摘要：简单异尖线虫(Anisakis simplex)是海产品中能引起食源性人兽共患寄生虫病的有害寄生虫,不仅会影响海产品质量,而且威胁公众的健康,造成极大的经济损失。本研究根据简单异尖线虫rDNA的ITS区基因序列设计了特异性引物,开发了一种重组酶辅助扩增联合侧流试纸的检测方法(RAA-LFD)。结果显示,该方法仅需2.5μΜ的引物浓度,37 ℃下35 min即可对结果实现可视化。特异性检测结果表明,该方法与2种属内典型异尖线虫、派式异尖线虫,3种属间的费式宫脂线虫、厦门宫脂线虫、舟山宫脂线虫和2株水产常见的食源性病原菌副溶血性弧菌和单增李斯特菌无交叉反应,特异性良好;检测灵敏度低至9.1×101 fg/μL的简单异尖线虫基因组DNA。在模拟样品检测中,RAA-LFD法可在100 g带鱼肉中检出单条简单异尖线虫的混入污染,应用效果良好。本实验建立的RAA-LFD可视化检测体系快速、灵敏、特异,可应用于海产品中异尖线虫的检测。

摘要：为获得暗纹东方鲀组织蛋白酶B的最佳提取工艺条件,在单因素试验的基础上,通过Plackett-Burman设计对影响组织蛋白酶B活力的因素进行筛选,结果表明:料液比、磷酸盐缓冲液p H值和硫酸铵饱和度这3个因素显著影响酶活力,然后用响应面分析法确定了主要影响因素的最佳提取条件为:料液比1∶2.1、磷酸盐缓冲液p H 7.0、硫酸铵饱和度99.2%,在此条件下组织蛋白酶B活力的预测值为32.65 U/g,实测值为32.52 U/g,相对误差为0.39%。说明建立的模型切实可行,为进一步研究组织蛋白酶B的提取工艺提供理论依据。

摘要：为了改善和优化海产品源肉食杆菌(Carnobacterium)***1产有效抑菌代谢产物的培养发酵条件,提高对荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)的抑菌效果。基于单因素试验,从对Carnobacterium ***1抑菌效果有影响的5个因素中筛选出3个显著影响因素,运用Design-Expert软件的Box-Behnken试验设计原则研究3个显著影响因素的重要水平和交互作用。结果表明:Carnobacterium ***1的最佳培养发酵条件:初始pH 6.22、温度28.6℃、葡萄糖质量分数3%。在最优培养条件下,Carnobacterium ***1的浓缩发酵液在15 h和18 h对***的抑菌率分别为80.7%、86.3%,其抑菌机理是Carnobacterium ***1破坏了***的细胞壁,导致其通透性增大,碱性磷酸酶大量溢出,使其代谢紊乱,从而抑制了***的生长。同时,最优发酵条件下获得的实验结果平均值与模型预测值基本吻合,进而说明所建立回归模型是可靠的。

摘要：防御素是一类富含精氨酸和半胱氨酸的内源性阳离子抗菌肽,是软体动物抵御各种病原微生物侵染的重要免疫因子。太平洋牡蛎防御素(Crassostrea gigas defensin,CgD)近羧基端的43个氨基酸残基构成了其成熟肽区域,决定了CgD的生物学活性。首先通过逆转录PCR和设计特异性引物从太平洋牡蛎外套膜中分离并扩增到3?端添加和不添加6×His标签的两种目的基因CgDH^+和CgDH–;与pPICZαA连接后构建的重组表达载体(pPICZαA-CgDH^+和pPICZαA-CgDH–)电转至毕赤酵母Pichia pastoris X-33中,使用1.0%甲醇诱导表达目的蛋白CgDH^+和CgDH–,最适培养条件为29℃、250 r/min、72 h;通过固化金属离子亲和层析(IMAC)获得分子量为5.78 kDa的纯化的重组蛋白CgDH^+,根据其蛋白质浓度推算表达量为2.32 mg/L。经MALDI-TOF-TOF质谱分析证明纯化产物即为预期的目的蛋白。抑菌试验结果显示分别含重组蛋白CgDH^+和重组蛋白CgDH–的培养液上清对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus和铜绿假单孢菌Pseudomonas aeruginosa都具有抑菌活性,表明重组蛋白中6×His标签的存在与否并不影响其生物学活性。

