摘要：目的 检测鲍氏不动杆菌的耐药表型及abaR基因并探讨该基因对鲍氏不动杆菌生物膜形成的影响。方法 2014年2—7月，从上海交通大学医学院附属瑞金医院临床微生物科收集到159株鲍氏不动杆菌，按收集顺序从1开始进行编号。（1）通过检测鲍氏不动杆菌16S核糖体DNA序列对上述159株鲍氏不动杆菌进行菌种鉴定，根据药物敏感试验结果挑选出泛耐药菌株和敏感菌株，记录其菌株数及其标本来源。（2）取鲍氏不动杆菌泛耐药菌株和敏感菌株，培养12、24、48、72 h，通过噻唑蓝法测定鲍氏不动杆菌生物膜形成情况（以吸光度值表示）。（3）通过美国国家生物技术信息中心基因数据库进行基因序列分析鲍氏不动杆菌ATCC 17978中abaR基因序列，并将其与嗜油不动杆菌DR1菌株的LuxR型受体AqsR基因序列进行比对。以鲍氏不动杆菌ATCC 17978 abaR为目的基因序列，PCR扩增87和96号鲍氏不动杆菌菌株并测序。将测序结果与鲍氏不动杆菌ATCC 17978 abaR基因序列进行比对。（4）取87号和96号鲍氏不动杆菌菌株，每株细菌均分为0.1%二甲基亚砜（DMSO）组、10 μmol/L N－庚酰－L－高丝氨酸内酯（C7－HSL）组、10 μmol/L N－（3－氢氧化十二酰基）－DL－高丝氨酸内酯（OH－dDHL）组、1%DMSO组、100 μmol/L C7－HSL组、100 μmol/L OH－dDHL组，每组3孔，分别用对应终体积分数的DMSO或对应终物质的量浓度的C7－HSL和OH－dDHL处理。通过噻唑蓝法检测培养12、X4、48 h，87号菌株和96号菌株的生物膜形式情况（以吸光度值表示）。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD检验及Bonferroni校正。结果 （1）共收集18株泛耐药菌株和5株敏感菌株，其中泛耐药菌株主要分布于本院急诊ICU、烧伤整形科，标本以痰液、血液及创面分泌物为主；敏感菌株来源分散，标本以痰液为主。（2）鲍氏不动杆菌泛耐药菌株培养各时相点吸光度值与敏感菌株相近（P值均大于0.05）。鲍氏不动杆菌泛耐药菌株培养24 h吸光度值均显著高于该类菌培养12、48、72 h（P值均小于0.01）；鲍氏不动杆菌敏感菌株培养24 h吸光度值显著高于该类菌培养12 h（P〈0.01）。（3）鲍氏不动杆菌中存在LuxR型受体abaR基因序列，与嗜油不动杆菌DR1菌株中的LuxR型受体AqsR相似度为87%。87号菌株及96号菌株中的abaR基因序列与鲍氏不动杆菌ATCC 17978的相似度分别为98%、99%。（4）87号菌株0.1%DMSO组培养各时相点吸光度值和1%DMSO组相近（P值均大于0.05）。96号菌株0.1%DMSO组培养12 h吸光度值显著低于1%DMSO组（P〈0.01），培养24 h吸光度值显著高于1%DMSO组（P〈0.01）。87号菌株及96号菌株10 μmol/L C7－HSL组培养24 h吸光度值均显著低于各自对应的0.1%DMSO组（P值均小于0.01）。87号菌株100 μmol/L C7－HSL组培养各时相点吸光度值与1%DMSO组相近（P值均大于0.05），96号菌株100 μmol/L C7－HSL组培养12 h吸光度值显著低于1%DMSO组（P〈0.01）。87号菌株和96号菌株10 μmol/L OH－dDHL组培养各时相点吸光度值与0.1%DMSO组相近（P值均大于0.05）。87号菌株100 μmol/L OH－dDHL组培养各时相点吸光度值与1%DMSO组相近（P值均大于0.05）。96号菌株100 μmol/L OH－dDHL组培养12 h吸光度值显著高于1%DMSO组（P〈0.01）。87号菌株及96号菌株0.1%DMSO组和1%DMSO组培养24 h吸光度值均显著高于培养12、48 h（P值均小于0.01）。结论 鲍氏不动杆菌泛耐药菌株普遍存在。鲍氏不动杆菌中存在abaR基因，与生物膜形成相关。

