摘要：目的构建组织转谷氨酰胺酶（tTG）RNA干扰（RNAi）慢病毒载体，研究其对肝星状细胞（HSC）的影响。方法设计、合成tTG基因RNAi有效靶序列，与慢病毒载体系统进行连接、转染，获得表达tTG基因的RNAi慢病毒载体质粒（Lenti—siRNA—tTG）；将大鼠活化HSC分成阴性对照组（CON）、siRNA—GFP对照组（GFP）和siRNA—tTG组（rtTG）。应用real—timePCR、Western blot和MTT法检测Lenti-siRNA—tTG感染后HSC中tTG、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原（collagen-1）的mRNA和蛋白表达情况以及HSC的增殖情况。结果成功构建siRNA-tTG慢病毒载体；Lenti—siRNA-tTG感染后，HSC中tTG和collagen-1的mRNA表达水平降低（P〈0．05），HSC中tTG、lysine和collagen-1的蛋白表达水平下降（P〈0．01），HSC的增殖能力降低（P〈0．05）。结论Lenti-siRNA-tTG能通过抑制HSC中tTG基因的表达而抑制HSC的增殖，并降低HSC中collagen-1合成和交联的形成，具有潜在的抗纤维化形成的功能。

摘要：目的探讨siRNA干扰大鼠含I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶2（ADAMTS2）基因后对大鼠肝星状细胞（HSC）生物学特性的影响及其机制，评估ADAMTS2基因作为一种新的靶向基因在抗肝纤维化治疗中的应用前景。方法设计并化学合成3对针对大鼠ADAMTs2mRNA2237、2597及690位点的siRNAs。用筛选出的抑制效率最高的siRNA体外转染HSC—T6，应用实时PCR、Westernblot及MTT等方法研究沉默ADAMTS2基因对大鼠HSC活化、增殖等生物学特性及对基因ADAMTS2、α—SMA、COLlal、COL（I）、TGF-β1、MMP-2和TIMP-3表达的影响。结果在相同注射剂量（50nmol／L）及时间（48h）下，2237位点的siRNA—ADAMTS2具有最高的抑制效率；能显著抑制ADAMTS2基因mRNA和蛋白表达（抑制率80％以上）；显著抑制COL（I）、α—SMA和TGF—β1在HSC中的表达。HSC的增殖能力显著降低。结论化学合成的siRNA—ADAMTS2干扰载体能有效抑制ADAMTS2基因在大鼠HSC-T6细胞系中的表达，抑制HSC的活化和增殖，同时显著降低COL（I）、α—SMA和TGF-β1的表达，具有潜在的阻止甚至逆转肝纤维化的作用。ADAMTs2可能是抗肝纤维化治疗的有效靶位，抑制ADAMTS2在肝脏的表达可能是一种有效的抗肝纤维化治疗策略。

摘要：背景:可诱导T细胞共刺激分子(ICOS)属于B7-CD28免疫球蛋白家族,参与细胞增殖、分化以及免疫应答等多种生物学过程,其表达异常与肿瘤免疫逃逸密切相关。目的:探讨ICOS在结直肠癌中的表达及其临床意义。方法:收集32对新鲜结直肠癌组织和相应癌旁非癌组织,以及211例石蜡包埋结直肠癌组织,分别采用real-timePCR和免疫组化法检测ICOSmRNA和蛋白表达,分析其表达与患者临床病理特征和预后的相关性。结果:与非癌组织相比,ICOS在结直肠癌组织中呈低表达(P0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,结直肠癌患者ICOS表达水平越低,预后越差(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,ICOS表达水平是结直肠癌患者的临床预后指标之一(HR=0.821,95%CI:0.588~0.912,P=0.034)。结论:ICOS低表达可能在结直肠癌的发生、发展中发挥重要作用,并与预后不良相关。ICOS有望成为结直肠癌预后的分子标志物。