摘要：为研究不同二元混合体系中长江刀鲚关键鲜味相关无机离子对关键呈鲜氨基酸(核苷酸)的增鲜作用规律,对采自江苏靖江永济港的产卵前长江刀鲚中关键鲜味相关无机离子和呈鲜组分运用不平衡完全区组设计进行二元交互感官试验,并计算各二元混合体系的鲜味强度。结果表明,其对鲜味贡献度的重要性排序为GMP (5′-单磷酸鸟苷二钠)= AMP (5′-腺苷一磷酸)< K^+< Na^+< Glu(谷氨酸)<Gly(甘氨酸)< Cl^-< IMP(5′-肌苷酸二钠)< PO^3-4;无机离子作为长江刀鲚中的增鲜组分能够提升二元混合体系的鲜味强度,PO^3-4与鲜味物质配比为5∶ 5~1∶ 9,Cl^-与鲜味物质配比为4∶ 6~1∶ 9对于IMP、Glu有较强的增鲜作用;Na^+对于Glu、Gly以及IMP类鲜味物质在配比为4∶ 6~1∶ 9具有较明显的鲜味增强作用;而K^+增鲜效果不显著。试验初步得出了长江刀鲚鲜味体系中无机离子和呈鲜组分的适宜鲜味配比范围,为之后建立长江刀鲚鲜味强度定量模型奠定理论基础。

摘要：目的:提高脱色剂和鱼油的分离效率,并同时保证高脱色率。方法:利用分光光度计测出鱼油的最佳吸收波长;使用硅酸镁、活性白土两种脱色剂进行复配,以脱色率、过滤速度为评价指标;通过单因素试验和响应面试验设计,分别对混合脱色剂的用量、脱色时间和温度进行试验,优化鳀鱼油脱色的工艺参数;通过板框过滤放大实验验证脱色剂的脱色及助滤效果;采用气相色谱法测定粗鱼油、脱胶油、脱酸油、脱色油4种鱼油的脂肪酸组成和含量。结果:鳀鱼油的最佳吸收波长为671 nm;混合脱色剂复配比例(m活性白土∶m硅酸镁)为4∶1,过滤速度为(26.65±0.64)mL/min;响应面优化结果:混合脱色剂用量为5.00 g/100 g油脂、脱色时间57.00 min、温度72.00℃,脱色率为(95.74±1.35)%,理论脱色率为95.50%;吸油率为(1.15±0.10)%,鱼油回收率为(91.72±1.60)%;板框过滤试验中混和脱色剂的脱色效果与对照组无显著性差异,但拥有更快的过滤速率;粗鱼油、脱胶油、脱酸油、脱色油的饱和脂肪酸与单不饱和脂肪酸绝对含量均无显著性差异,但脱色油中的二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸显著增多,其绝对含量由(117.42±0.23),(65.20±2.31)mg/g增加到(128.97±0.86),(68.62±1.59)mg/g。结论:硅酸镁是一种有效的助滤剂且具有吸附效果,与活性白土复配可以保证鱼油的脱色效果,并且还能解决板框压滤机分离脱色剂与鱼油的滤饼堵塞问题;混合脱色剂具有吸油率低、脱色效率高、过滤速度快的优势。

摘要：为了保持鲳鱼块的食用品质,延长货架期,利用响应面Box-Behnken试验设计对茶多酚、溶菌酶和壳聚糖生物保鲜剂进行复配优化,建立以挥发性盐基氮(total volatile basis nitrogen,TVB-N)含量为响应值的二次多项式回归模型。并通过感官评定和菌落总数(aerobic plate count,APC)、TVB-N含量、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)值、三甲胺(trimethylamine,TMA)含量、pH值和K值等指标测定对最优配比复合保鲜剂保鲜效果进行验证。结果表明:经方差分析和回归拟合,得到复合生物保鲜剂对鲳鱼块贮藏品质的最佳质量分数配比为:茶多酚1.35%、溶菌酶0.054%和壳聚糖1.38%,且溶菌酶与壳聚糖、茶多酚与壳聚糖对响应值存在显著的交互作用(P<0.05)。该复合保鲜剂能够显著抑制微生物的生长(P<0.05),有效降低贮藏过程中TVB-N含量、TBA值、TMA含量,显著延缓鲳鱼块品质的变化,货架期较对照组(4℃冷藏)的5~6 d延长至12 d。

