摘要：由细菌引起的感染性腹泻,至今仍是世界范围广泛流行的传染病之一。由于耐抗生素病原菌的不断涌现,导致了抗生素药物的治疗效果不佳。因此,研发便捷、有效的疫苗对于细菌性腹泻的预防与治疗尤为重要。针对产肠毒素大肠杆菌、霍乱弧菌与志贺氏痢疾菌这三种最为主要的细菌性腹泻病原菌,设计和筛选了以热不稳定肠毒素亚基蛋白为抗原和黏膜佐剂、霍乱弧菌鞭毛蛋白及志贺毒素亚基蛋白为抗原的三联疫苗。通过工程大肠杆菌获得了相应的抗原与佐剂蛋白,并以海藻酸钙-壳聚糖微球为疫苗的口服载体,制备了疫苗的口服制剂。体外实验表明,微球载体中的蛋白质在模拟胃液中释放较低,但在模拟肠液中释放迅速,这种载体能够实现疫苗在肠道内定向释放的目的。通过对灌胃免疫后小鼠免疫指标的检测,证明了疫苗能够刺激机体产生抗原特异性的sIgA与IgG抗体,免疫组与对照组相比,差异显著(P<0.05),并提升了外周血中CD4^+T细胞的含量(7.5%~9.5%)与CD4^+T/CD8^+T细胞的比率,有效地激活了机体的黏膜免疫与系统免疫,能够对机体起到保护作用。

摘要：目的 探讨纳米二氧化硅（SiO2）诱导细胞损伤的作用机制研究。方法 噻唑蓝比色（MTT）法检测20 nm和50 nm SiO2 0~1000 mg·L-1处理A549细胞24 h对细胞存活率的影响。纳米SiO2 25，50和100 mg·L-1处理细胞24 h后，检测细胞内超氧阴离子（O2-·）、羟自由基（·OH）、过氧化氢（H2O2）、一氧化氮自由基（NO·）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）含量以及细胞膜ATP酶的活性变化；采用荧光显微镜观察凋亡坏死细胞形态。结果 20 nm和50 nm SiO2对A549细胞的半数致死量（LD50）分别为30±4和（120±14）mg·L-1。与正常对照组比较，纳米SiO2引起A549细胞内O2-·，·OH，H2O2和NO·含量显著增加（P〈0.05），ROS过量产生（P〈0.05），脂质过氧化物MDA含量显著升高（P〈0.05），且细胞存活率与ROS及MDA含量呈现明显的负相关性（R2=0.954和R2=0.937），ATP酶活性显著降低（P〈0.05）；Hoechst33342/PI双荧光染色法观察到明显的细胞凋亡与坏死。结论纳米SiO2可诱导细胞自由基过量生成，氧化应激反应加剧，导致脂质过氧化反应、细胞膜受损和细胞功能障碍，以及引发细胞凋亡与坏死，产生细胞毒性。

摘要：蛋白质降解系统的紊乱可能是神经退行性疾病的关键致病机制之一。肌萎缩侧索硬化症(ALS)就是一类严重的神经退行性疾病。本研究旨在探索我们新报道的ALS相关基因CREST是否会影响蛋白质降解系统。我们构建了人源CREST的表达质粒或鼠源CREST shRNA的质粒,并将其转染到293细胞或从胚胎期C57BL/6小鼠分离培养的原代皮层神经元中,以此制备实验样品。使用分子生物学和生物化学方法,分析了CREST对蛋白质降解系统的影响,包括泛素蛋白酶体系统(UPS)和自噬流。利用UPS的GFP指示剂,发现过表达CREST会导致293细胞中GFP阳性信号显著降低。但CREST的过表达却不影响293细胞或培养的皮层神经元中的自噬流。然而,无论在是否使用影响自噬流药物的情况下,降低CREST的蛋白水平都能抑制培养神经元中LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化(P<0.05)。不仅如此,LC3-Ⅱ与Ⅰ的比值在表达CREST的ALS相关突变(CREST-Q388X)的皮层神经元中显著上升(P<0.05)。上述结果表明,CREST可能在蛋白质降解系统中发挥关键作用,包括促进UPS以及维持自噬的正常功能,而在自噬调控中获得新功能的CREST-Q388X突变也将涉及一些新的致病机制。

摘要：（1-苯乙基哌啶-4-基）苯胺（1）是合成阿片类镇痛药芬太尼（fentanyl）的重要中间体。

摘要：以两步乳匀法制备氟比洛芬酯(1)脂微球注射液。采用单因素法结合正交试验优化得到的制备工艺为:乳化温度65℃,20 000 r/min高速剪切8 min,1 000 bar高压均质6次,再调节pH值至8.5,灌装熔封于5 ml安瓿,115℃高压灭菌30 min。优化制品灭菌后的脂微球粒径约200 nm,ζ电位为-36 mV,包封率为99.3%,pH值约7.0。

