摘要：目的建立基于细胞感染的实时定量逆转录PCR(real time quantitative reverse-transcription PCR, RT-qPCR)法, 用于水痘减毒活疫苗感染性病毒滴度检测。方法根据水痘减毒活疫苗毒种V-Oka株的基因序列设计特异性引物及探针。将参考品及待测样品系列稀释后接种MRC-5细胞, 经培养后收获细胞, 提取RNA, 进行一步法RT-qPCR检测, 通过平行线法计算样品滴度, 并将检测结果与中国药典2020年版三部规定的空斑法进行对比。结果感染细胞适宜收获时间为36~48 h, 可检测样品滴度范围为2.8~5.0 lgPFU/ml。与空斑法检测的滴度之间的差异无统计学意义(冻干疫苗组t=1.09, 疫苗原液组t=0.59, P值均>0.05)。结论初步建立了基于细胞感染的RT-qPCR法, 可用于水痘减毒活疫苗病毒滴度检测。

摘要：目的构建脑膜炎球菌（Neisseria meningitidis,Nm）表面蛋白fHBP重组表达质粒,并与PorA蛋白融合表达,对单抗原fHBP和融合抗原fHBP-PorA的免疫原性进行检测。方法筛选并优化fHBP和PorA基因序列,设计连接片段将PorA连接至fHBPC-端,构建重组表达质粒pET-24b-fHBP和pET-24b-fHBP-PorA,分别转化*** BL21（DE3）感受态细胞,IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经镍柱亲和层析和凝胶过滤层析后免疫家兔,制备抗血清,采用间接ELISA、流式细胞术和微量血清杀菌力试验（serum bactericidal assay,SBA）评价抗原的免疫原性。结果经双酶切和测序鉴定,两个蛋白的重组表达质粒构建正确。重组蛋白fHBP以可溶形式表达,fHBP-PorA以包涵体形式表达,纯化后纯度均在90%以上。抗血清滴度均在1.0×10~5以上。流式细胞术检测显示,抗血清与Nm可发生特异性结合,且fHBP-Por A抗血清显示出一定的交叉反应。fHBP和fHBP-PorA抗血清对Nm29019的杀菌滴度为1∶128。结论 fHBP具有较好的抗原性和免疫原性,具备B群脑膜炎疫苗开发前景。多抗原融合策略需更多的优化考虑。

摘要：脑膜炎球菌是一种严格的人类病原菌，主要引起发病率和病死率均较高的流行性脑脊髓膜炎和败血症。过去对脑膜炎球菌的研究主要以血清学实验为基础。随着分子生物学技术的发展，B群脑膜炎球菌的分子流行病学研究取得了极大的进展，获得的研究成果为疫苗开发与评价提供了重要的依据。此文对B群脑膜炎球菌的分子流行病学及其疫苗设计进行简要论述。

摘要：多种多糖一蛋白结合疫苗被开发成功，用于预防b型流感嗜血杆菌、脑膜炎球菌和肺炎链球菌感染，为婴幼儿健康提供了保障。常用的载体蛋白是破伤风类毒素、白喉类毒素和白喉类毒素突变体CRM197。在临床研究中观察到，相同载体或不同载体结合疫苗同时接种，或者与DTP／HBV／IPV等疫苗同时接种时，会干扰对某些抗原的免疫应答，其中可能有多种机制在起作用。随着更多的结合疫苗有望进入婴幼儿期基础免疫程序和无细胞百日咳疫苗（aP）逐渐代替全细胞百日咳疫苗（wP），如何选择合适的或者新的载体蛋白和佐剂、谨慎设计临床研究方案和接种程序等问题日益受到关注。