摘要：目的构建人基因组中16个组蛋白乙酰化酶的短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体文库,为进一步研究表观遗传因子对胆囊癌的调控机制提供有利的工具。方法依据shRNA引物设计原则,分别针对每个基因设计4对shRNA引物,将引物退火形成粘性末端后连接至慢病毒载体;经菌落PCR、酶切验证正确后,进行转化及质粒抽提。结果构建了16个组蛋白乙酰化酶基因的shRNA慢病毒载体,共64个shRNA慢病毒载体克隆;并对胆囊癌细胞SGC996和GBC-SD进行了病毒感染的MOI值(multiplicity of infection)摸索,以确保可通过RNAinterference(RNAi)慢病毒干扰的方式对这两株细胞进行研究。结论成功构建了16个组蛋白乙酰化酶的shRNA慢病毒载体,从而为在SGC996和GBC-SD胆囊癌细胞中研究人组蛋白乙酰化酶奠定坚实的基础。

摘要：背景:胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,中医药已广泛用于胃癌的临床治疗,但尚未见到较大样本临床对照研究对其疗效进行评价。目的:通过对220例老年胃癌预后的分析,研究以健脾为基础的中药复方辨证治疗对老年胃癌预后的影响。设计、场所、受试者和干预措施:采用前瞻性同期病例对照研究方法,将65岁及以上老年胃癌病例(来自上海龙华医院肿瘤一科、瑞金医院消化外科和仁济医院普外科)分为接受中药复方辨证治疗的中药组和未接受中药治疗的非中药组。主要结局指标:依据临床病理分期,是否接受根治性手术和化疗进行分层。运用单因素及Cox多因素回归分析方法分析两组病例的临床病理因素及手术、化疗以及中药治疗对预后的影响。结果:共有220例病例纳入研究。中药组89例,非中药组131例。总体220例病例的Cox多因素回归分析表明,影响老年胃癌患者生存的独立的预后因素分别是临床病理分期、手术方式、化疗和中药治疗(P<0.01)。服用中药的相对危险度为0.322,95%可信区间在0.212～0.489。中药组中位总生存期为41.129个月,1、3、5年生存率分别为85.2%、55.6%、45.7%;非中药组中位总生存期为17.195个月,1、3、5年生存率分别为63.9%、26.9%、21.9%。对未手术或术后复发转移的晚期胃癌分层研究,Cox多因素回归分析示,中药治疗和化疗是影响老年晚期胃癌患者总生存期独立的保护性因素(P<0.01),服用中药的相对危险度为0.421,95%可信区间在0.255～0.693;晚期中药组(36例)中位总生存期为17.819个月,晚期非中药组(60例)中位生存期为8.548个月。对临床病理分期为Ib-Ⅳ(T4N1-3M0、T1-3N3M0)接受根治性手术(R0)且接受3个及以上周期术后辅助化疗病例的分层研究结果显示,术后中药组和术后非中药组的无病生存期和总生存期均未达到中位数,故未作Cox多因素回归分析;术后中药组(33例)1、3、5年无病生存率分别为97.0%、59.9%、50.4%,1、3、5年生存率分别为100.0%、74.1%、61.4%;术后非中药组(69例)1、3、5年无病生存率分别为82.6%、51.1%、51.1%,1、3、5年生存率分别为86.9%、55.6%、55.6%。结论:以健脾为基础的中药复方辨证治疗可改善老年胃癌的总体预后,是老年晚期胃癌预后的有效保护性因子,对老年根治性胃癌术后无病生存期和总生存期的影响需要继续随访评价。

摘要：目的比较经腹股沟切口前入路单纯腹膜前修补与改良Kugel修补术治疗原发性腹股沟疝,评价二种术式的疗效及优缺点。方法回顾性非随机对照方法,将2011年7月至2013年12月,上海交通大学医学院附属仁济医院嘉定分院收治的302例原发性腹股沟疝患者(其中17例为双侧)分为单纯腹膜前修补组(OP组)145例和改良Kugel修补组(MK组)157例。OP组采用Oval Patch补片修补,MK组采用Modified Kugel(MK)修补。比较二组患者在手术时间、住院时间、术后疼痛、手术并发症及复发率等方面的差异。结果二组患者的平均随访时间3～30个月,平均(12±5)个月。二组患者的平均手术时间、住院时间差异无统计学意义(t=0.164、0.939,P=0.870、0.349)。术后1周和1个月,OP组术后腹股沟区疼痛不适的发生率低于MK组,差异有统计学意义(χ2=4.704、2.297,P=0.030、0.021)。结论经腹股沟切口单纯腹膜前修补与改良Kugel修补术相比,单纯腹膜前疝修补术操作简单,可明显降低术后患者疼痛不适的发生率,具有较好临床应用价值。