摘要：目的:建立一种快速分析发酵虫草菌丝粉中挥发性成分的方法,并用于不同菌种发酵虫草产品的鉴别和特征性成分的寻找。方法:利用顶空固相微萃取结合气相色谱质谱联用(HS-SPME/GC-MS)技术测定发酵虫草菌丝粉的挥发性成分,在优化萃取头、萃取温度、吸附时间、预平衡时间和解吸时间等萃取条件的基础上,建立发酵虫草菌丝粉的HS-SPME/GC-MS测定方法,用峰面积归一化法计算各成分的相对含量,采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)2种化学计量学方法对数据进行分析。结果:最佳萃取条件为DVB/CAR-PDMS萃取头、萃取温度90℃、吸附时间80 min、预平衡时间40 min、解析时间2 min。利用建立的HS-SPME/GC-MS方法从金水宝胶囊、百令胶囊、宁心宝胶囊、至灵胶囊和心肝宝胶囊5种发酵虫草制剂中分别鉴定出56、71、72、81和75个化合物,主要包括酯类、醇类、羧酸类、醛类、烃类、酮类、杂环类化合物等。通过化学计量学方法对HS-SPME/GC-MS数据进行处理,实现了不同发酵虫草制剂和伪品的鉴别,并寻找到5种发酵虫草产品中的特征挥发性成分,分别为马索亚内酯、吡嗪酰胺、2-吡咯烷酮、棕榈酸乙酯和棕榈酸。结论:HS-SPME/GC-MS方法可用于发酵虫草产品中挥发性成分的快速分析。结合化学计量学方法对不同发酵虫草制剂进行鉴别和差异性成分寻找,为特征性指标成分的确定提供了一条新思路,为发酵虫草制剂质量标准的制定和提升提供了科学依据。

摘要：A kind of novel pitch-based activated carbon microsphere（ACM） characterized by its controlled porous structure was developed in this study,the curative effect of this ACM on diabetes mellitus in rats was *** 0.2-0.3 mm in diameter was prepared by modified *** optimal ACM was screened by its adsorption ability for *** mellitus model was established by streptozotocin injection in male Sprague-Dawley *** groups of rats were orally administrated with ACM twice a day for 30 *** glucose transport was determined in vitro using everted rat intestinal sacs *** with the diabetic mellitus group,the ACM treated group showed significant lower blood glucose level and improved glucose tolerance after two-week *** ACM was applied in the mucosal side,glucose permeation clearance in the ACM treated group was significantly higher than that of the control group,especially at high glucose concentration（10 mg/mL） on the serosal *** selected ACM possessed a BET specific surface of 1566 m^2/g and high volume of micropores（0.478 cm^3/g） with fine spherical morphology,and showed more significant adsorption capacity for *** oral microsphere preparations,ACM presented the curative effect on streptozotocin-induced diabetes mellitus in rats.

摘要：目的采用对黄体酮具有良好溶解性的油脂性溶剂作为油相,制备乳状注射液,进行表征及药动学研究。方法使用苯甲酸苄酯与蓖麻油的混合液作为油相,以蛋黄卵磷脂为乳化剂,经高压均质和热压灭菌制得。表征粒径、形态、含量及包封率等。用HPLC-MS/MS测定血浆中黄体酮浓度,研究犬肌内注射(im)及皮下注射(sc)(20 mg·kg^(-1))后的药动学特征。结果乳状注射液的平均粒径为(204±8)nm,多分散指数为(0.05±0.01),乳滴外观圆整,含量为标示量(20 mg·mL^(-1))的96.1%,包封率为99.3%。乳液im及sc后的AUC_(0-∞)分别为(392±76)和(386±45)ng·h·mL^(-1),t_(max)分别为(0.75±0.29)和(5±3)h,提示乳液sc有明显缓释效果。结论制得的乳状注射液与市售油针相比显著减少油脂性溶剂用量,包封率高,sc呈现缓释特征。

摘要：目的运用网络药理学方法预测软紫草凉血功效的物质基础,探讨软紫草可能的热射病防护作用,并加以验证。方法基于数据库和文献检索收集软紫草的化学成分,利用admet SAR方法筛选潜在活性成分,bSDTNBI方法预测潜在活性成分作用靶标,从OMIM数据库中检索热射病相关靶标,运用STRING数据库构建“预测靶标-疾病靶标”蛋白互作网络,分析筛选关键作用靶标。建立热应激诱导小鼠热射病模型,对关键活性成分(紫草素)的热射病防护作用进行药效学验证。结果共收集软紫草化学成分165个,筛选出26个潜在活性成分,作用于93个靶标,网络分析确定其“凉血”功效的物质基础主要是萘醌类化合物。“预测靶标-疾病靶标”蛋白互作网络中软紫草与热射病共享多个靶标,提示软紫草可能具有热射病防护作用,46个关键靶标主要参与炎症反应、神经递质传导、氧化还原和凝血等生物学过程和相关通路。紫草素可以显著延长热射病小鼠生存时间,减轻急性反应,改善组织脏器损伤。结论软紫草可能通过抑制炎症反应、促进血液循环、保护中枢神经,从而改善多器官损伤,发挥热射病防护作用。

摘要：目的改进2015版《中国药典》连翘项下连翘苷、连翘酯苷A含有量的测定方法。方法 50%甲醇超声提取2种成分后,UPLC法测定两者含有量,其中连翘苷的分析采用Agilent Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 8μm);流动相乙腈-0. 1%磷酸,梯度洗脱;体积流量0. 2 mL/min;检测波长277 nm。连翘酯苷A的分析采用Agilent Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 8μm);流动相乙腈-0. 4%乙酸,等度洗脱;体积流量0. 2 mL/min;检测波长330 nm。结果连翘苷、连翘酯苷A分别在0. 004 69~0. 375 mg/mL(r=0. 999 6)、0. 004 63~0. 371 mg/mL(r=0. 999 3)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为97. 9%、100. 0%,RSD分别为1. 9%、0. 9%,10批样品中两者含有量分别为0. 37%~1. 29%、4. 7%~12. 3%,均高于药典方法。结论该方法简便快捷,准确度高,重复性好,可为相关测定方法的改进提供参考。