摘要：目的·检测TWEAK刺激后,巨噬细胞及其分泌的外泌体中miRNA-7的表达;探索TWEAK刺激后,巨噬细胞源性外泌体抑制上皮性卵巢癌细胞(HO8910-PM)侵袭和迁移的机制。方法·收集TWEAK刺激前后的巨噬细胞源性外泌体,并将其与HO8910-PM细胞共培养,real-time PCR检测巨噬细胞、巨噬细胞源性外泌体和共培养后HO8910-PM细胞中miRNA-7的表达;Western blotting检测共培养后HO8910-PM细胞中EGFR/AKT/ERK1/2信号通路的表达;Antagomi R-7处理降低巨噬细胞中miRNA-7表达后,收集TWEAK刺激前后的外泌体并进行transwell侵袭和迁移实验,观察HO8910-PM细胞侵袭和迁移能力的变化。结果·TWEAK刺激后,巨噬细胞内及其外泌体中miRNA-7的表达升高,并可上调HO8910-PM细胞中miRNA-7的表达,下调EGFR信号通路的表达。预先下调巨噬细胞中miRNA-7的表达后,巨噬细胞源性外泌体和共培养后HO8910-PM细胞中miRNA-7的表达降低,TWEAK刺激的巨噬细胞源性外泌体原先抑制HO8910-PM细胞转移的作用得到恢复。结论·miRNA-7在TWEAK刺激巨噬细胞分泌的外泌体中发挥重要作用,可通过抑制上皮性卵巢癌细胞中EGFR信号通路抑制其侵袭和迁移。

摘要：目的·探讨宫颈转化区类型在评估阴道镜下未见病变者是否采用随机活检诊断宫颈高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)中的价值。方法·选取因人乳头瘤状病毒(human papillomavirus,HPV)高危亚型感染或液基薄层细胞学检测(thinprep cytologic test,TCT)结果异常而行阴道镜检查且未见病变患者517例,明确其宫颈转化区类型,并行宫颈随机活检,评估Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型宫颈转化区对诊断宫颈HSIL的价值。结果·阴道镜下未见病变者517例,其中Ⅲ型转化区396例,随机活检HSIL检出率为3.8%(15/396);Ⅰ、Ⅱ型转化区121例,HSIL的检出率为8.3%(10/121)。与Ⅲ型转化区相比,Ⅰ、Ⅱ型转化区HSIL的检出率显著升高(P=0.000)。Logistics回归结果提示,TCT结果异常和转化区类型为Ⅰ、Ⅱ型是阴道镜下未见病变者检出HSIL的危险因素。结论·对于阴道镜下未见病变但转化区为Ⅰ、Ⅱ型及TCT异常的女性,随机多点活检可提升其宫颈HSIL的检出率。

摘要：目前,卵巢恶性肿瘤的一线治疗方案为手术及化疗,但化疗耐药性患者日趋增多。虽然分子靶向治疗和免疫治疗已取得一定疗效,但卵巢癌患者的5年总生存率仍未有明显提高。RNA干扰可引发转录后水平的基因沉默,因此基于RNA干扰的基因治疗可能成为治疗卵巢癌的一条新途径。非病毒纳米级载RNA系统具有毒性低和核酸载量高的优点,其载体材料主要分为高分子聚合物、脂类、介孔硅纳米材料以及天然纳米材料等。近年来,非病毒纳米级载RNA系统在卵巢癌基因治疗的研究中取得了一定的良好效果。本文重点综述近年来国内外有关纳米级载RNA系统的相关文献,并介绍其在卵巢恶性肿瘤领域的应用研究进展。

