摘要：目的 研究二氯醋酸二异丙胺治疗非酒精性脂肪性肝病的临床疗效和安全性。 方法 用随机双盲多中心剂量平行对照的临床试验设计选择非酒精性脂肪性肝病患者,分别用二氧醋酸二异丙胺高剂量(120mg／d)和低剂量(60 mg／d)治疗8周,观察其疗效和安全性。 结果 本试验共有127例患者入选,高剂量组63例,低剂量组64例。未见脱落病例,剔除4例,剔除率3.1％,实际完成病例数123例,高剂量组61例,低剂量组62例。治疗后8周高剂量组和低剂量组临床疗效总有效率分别为87.8％和79.6％(P=0.2536),丙氨酸氨基转移酶复常总有效率分别为55.7％和69.4％(P=0.0807),血脂总有效率分别为67.2％和67.7％(P=O.9320),B超脂肪肝影像学检查总有效率分别为51.7％和43.5％(P=0.2879),两组比较,差异均无统计学意义。两组患者中各有1例发生不良反应,高和低剂量组的发生率分别为1.6％和1,6％,表现为口干,未见严重的不良反应。 结论 二氯醋酸二异丙胺可安全有效地用于治疗非酒精性脂肪性肝病。

摘要：本文设计和合成了具有血管内皮细胞靶向性的环五肽RGD(cyclo-[Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys],Tyr-RGD)修饰的纳米基因载体聚乙二醇-聚乙烯亚胺(PEG-PEI),并研究其纳米特性、载药特性及其体内外的肿瘤靶向特性。采用化学方法合成所需要的纳米载体,鉴定该纳米载体的纳米特性及载药特性,并采用体外血管内皮细胞竞争结合实验研究其靶向性,最后将荧光标记的纳米载体注入荷瘤小鼠体内,观察其肿瘤靶向性。Tyr-RGD-PEG-PEI纳米载体采用分步合成方法,所获得的载体粒径约为145nm,其对小分子干扰核糖核酸(siRNA)的包封率好,血浆内孵育30min,仅约3%的siRNA游离出来,结构稳定。薄层层析法分析鉴定其为单一斑点(Rf0.65)。受体竞争实验表明该纳米载体可有效地与多肽精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)竞争结合内皮细胞膜上的受体;荷瘤小鼠实验表明,载有荧光标记siRNA的Tyr-RGD-PEG-PEI纳米药物注射入小鼠体内24h后,主要分布在肿瘤组织内,而无Tyr-RGD靶向的纳米药物则除了瘤体内,还分布在肝脏、肺等脏器。合成的Tyr-RGD靶向纳米载体Tyr-RGD-PEG-PEI具有较好的纳米特性和高效的基因药物包封率,荷瘤裸鼠研究表明其肿瘤的靶向性明显优于无Tyr-RGD靶向的纳米药物。

摘要：目的:体外合成4条靶向人组织激肽释放酶7(kallikrein-related peptidase 7,KLK7)基因的片段,并筛选最有效siRNA片段,观察沉默KLK7表达对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响。方法:设计4条靶向KLK7的siRNA片段(KLK7-siRNA-416、KLK7-siRNA-596、KLK7-siRNA-474、KLK7-siRNA-795),瞬时转染AGS细胞,qRT-PCR检测各干扰组KLK7 mRNA表达的变化,Western blotting检测AGS细胞中HK7蛋白(由KLK7基因编码)的表达,MTT法检测转染后AGS细胞的增殖,流式细胞术检测AGS细胞的细胞周期及凋亡。结果:4条KLK7-siRNA片段中以KLK7-siRNA-416的干扰效率最高,KLK7-siRNA-416组KLK7 mRNA表达率显著低于NC组[(0.32±0.049)%vs(0.93±0.071)%,P<0.01],KLK7-siRNA-416组转染48 h后AGS细胞HK7蛋白的表达水平显著降低[(1.18±0.198)vs(0.52±0.096),P<0.01]。KLK7-siRNA-416转染72 h后对AGS细胞增殖的抑制率达(37.70±0.12)%(P<0.05),该转染阻滞AGS细胞于G0/G1期但不影响AGS细胞的凋亡。结论:KLK7-siRNA沉默KLK7的表达可抑制AGS细胞的增殖,可阻滞细胞于G0/G1期,对细胞凋亡的作用不明显。

摘要：目的研究针对大鼠PDGF受体β亚单位基因2个不同切割位点核酶的体外切割活性并加以比较。方法应用计算机对大鼠PDGF受体β亚单位mRNA二级结构进行模拟,设计针对PDGF受体β亚单位mRNA 4 5位CUU和2 5 2位CUU的锤头状(Hammerhead)核酶(Ribozyme)基因RZ1和RZ2 ,定点克隆于自我切割型核酶载体P1 5的5′cis核酶和3′- cis核酶之间;将大鼠PDGF受体β亚单位cDNA6 0 8bp的PCR片段克隆于pGEM T载体T7启动子下游,在T7启动子作用下分别体外转录成RZ1、RZ2和70 6nt的PDGF受体β亚单位mRNA ,比较RZ1和RZ2对70 6nt的PDGF受体β亚单位mRNA的切割活性的差异。结果RZ1在体外有较高的切割活性,而RZ2在体外无切割活性。结论提示在应用核酶技术进行基因治疗时,应选择有效的核酶切割位点,以达到有效的治疗目的。