摘要：目的基于PubMed数据库分析创伤性脑损伤患者康复治疗的研究热点及趋势。方法通过PubMed数据库检索2016年1月1日至2022年7月31日收录的创伤性脑损伤患者康复治疗相关文献,运用CiteSpace 5.8.R3可视化软件纳入文献的作者、机构、关键词等。结果共纳入4517篇文献,发文量呈现增长趋势并于2021年达到顶峰;发文量前3位的国家为美国、加拿大和澳大利亚;排名前5位的高频关键词执行功能、认知康复、生活质量、弥散张量成像和重返工作岗位,其中认知康复具有高中介中心性,研究对关键词进行聚类分析后共得21个聚类。结论创伤性脑损伤患者康复治疗相关研究依然处于活跃水平,研究者可借鉴国外经验扩展科研思路,对执行功能、认知功能的康复研究也是时下研究热点,研究设计方面应尝试开展随机对照研究,人机互动的康复训练、音乐疗法、弥散张量成像技术等也是将来的研究趋势。

摘要：目的研究门肺高压症(PPHTN)患者骨成形蛋白Ⅱ型受体(BMPR2)基因的表达。方法确定BMPR2基因13个外显子有效编码序列,使用Premier Primer 5.0和Oligo 6软件设计每个外显子的正、反向测序引物。对4例PPHTN患者、5例门静脉高压症(PHT)对照患者和5例正常对照者的外周血中BMPR2基因的外显子进行PCR扩增和直接测序。结果 1例正常人BMPR2基因的第9号外显子第1 149 bp发生G→A的杂合变异,使第383个密码子由编码甲硫氨酸的ATG变成编码异亮氨酸的ATA(M383I),但BMPR2蛋白质的功能似乎未受影响。此位点不属于目前已知的人类BMPR2基因342个单核苷酸多态性位点之一。其余13例检测结果均正常。结论 PPHTN患者BMPR2基因的外显子编码序列没有发现异常,BMPR2基因的第9号外显子第1 149 bp可能是汉族人的一个新的编码区单核苷酸多态性位点。

摘要：目的阐述腹腔镜与内镜联合应用治疗直肠癌的优势,并对未来直肠癌的手术方式的发展方向进行预测。方法收集国内外有关腹腔镜与内镜双镜联合治疗直肠癌的相关文献,并结合我国及笔者所在医院的临床实践经验进行综述。结果腹腔镜与内镜联合应用治疗直肠癌,能将腹腔镜的腹腔监视与内镜的精确定位相结合,使两者取长补短、优势互补,达到"更小创伤、更少疼痛和更快恢复"的目标,实现"1+1>2"的效果。结论腹腔镜与经肛门内镜显微手术联合,可能会成为一种新的经自然腔道内镜手术治疗直肠癌的手术方式。

摘要：目的基于多尺度融合注意力机制,提出改进Attention U-Net的胆囊自动分割模型,提高胆囊自动分割模型的性能,以辅助医生进行临床诊断。方法首先选取2017年1月—2019年12月上海交通大学医学院附属新华医院普外科、吉林大学白求恩第一医院肝胆胰外一科和吉林大学中日联谊医院普外科收治的88例病理诊断明确的胆囊癌患者、28例慢性胆囊炎胆囊结石患者和29例健康对照,构建胆囊分割数据集,然后通过对医学常用深度学习图像分割方法U-Net和Attention U-Net进行分析,提出基于多尺度融合注意力机制改进的Attention U-Net方法,并设计实验对3种方法进行对比评估。结果提出的改进Attention U-Net方法在验证集上的交并比阈值(IoU)分数、Dice系数、检测精度(Precision)和召回率(Recall)分别为0.72、0.84、0.92、0.79,全部优于传统U-Net和Attention U-Net方法。结论本文提出了基于多尺度融合注意力机制改进的Attention U-Net模型,其性能优于U-Net和Attention U-Net,证明了本方法中改进的注意力机制可以很好地改善U-Net模型在胆囊影像上的分割结果。