52/66）、65.2%（86/132）（χ2=3.87, P=0.049）。儿童化学物质接触史（OR=4.76,95%CI：1.34~16.89）、母亲化学物质接触史（OR=4.51,95%CI：1.65~12.33）、在儿童0~3岁期间使用过杀虫剂（OR=2.90,95%CI：1.31~6.39）和在儿童出生后有室内装修史（OR=3.12,95%CI：1.26~7.74）均会增加儿童AL的发病风险。此外，儿童3岁前经常接触其他小朋友（OR=0.32,95%CI：0.15~0.69）和儿童夏季睡眠时保持通风（OR=0.43,95%CI：0.18~0.98）会降低儿童患AL的危险。结论儿童、父母的行为生活方式及室内环境可能与儿童AL的发病有关。

摘要：目的研究REXEEDTM系列透析器的溶质清除特性,讨论护理特点。方法规律性血液透析患者18例,采用随机化交叉和3×3拉丁方实验设计,每例患者分别运用REXEEDTM-15AC、15UC和对照透析器APS-15U进行血液透析治疗。于透析器血液入、出口处采血测定尿素氮、肌酐、磷、β2-微球蛋白,计算溶质清除率;在每使用一种透析器的第3次透析前后,采血测定患者血尿素氮和肌酐水平,计算下降比率。严密观察患者生命体征,监测透析机的静脉压和跨膜压数值。结果REXEEDTM-15AC和REXEEDTM-15UC透析器的尿素氮清除率显著大于APS-15U透析器(P65%)。血液透析过程中,患者生命体征稳定,无不良反应发生;实验室安全性指标监测未见异常。结论REXEEDTM系列透析器临床使用安全、有效。透析护理过程中,必须加强观察并重视患者的不适主诉;对于超滤量少的患者,可在适当补充液体的同时增加超滤量,以提高跨膜压,防止反超。

摘要：硫酸胆固醇(cholesterol sulfate,CS)是人体中重要的类固醇硫酸酯,由胞浆磺基转移酶(sulfotransferase,SULT)2B1b催化合成,发挥多种重要的生理作用。其广泛分布于人体,如皮肤、肾上腺、肝脏、肺、脑和子宫内膜等。CS在表皮中参与角质层角化套膜的形成和角质细胞分化标志物的表达,从而调节表皮脱屑和屏障功能;在免疫系统胸腺细胞形成的过程中CS抑制T细胞受体信号的传递,并且CS/胆固醇比例直接影响T细胞的胸腺选择,由此参与成熟T细胞受体组库的塑造;CS通过减少氧化应激、维持线粒体膜稳定和增加能量储备调节脑代谢和发挥神经保护效应。此外,CS还通过调节功能蛋白的活性参与多种疾病的发生发展过程。催化CS脱硫的类固醇硫酸酯酶(steroid sulfatase,STS)基因发生缺失突变直接导致了X连锁鱼鳞病(X-linked ichthyosis,XLI)的发生;CS通过促进β淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)聚集参与阿尔茨海默病的发生发展;CS通过抑制肝细胞核因子4α(hepatocyte nuclear factor 4α,HNF4α)的活化来调控糖异生,其衍生物有望用于治疗2型糖尿病;CS在多种癌症中均有异常表达,可与基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)相互作用诱导癌细胞的聚集和转移。现阶段的研究重点是在病理生理条件下揭示其具体的分子机制,并由此设计可行的临床治疗方案。

摘要：上海交通大学医学院基础医学实验教学中心形成了由基础医学院领导,中心独立运行、人员归属实验教学中心的管理体制。同时,优化配置,共享实验教学资源,为多学科实验教学的交叉、融合提供技术平台;并以教研室为支撑,理论教学与实验教学相结合,打破学科界限,改变以课程为单位的实验课程,构建整合式实验教学课程体系:基础性实验、综合性实验和设计性实验(含探究性实验)。实验教学与科研、临床相结合,经典实验与现代技术相结合,实验教学手段多样化,提升实验教学在培养学生实践能力和创新能力中的作用,提高实验教学质量。