摘要：目的观察短暂高糖环境暴露对体外培养人真皮微血管内皮细胞生物学行为的影响。方法本研究所有检测指标对应的细胞分组及处理如下：将第4代人真皮微血管内皮细胞按随机数字表法分成3组，每组12孔。对照组细胞采用含5mmol／LD-葡萄糖的完全培养液培养7d；短暂高糖组细胞在含30mmol／LD-葡萄糖的完全培养液中培养2d，再改用含5mmol／LD-葡萄糖的完全培养液继续培养5d；长时高糖组细胞采用含30mmol／LD-葡萄糖的完全培养液培养7d。（1）采用倒置光学显微镜观察对照组和长时高糖组培养7d以及短暂高糖组培养2、7d细胞形态学变化。（2）培养0、2、4、7d，采用细胞存活率分析计数器检测细胞增殖率。（3）培养2d后进行划痕实验，划痕后继续培养，于划痕后0、24、48、72、96、120h测量划痕面积，计算后5个时相点细胞迁移率。（4）培养0、2、4、7d，采用细胞分析仪检测细胞凋亡率。（5）培养7d后再在基质胶上培养24h，采用倒置光学显微镜观察血管样结构形成情况，并计算血管样结构长度、分叉点数量。（6）培养2、4、7d，采用实时荧光定量***法检测血管化相关基因基质金属蛋白酶组织抑制剂3（TIMP-3）mRNA表达。对数据行析因设计方差分析、重复测量方差分析、单因素方差分析、LSD检验。结果（1）对照组细胞培养7d，细胞呈卵圆形，铺路石样排列。短暂高糖组细胞培养2d，形态变细长，排列丧失铺路石样；培养7d仍保持细长，丧失铺路石样排列。长时高糖组细胞培养7d，形态变细长，排列丧失铺路石样。（2）培养0d，3组细胞增殖率差异无统计学意义（F=0．23，P〉0．05）。培养2d，短暂高糖组和长时高糖组细胞增殖率相近（P〉0．05），且均低于对照组（P值均小于0．01）；培养4、7d，短暂高糖组和对照组细胞增殖率相近（P值均大于0．05），且均高于长时高糖组（P值均小于0．01）。（3）划痕后24—120h，短暂高糖组和长时高糖组细胞迁移率均相近（P值均大于0．05），且均低于对照组（P值均小于0．01）。（4）培养0d，3组细胞凋亡率差异无统计学意义（F=0．78，P〉0．05）。培养2d，短暂高糖组和长时高糖组细胞凋亡率相近（P〉0．05），且均高于对照组（P值均小于0．01）；培养4、7d，短暂高糖组和对照组细胞凋亡率相近（尸值均大于0．05），且均低于长时高糖组（P值均小于0．01）。（5）短暂高糖组和长时高糖组细胞形成血管样结构长度分别为（1．84±0．10）×10^5、（1．82±O．11）×10^5μm（P〉0．05），均短于对照组的（2．75±0．23）×10^5μm（P值均小于0．01）；短暂高糖组和长时高糖组细胞形成血管样结构分叉点数量分别为（43±5）、（46±8）个（P〉0．05），均少于对照组的（103±21）个（P值均小于0．01）。（6）培养2、4、7d，短暂高糖组和长时高糖组细胞TIMP-3的mRNA表达量相近（P值均大于0．05），且均低于对照组（P值均小于0．05）。结论短暂高糖环境暴露能诱导体外培养的人真皮微血管内皮细胞形态、迁移和血管形成发生“代谢记忆”从而导致其产生持久的生物学行为变化，其机制可能与调控血管化相关基因发生改变有关。

摘要：本刊是国内烧伤专业惟一权威性学术期刊，长期以来承蒙广大作者、读者厚爱，收稿率逐年上升。但从投稿情况来看，临床论文数量虽有逐年增多趋势，质量却不尽如人意，作者通常是收集了好的素材，有了好的研究切入点，却不知如何设计实施、总结撰写，令人惋惜。为拓宽学术交流范围，产生更多临床高质量论文，本刊编辑部特别在第八届全国烧伤救治专题研讨会上增设“临床科研设计”与“临床医学论文写作”发言环节，邀请几位颇有心得的教授，分别从审稿专家以及高中稿率作者的角度，与大家分享他们的经验体会，参会代表反响热烈。杂志特从本期起开设专栏，陆续刊出相关优秀稿件，以飨读者。