摘要：目的设计抽线式胰管金属支架,以利于取出胰管结石。方法收集3例确诊胰管结石并胰管远端狭窄,且ERCP取石失败者,应用十二指肠镜在主胰管置入抽线式金属支架,24～48h后再次ERCP取石。结果3例患者主胰管结石直径1～1.5cm,造影显示胰管远端狭窄。先置入抽线式胰管金属支架,24～48h后金属支架完全膨胀,插入气囊顺利取出全部结石,再将金属支架抽成丝样经活检孔取出。术后无出血、嵌顿、胰腺炎等并发症发生。结论内镜下胰管内置入抽线式金属支架取石,安全、有效,费用低廉,增加了胰管取石的成功率。

摘要：目的:构建靶向信号接头蛋白Crk的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的真核表达载体质粒,研究其对肝星状细胞株LX-2功能的影响.方法:根据Crk mRNA序列进行设计并合成shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并连接入plko载体.包装Crk慢病毒,感染人肝星状细胞株LX-2.研究其对LX-2细胞增殖、迁移和活化功能的影响.结果:定量PCR和Western blot检测结果提示成功构建了针对Crk特异性shRNA真核表达质粒,shCrk组的Crk表达明显低于对照组.干扰Crk基因后,LX-2细胞的活化、迁移能力减弱;而细胞增殖没有受到影响.结论:LX-2中成功构建Crk基因的shRNA真核表达载体;下调Crk基因后能够抑制LX-2细胞的活化和迁移.

摘要：目的 研究针对血小板衍生生长因子（PDGF）受体β亚单位基因的核酶的制备与体外切割活性鉴定。 方法 将大鼠PDGF受体β亚单位基因的PCR片段克隆于T载体T7启动子下游，32P标记的体外转录物作为靶RNA；设计并合成针对大鼠PDGF受体β亚单位胞外区的核酶，将核酶基因克隆于自我切割核酶载体P1.5的5′-cis核酶和3′-cis核酶之间，并进行32P标记的转录。核酶与靶RNA按一定比例和条件进行切割反应电泳，放射自显影。 结果 核酶制备正确，在最适条件下具有切割活性。其Km＝13.20nM，Kcat＝0.28min-1。最高切割效率达78.3%。 结论 体外制备的核酶具有良好的特异催化切割活性。

摘要：背景:基于纳米技术发展起来的纳米载体介导的磁性载药系统,在外加磁场作用下,能实现位点特异性靶向给药的目的,有利于提高病灶部位的局部药物浓度,从而进一步提高治疗效果,减少全身毒副作用。目的:研究磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化酚砷纳米微粒的制备工艺,评价纳米粒子特性。设计:首先选择几个可能影响纳米微粒特性的因素进行了单因素实验,然后再根据实验结果,结合统计学中的正交设计,获得了最佳优化处方。单位:解放军第二军医大学长海医院特诊科。材料:实验于2005-01/2006-03在解放军第二军医大学药学院药剂教研室完成。实验用氧化酚砷购自美国Sigma公司,聚乳酸-羟基乙酸由山东医疗器械研究所提供,纳米级四氧化三铁购自美国Sigma公司,聚乙烯醇购自北京有机化工厂,二氯甲烷等其他试剂均为分析纯,购于上海国药集团化学试剂有限公司。方法:运用超声乳化-溶剂挥发法制备磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化酚砷纳米微粒,通过透射电镜观察微粒形态,振动样品磁强计确证纳米微粒磁性的存在,激光粒径仪测定纳米粒的粒径大小和分布,高效液相法测定氧化酚砷的载药量及包封率,并计算氧化酚砷体外释放百分率。主要观察指标:磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化酚砷纳米微粒的形态、粒径、载药量、包封率、磁性及体外释放情况。结果:①微粒包封率和载药量:实验制备的纳米粒平均包封率为34.2%;5批纳米粒载药量分别为3.06%,3.15%,3.18%,3.21%,3.41%,平均载药量为3.20%,批间差异较小,说明工艺稳定性、重现性好。②微粒形态:纳米微粒呈圆形,表面光滑,分布均匀,不粘连,磁性微球中可见非均匀分散的黑色不透光区,为四氧化三铁微粒。③微粒粒径:分布范围窄(140～500nm),平均290nm。④微粒磁性:在不断改变外加磁场的大小与方向的情况下,微粒具有不同的磁化强度,说明氧化酚砷聚乳酸纳米微粒具有一定的磁响应性。⑤体外释放实验:氧化酚砷经过最初的快速释放后,进入缓慢控释阶段,于第8天时达到最终基本稳定的平台期。结论:实验获得了较满意的磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化酚砷纳米微粒制备工艺;该纳米微粒在外加磁场的情况下有较好磁靶向性的作用,同时具备良好药物缓释作用。

摘要：目的探索腹膜透析中心采用信息化管理在门诊随访中的应用效果。方法根据腹透中心的工作特点及护理管理需求，设计开发软件《腹膜透析管理系统》。对照组采用传统门诊随访及记录方式，改进组采用《腹膜透析管理系统》管理，分析2组患者腹膜透析管理质量和治疗效果、腹透中心护士护理文书书写所耗时间。结果在2组患者入组初期临床病情等基本信息无差异的情况下，改进组护士书写文书时间明显缩短（P〈0．05）；掉队率、失访率、并发症发生率及感染率明显降低（P〈0．05）；水肿及营养不良的改善较明显（P〈0．05）。结论采用《腹膜透析管理系统》管理，可使腹透患者透析数据更加准确、全面、动态、及时，缩短护士文书书写时间，降低失访率，减少并发症，提高中心管理效率，该软件对应用医院信息系统的医院有较好的推广使用价值。

摘要：循证医学是指"遵循证据的医学",核心是采用最佳客观研究结果作为诊疗依据。经验医学在肝胆外科学及其教学活动占重要地位的现状迫切需要改变。通过实例阐述肝胆外科学教学中实现循证医学的过程。循证医学对肝胆外科学教学及其学科发展具有重要意义。