摘要：利用与植物次生代谢产物糖基化相关的UDPG糖基转移酶的特征性保守区域 ,设计了同源简并引物 ,以甜菊基因组DNA为模板 ,PCR扩增获得甜菊糖基转移酶基因片段 .根据获得的基因片段设计引物GSTr和GSTf,分别与cDNA文库的T3 和T7通用引物扩增获得全长核苷酸序列的甜菊糖基转移酶基因 ,定名为sudpt 2 ,该基因全长 16 6 2bp ,包括poly(A)和一个 136 2bp的开放阅读框 ,编码 45 4个氨基酸 .与常见的糖基转移酶基因的相似性达 44 %～ 77% ,且具有UDPG糖基转移酶的特征性保守序列 .分子发育进化分析表明 。

摘要：提取酿酒酵母总RNA进行RT-PCR反转录,根据HAL1基因(GeneID:856113)序列设计阅读框引物,对反转录产物进行PCR扩增,并进行全序列测定,构建筛选标记为带内含子的Km抗性基因的植物双元表达载体,经根癌农杆菌介导法将HAL1基因导入烟草品种龙江911和K326中,进行卡那霉素抗性筛选、GUS染色、目的基因扩增和HAL1基因mRNA荧光定量PCR检测,并对T1代各转化烟草材料烟叶含钾量进行化验分析。测序结果证实PCR扩增得到的DNA与酿酒酵母HAL1基因序列相同,获得抗卡那霉素、GUS阳性的转化植株12株。经PCR扩增检测证实HAL1基因已整合入转基因烟草的基因组,荧光定量PCR分析结果表明HAL1基因已在烟苗根系表达,烟叶含钾量化验结果证明HAL1基因可使烟叶含钾量提高30%。