摘要：目的探讨抑制1-磷酸鞘氨醇受体2（S1PR2）对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞增殖能力的影响及其作用机制。方法（1）设计针对S1PR2基因的小分子干扰RNA（siRNA，命名为si-S1PR2），以及与S1PR2基因无关的siRNA（作为阴性对照）；以卵巢癌细胞系SKOV3细胞作为研究对象，实验分为3组，分别为si-S1PR2转染组、阴性对照组和空白对照组，采用蛋白印迹（western blot）法检测3组SKOV3细胞中S1PR2蛋白的表达。（2）体外实验：分组同前，采用活细胞计数（CCK-8）法检测转染后不同时间点（分别为24、48、72 h）3组SKOV3细胞增殖的抑制率；流式细胞仪检测转染后3组SKOV3细胞的细胞周期比例；western blot法检测转染后3组SKOV3细胞中磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2（p-ERK1/2）蛋白的表达水平。（3）体内实验：将SKOV3细胞接种于裸鼠腹腔，构建卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型。实验分为两组，分别为S1PR2抑制剂组和对照组（每组8只裸鼠），两组裸鼠在腹腔接种SKOV3细胞后7 d开始腹腔给药，分别给予S1PR2抑制剂——JTE-013和磷酸盐缓冲液（PBS），每周2次共8次。28 d后处死并解剖两组裸鼠，观察腹腔移植瘤的生长情况。结果（1）western blot法检测显示，si-S1PR2转染组SKOV3细胞中S1PR2蛋白的表达水平为0.24±0.04，与阴性对照组（1.07±0.13）、空白对照组（1.10±0.14）分别比较，差异均有统计学意义（P均〈0.01）。（2）CCK-8法检测显示，转染24、48、72 h后，si-S1PR2转染组SKOV3细胞增殖的抑制率[分别为（26.6±3.3）%、（35.0±3.4）%、（34.0±2.8）%]明显高于阴性对照组[分别为（1.7±0.9）%、（2.5±0.5）%、（2.4±1.1）%；P均〈0.01]及空白对照组（均为0；P均〈0.01）。流式细胞仪检测显示，转染48 h后，si-S1PR2转染组细胞的G0/G1期比例为（70.9±2.8）%，明显高于空白对照组及阴性对照组[分别为（61.7±2.4）%、（62.1±3.3）%；P均〈0.01]。western blot法检测显示，转染48 h后，si-S1PR2转染组细胞中p-ERK1/2蛋白的表达水平为0.11±0.03，明显低于阴性对照组和空白对照组（分别为0.68±0.09、0.62±0.09；P均〈0.01）。（3）28 d后处死并解剖裸鼠，S1PR2抑制剂组、对照组裸鼠腹腔内的移植瘤数分别为（8.2±3.7）、（15.4±4.3）个，移植瘤质量分别为（0.21±0.07）、（0.45±0.12）g，两组分别比较，差异均有统计学意义（P均〈0.01）。结论在体内、外抑制S1PR2蛋白表达后均能降低卵巢癌SKOV3细胞的增殖能力，其机制之一可能是通过下调细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）通路的磷酸化水平，阻止卵巢癌细胞从G1期到S期的转化。

摘要：目的:探讨CD4、CD8、FoxP3在子宫颈癌新辅助化疗(NACT)前后表达的变化及临床价值。方法:选择上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科2013年10月至2017年9月收治的应用NACT的局部晚期(ⅠB2~ⅡB)子宫颈癌患者NACT前后免疫组化检测CD4+、CD8+及FoxP3表达的变化,并通过计算机软件进行定量分析其与化疗疗效、无病生存期(PFS)、总体生存期(OS)之间的关系。结果:局部晚期子宫颈癌NACT前后CD4、CD8、FoxP3在组织中表达的变化与患者年龄、病灶大小无相关性(P>0. 05),但是CD4、CD8与子宫颈癌FIGO分期呈正相关(P 0. 05),但NACT后CD8表达的增加与患者PFS呈正相关(r=0. 309,P=0. 041),而与CD4(P=0. 581)、FoxP3(P=0. 134)无明显关系。患者的OS与CD4、CD8和FoxP3化疗前后表达的变化无明显相关性(P> 0. 05)。结论:局部晚期子宫颈癌NACT后,CD4、CD8、FoxP3表达较NACT前升高,CD4、CD8表达的变化与肿瘤分期、病理分级相关,而且CD8化疗前后的变化可以作为独立的预后指标。

摘要：目的:研究鞘氨醇激酶2(SphK2)对人卵巢癌细胞系SKOV3和HO8910细胞侵袭和迁移能力的影响,探讨其可能调控机制。方法:设计并体外合成靶向SphK2的shRNA(short hairpin RNA)序列(shRNA SphK2)及阴性对照序列(shRNA NC),并与LV3(H1/GFP&Puro)慢病毒载体重组形成shRNA表达载体,包装shRNA慢病毒颗粒后分别转染SKOV3和HO8910细胞系。分别用Real-time PCR和Western blot法检测shRNA SphK2病毒颗粒转染后在mRNA及蛋白水平的沉默效率。Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力变化;Western blot法检测SphK2敲降后细胞中MMP-9蛋白表达。结果:用构建的shRNA慢病毒颗粒感染SKOV3和HO8910细胞后,SphK2 mRNA和蛋白表达水平显著下降。SKOV3和HO8910细胞中,shRNA SphK2转染组的迁移和侵袭细胞数均显著少于shRNA NC组和未转染组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,转染后48h,shRNA SphK2转染组中MMP-9蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论:SphK2可促进卵巢癌细胞的迁移和侵袭,其分子机制可能与调节MMP-9表达有关,提示SphK2在卵巢癌的发展转移中起着重要的作用。