摘要：目的探讨敲除abaR基因对鲍氏不动杆菌生长代谢和生物膜形成的影响。方法应用同源重组方法敲除鲍氏不动杆菌ATCC 17978(野生株)abaR基因,获得ATCC 17978abaR敲除株(ATCC 17978/ΔabaR::Kn),通过PCR电泳和测序验证。应用酶标仪测定鲍氏不动杆菌野生株和敲除株培养18 h内的生长曲线,同时应用结晶紫染色法分别于培养8、24、48 h,测定生物膜形成能力,结果均以吸光度值表示,每个时间点样本数为3。对数据进行析因设计方差分析、单因素方差分析、t检验、LSD检验。结果(1)打靶片段ΔabaR::Kn的PCR产物大小为3029 bp。ATCC 17978野生株成功敲除abaR基因后获得ATCC 17978敲除株(ATCC 17978/ΔabaR::Kn),敲除株PCR产物大小3300 bp,说明abaR基因被成功敲除。(2)培养2、3、4 h,鲍氏不动杆菌野生株吸光度值稍高于敲除株;培养5~18 h,鲍氏不动杆菌野生株和敲除株各时间点吸光度值相近。(3)培养8、24 h,鲍氏不动杆菌野生株生物膜形成能力(0.644±0.066、0.574±0.184)与敲除株(0.559±0.008、0.394±0.030)相近(t=2.209、1.167,P>0.05);培养48 h,鲍氏不动杆菌野生株生物膜形成能力(1.157±0.259)明显强于鲍氏不动杆菌敲除株(0.576±0.026,t=3.865,P<0.05)。鲍氏不动杆菌野生株培养48 h的生物膜形成能力明显强于培养8、24 h(P<0.05),鲍氏不动杆菌敲除株培养24 h的生物膜形成能力明显弱于培养8、48 h(P<0.05)。结论利用同源重组方案,可成功敲除鲍氏不动杆菌ATCC 17978 abaR基因,获得鲍氏不动杆菌敲除株ATCC 17978/ΔabaR::Kn。敲除abaR基因后,鲍氏不动杆菌自身的生长代谢不受影响,但其生物膜形成能力明显减弱。

摘要：依据国家卫生健康委办公厅的文件规定,在门诊接诊过程中,需要做到“一人一诊一室”。但是,如果按目前医院创面修复专科门诊的常规布局,当医师查看创面后,照“诊疗要分离”的规定,患者需到另外一个空间换药。让患者裸露着创面来回于各个诊室,或采用原敷料再次覆盖创面后,患者至其他诊室换药,均不符合医院感染控制的规定和无菌原则。为让创面修复科的门诊诊室布局既遵守“一人一诊一室”的原则,又符合慢性创面诊疗流程的特点,本文提出创面修复门诊“大空间、小隔断”布局的建议。

摘要：背景:目前,国内尚无批准上市的植入性异种真皮基质。目的:评价异种脱细胞真皮基质修复真皮组织缺损创面的疗效和安全性。设计、时间及地点:多中心、随机、空白自身对照。选择2006-03/2007-07来自上海交通大学附属瑞金医院灼伤整形科、解放军第四军医大学西京医院烧伤科、解放军兰州军区兰州总医院烧伤整形科3个研究中心72例患者。对象:72例真皮层缺损患者,男61例,女11例,其中火焰烧伤35例、电击伤11例、化学烧伤4例、烫伤9例、整形美容1例、其他12例。平均年龄(35.6±10.7)岁,修复的缺损面积平均(59.2±33.8)cm2。采用随机数字表法创面分为试验区或对照区,各72个创面。脱细胞真皮基质由烟台正海生物技术有限公司生产并提供。方法:试验区进行脱细胞真皮基质及自体薄皮片复合移植;对照区单纯自体薄皮片移植。主要观察指标:试验区、对照区复合移植成活率及移植后3、6个月瘢痕增生情况。结果:移植后4周,试验区植皮成活率为(98.4±11.8)%;对照区植皮成活率为(99.2±5.9)%。两者疗效差异无显著性(P=0.992)。随访病例移植后3,6个月温哥华瘢痕评分中,试验区各项评分及总分均显著低于对照区(P<0.05,P<0.01)。移植后6个月试验区各项评分及总分均显著低于3个月时(P<0.05),移植后6个月对照区色泽、色素评分及总分均显著低于3个月时(P<0.05)。试验过程中未见与材料有关的实验室检查异常及其他不良反应。结论:该异种脱细胞真皮基质可作为安全的真皮替代物,与自体薄皮片复合移植后有利于真皮组织缺损的修复,减轻创面愈合后瘢痕增生。

摘要：目的:通过多中心完全随机、标准治疗平行对照方法评价京万红软膏治疗糖尿病足慢性创面的疗效。方法:本研究共有11家医院参加,采用多中心完全随机、标准治疗平行对照、前瞻性临床研究设计。131例糖尿病足溃疡患者随机分为京万红软膏组67例和对照组64例,两组创面面积分别为(16.7±6.1)cm2和(15.9±8.3)cm2,创面形成时间(45.7±68.3)d和(52.5±79.6)d。两组分别用京万红软膏或复方磺胺嘧啶锌凝胶涂于创面,观察疗程均为20周。结果:两组患者年龄、糖尿病病程、血常规、肝功能、肾功能等数据差异无统计学意义。京万红组于2、5、10、15周创面愈合速率明显优于复方磺胺嘧啶锌凝胶组,以第5周、10周最为明显(P<0.01)。京万红组创面达到完全上皮化平均时间为(46.5±15.6)d,复方磺胺嘧啶锌凝胶组为(67.9±17.9)d,差异显著(P<0.05)。结论:京万红软膏与复方磺胺嘧啶锌凝胶均有促进糖尿病足创面愈合的作用,京万红软膏作用更优。