摘要：为了建立适于基层单位应用的针对副溶血性弧菌检测的特异PCR方法,检测副溶血性弧菌的基因序列。针对该菌的属特异性基因t1基因进行引物设计,扩增片段大小为449 bp。运用该PCR法可特异性的从副溶血性弧菌ATCC17802标准株中扩增出目的基因片段,与GenBank上发表的序列同源性为100%。而经常污染海产品的溶藻弧菌,嗜水气单胞菌标准株J-1,铜绿假单胞菌标准株ATCC27853结果均为阴性。该PCR法最低检出菌体DNA量为10-2 ng以及最低检出菌数为5.7×103 CFU/mL。对临床上送检的35份样品进行菌体DNA PCR方法检测并同时与国标GB/T4789.7-2003中使用的检测方法进行比对,两种检测方法的结果完全符合,与国标中使用的检测方法相比可大大缩短鉴定时间。因此该PCR法能快速鉴定当前副溶血性弧菌流行群,有利于流行病学溯源等研究。

摘要：以大肠杆菌O157rfbE和stx2为待检靶基因,设计两对引物和两条MGB探针,rfbE和stx2探针5′端分别用FAM和VIC基团标记,3′端均用Taqman-MGB标记。建立并优化了检测大肠杆菌O157的二重荧光定量PCR方法,可检测的最低DNA浓度是10拷贝/μL;实验中O157菌株检测结果均为rfbE阳性,而非O157菌株检测结果均为阴性;重复性实验中,批间差异小于80%,批内差异小于70%。实验结果显示此二重荧光定量PCR方法可对分离的可疑大肠杆菌O157菌株进行快速鉴定,同时得知菌株是否携带stx2毒力基因,有利于菌株毒力强弱的判定。

摘要：为建立检测可疑病料中猪胸膜肺炎放线杆菌(App)的方法,针对App的RTX毒素(ApxⅣA毒素)毒力基因长约449 bp的片段设计引物,以App 10个血清型的基因组分别作为模板,对PCR扩增条件进行优化筛选,并进行了特异性及重复性试验。对副猪嗜血杆菌、马链球菌兽疫亚种、多杀性巴氏杆菌的扩增结果为阴性,表明该PCR方法特异性强,建立了该菌的种属特异性PCR方法。以筛选出的优化条件,对22份临床可疑病料进行了检测。结果表明,建立的PCR方法特异、快速、稳定、敏感,优于传统的细菌学方法,可作为App可疑病料的检测方法。

摘要：生态养殖是近几年来在深化农业结构调整，做强畜牧业、做优种植业过程中探索出来的一种种养结合的生态生产模式，在实践中已显示出其无限的生机和活力，依照“种养结合、适度规模、规范养殖和生态平衡”的原则，农牧结合的生态畜牧业是我区畜牧业可持续发展的必然趋势，以畜禽的粪便生态养地，实现种养结合的农牧业共同发展的生态畜牧业之路．也是实现本区畜牧业可持续发展理想模式．不能走全盘工厂化、集约化道路．必须是小型的循环经济模式。

摘要：目的根据GenBank中编码大肠杆菌16SrRNA的基因、rfbE(O157抗原基因)、vt1(Vero毒素1基因)、vt2(Vero毒素2基因)和eaeA(紧密素基因)5种基因的特异性序列,设计合成5对引物,建立了快速鉴定大肠杆菌O157的多重PCR方法。该方法的检测敏感度为细菌纯培养物为104CFU/ml,含菌3-4CFU/g鸡肉组织样品经预增菌8h后能检出。用此方法检测2000-2004年间从动物组织和粪便中临床分离的64株菌株,结果10株鉴定为大肠杆菌O157,与血清凝集试验结果完全吻合。其中8株能扩增上述5条特异性条带,与预期产物完全一致,2株能扩增出除vt1基因外的4条特异性条带,其它54株菌株只能扩增出大肠杆菌16SrRNA。该方法能直接鉴定产多种毒力因子的大肠杆菌O157,特异性强,为检测和鉴定大肠杆菌O157提供了一个新方法。

摘要：为建立一种快速鸭疱疹病毒1型(Anatid herpesvirus 1,AHV-1),又名鸭肠炎病毒(duck enteritis virus,DEV)病原检测方法,本研究根据GenBank上登录的DEV基因序列,设计合成内、外2对引物,建立了检测DEV的套式PCR方法。该方法对正常鸭胚、健康鸭肝肠组织、鸡传染性喉气管炎病毒、伪狂犬病病毒、减蛋综合征病毒、鸭肝炎病毒和新城疫病毒的扩增结果均为阴性;该方法第1次扩增的敏感性是10ng,第2次扩增的敏感性是0.1ng,第2次比第1次扩增的敏感性高100倍。建立的套式PCR方法具有良好的特异性、敏感性,可以准确快速检测出极低含量的DEV,将为鸭病毒性肠炎的病原检测及分子流行病学调查等提供一种高效、快速、特异、灵敏的检测方法。

摘要：疯牛病是由于健康牛食入含有致病性朊粒的人工蛋白质饲料 (肉骨粉 )所致 ,而目前尚未见能有效、快速地检测饲料中牛、羊成分的技术报道。本文在前期研究〔1〕的基础上 ,运用荧光定量PCR法 ,针对牛、羊、鸡、猪几种不同动物的特异性基因序列设计了牛、羊两种动物的特异性探针 ,通过对整个PCR过程的实时荧光监测 ,来鉴定饲料中的牛、羊成分 ,并对其定量范围做了简单的讨论。本方法能有效解决普通PCR的样品污染问题 ,具有特异性强、灵敏度高。

摘要：1 免疫酶技术(EIA)EIA是根据抗原-抗体结合的特异性,以酶作标记物,酶对底物具高效催化作用的原理而设计,既可用于抗原的检查,也常用于血清抗体的检测.

摘要：根据犬冠状病毒(caninecoronavirus, CCV) 的S基因序列, 用计算机设计并合成了1对引物P1、P2, 以此引物及以从美国进口的CCV疫苗的反转录产物为模板, 初步建立了检测CCV的RT PCR。将纯化的PCR产物成功地克隆到pGEM T easy载体中, 鉴定、测序并进行同源性分析。结果表明, 与1 71和UCD 1株同源性分别为91 5%和94 3%。该RT PCR能对疫苗中CCV及CCV参考株USCV B1的S基因进行特异性地扩增,长度为575bp, 对犬的其他病毒及CRFK细胞未能扩增出任何片段, 该RT PCR能检测出0 5μLCCV培养液/2g粪便。用建立的RT PCR在上海对50条犬粪便进行检测, 结果表明CCV阳性6例。本研究建立了检测犬粪便中的CCV的RT PCR, 能用于犬冠状病毒流行病学调查。

摘要：　本文阐述了"申江1号"中草药制剂研究的主要过程:处方设计依据我国传统医药学的理论,结合家禽生产特点,通过药味的筛选、辅料的选择,确定配方由马齿苋10多味中草药组成;动物试验分为抗病防病试验(预防仔鸡大肠杆菌和沙门氏菌试验、防治仔鸡大肠杆菌病试验)和饲养试验(增重、屠宰、和品味试验)两类。研究结果表明:"申江1号"能提高机体免疫能力,具有良好的抑菌抗病作用;无药物残留,安全无毒;具有抗热应激作用,可改善鸡肉的风味;替代传统的抗生素类生长促进剂,并能取得较好的经济效益。