摘要：妊娠期宫颈可发生炎性疾病,人乳头瘤病毒(HPV)感染,宫颈上皮内瘤样病变(CIN)甚至宫颈浸润癌。近年来,对妊娠期宫颈疾病的关注度逐渐上升。妊娠合并宫颈疾病可通过细胞学检查、HPV-DNA检测、P16/Ki67双联染色、阴道镜、活检和宫颈锥切等进行诊断。治疗方面妊娠合并HPV感染没有特别治疗;CIN患者排除宫颈浸润癌后可行细胞学及阴道镜随访至分娩;妊娠合并宫颈癌的处理较为复杂,需要考虑到肿瘤治疗与胎儿安全之间的平衡,治疗需综合考虑肿瘤大小、淋巴结转移情况及患者继续妊娠的意愿。分娩时机及分娩方式方面,合并宫颈感染性疾病及CIN的妊娠患者均按照产科处理;Ⅰa1期、间质浸润深度<3 mm并且切缘阴性宫颈癌患者可妊娠至足月阴道试产,对于更高期别患者建议胎儿成熟后剖宫产终止妊娠。

摘要：目的:探究鞘氨醇-1-磷酸/鞘氨醇-1-磷酸受体(S1P/S1PR)对人卵巢癌SKOV3细胞促血管生成作用的影响和机制。方法:管腔形成实验探究S1P对人卵巢癌SKOV3细胞的促血管生成作用的影响;实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测S1P处理后的人卵巢癌SKOV3细胞中血管生成因子白细胞介素8(IL-8)、IL-6、血管内皮生长因子(VEGF)的变化情况;设计合成小干扰RNA(siRNA)干扰序列基因沉默SKOV3细胞中S1PR1、S1PR2和S1PR3的表达,蛋白质印迹(Western-blot)和qRT-PCR检测SKOV3细胞中S1PR的下调结果;qRT-PCR检测S1PR对SKOV3细胞IL-8、IL-6、VEGF表达的影响。结果:管腔形成实验结果显示,S1P处理后的SKOV3细胞培养上清液重悬人脐静脉内皮细胞融合细胞(***926),其管腔形成的数量多于对照组(t=3.667,P=0.021),表明S1P促进了人卵巢癌细胞SKOV3的促血管形成能力。S1P处理后的SKOV3细胞中血管生成因子IL-8、IL-6、VEGF mRNA的表达水平较对照组升高,差异有统计学意义(均P<0.05)。S1PR1和S1PR3基因沉默可显著降低SKOV3细胞中IL-8、IL-6、VEGF的mRNA表达水平,差异有统计学意义(均P<0.05),而S1PR2基因沉默后IL-8、IL-6、VEGF的mRNA变化不明显。结论:S1P通过S1PR1/3上调人卵巢癌SKOV3细胞中IL-8、IL-6、VEGF的表达,从而增强了SKOV3细胞的促血管生成作用,S1P/S1PR通路有望成为抑制卵巢癌生长的治疗新靶点。

摘要：卵巢癌是致死率最高的妇科生殖系统恶性肿瘤。因其起病隐匿,诊断时常已处在较难治愈的晚期阶段,且常反复出现药物抵抗及复发转移,导致不良预后结局,5年生存率仅为25%~30%左右。因此,更敏感、更高效的诊断方法和治疗靶点有待被发现。近年来,长链非编码RNA(lncRNAs)成为肿瘤学领域的研究热点,学者们在多种人类恶性肿瘤中发现lncRNAs表达异常并参与调控肿瘤的发生发展进程,提示其可作为新兴的诊断标志物或治疗靶点。本文综述近年来卵巢癌中lncRNAs的研究进展,分析这些lncRNAs在卵巢癌的发生和发展过程中的调控作用,及其与相关微小RNA相互作用的情况。