摘要：为了优化人工养殖大鲵(Andrias davidianus Blanchard)皮中胶原蛋白的提取工艺,以加酶量、液料比和酶解时间为试验因素,胶原蛋白提取率为响应值,采用Box-Behnken设计进行试验。通过响应面法考察了3个因素对胶原蛋白提取率的影响,建立了胶原蛋白提取率的二次多项式回归模型,并对提取工艺进行了优化。试验结果表明,3个因素对鲵皮中胶原蛋白提取率的影响大小次序为:液料比>酶解时间>加酶量;交互项中"液料比-酶解时间"项对提取率影响显著,其他交互项对提取率影响不显著。为满足实际需要,对模型预测得到的大鲵皮胶原蛋白最优提取工艺稍做调整,具体参数为:加酶量16.5%、液料比15 mL/g、酶解时间29 h。此条件下,大鲵皮胶原蛋白提取率可达到66.99%,与模型理论预测值(67.83%)较为一致。

摘要：设定4、10℃和18℃组研究中华鳖（Pelodiscus sinensis）在无水保活21d中质量损失率、肌肉水分、脂肪、蛋白质以及血液葡萄糖（Glu）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素、尿酸（UA）和肌酐（CREA）含量与乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（ALP）和谷草转氨酶（AST）活性的变化。结果表明：在保活过程中，4℃组中华鳖仅能存活11～16d，其质量损失率、肌肉营养物质消耗量显著低于10℃和18℃组（P〈0．05），而血液Glu、LDH、AST、UA、CREA水平均显著高于10℃和18℃组（P〈0．05）；18℃组质量损失率、肌肉营养物质消耗量、血液尿素浓度显著高于4℃和10℃组（P〈0．05）；10℃组肌肉营养物质消耗量及血液生理指标水平间于4℃和18℃组之间；随着保活时间的推移，3个温度组肌肉营养物质和血液TP、ALB、ALP水平均呈现下降趋势，而质量损失率和血液尿素、uA水平均呈现上升趋势；4℃组肌肉ATP和血液LDH、AST、CREA水平均呈现先升高后下降的趋势；10℃和18℃组肌肉ATP含量呈现先下降后上升的趋势，而血液AST活性呈现下降趋势。该实验结果表明，4℃组中华鳖的营养物质损害量低，但低温应激对该组中华鳖新陈代谢水平和生命活力产生负面影响，18℃组中华鳖机体能量代谢水平旺盛，营养物质消耗量和质量损失率均较大，不利于实现保活价值。建议将中华鳖保活温度设定为10℃左右。

摘要：本文研究了超临界CO2萃取法的不同提取条件对棘托竹荪中活性物质的抑菌效果影响。通过L16(43)正交实验,选取萃取压力、萃取温度与萃取时间为主要影响因素,采用超临界CO2萃取法,以活性物质对单增李斯特菌和副溶血性弧菌的最小抑菌浓度(MIC)与抑菌率作为提取效果指标,设计棘托竹荪抑菌活性物质的最佳提取条件。由不同提取条件对两种菌抑菌效果的影响程度与显著性分析得出:萃取时间>萃取温度>萃取压力。棘托竹荪活性物质提取的最佳条件为:萃取压力为20 MPa,萃取温度35℃,萃取时间120 min,所得活性物质对单增李斯特菌与副溶血性弧菌的MIC均为15.0 mg/m L。当抑菌活性物质浓度为MIC时,处理24 h后其对单增李斯特菌与副溶血性弧菌的最佳抑制率分别为85.7%与98.2%。