摘要：目的:建立LC-MS/MS法测定人体血浆利多卡因的浓度,并研究NAL1282利多卡因贴剂(5%)的药代动力学。方法:色谱柱为YMC C18(150 mm×2.1 mm,5μm),流动相为乙腈-20 mmol·L-1甲酸铵(87:13,v/v);流速:0.25 mL·min-1;进样量:5μL;柱温:40℃,样品室温度为15℃。采用随机、单剂量给药、开放性、两周期交叉设计的单中心试验,分别给予9名健康受试者NAL1282利多卡因贴剂3贴,700 mg·贴-1。采用LC-MS/MS法测定给药后不同时间的血药浓度。结果:利多卡因线性范围为0.8～206 ng·mL-1,最低检测限为0.2 ng·mL-1,方法灵敏、稳定、特异性高。利多卡因贴剂主要药代动力学参数Cmax、Tmax、AUC0→24和AUC0→∞分别为(61.6±18.5)ng·mL-1;9 h(6 h,12 h);(848.4±231.7)ng·h·mL-1;(1129.3±324.0)ng·h·mL-1。结论:该方法简便、准确,重复性好,并可应用到人体利多卡因贴剂药代动力学的研究。

摘要：目的：建立LC-MS/MS法测定人体血浆氟桂利嗪的浓度,并研究由扬子江药业集团有限公司生产的盐酸氟桂利嗪滴丸的相对生物利用度。方法：色谱柱为Thermo Hypurity C18（150 mm×2.1 mm,5μm）,流动相为乙腈-10 mmol/L甲酸铵（含0.1%甲酸）（65∶35,V/V）;流速：0.3 mL/min;进样量：10μL;柱温：40℃,样品室温度为15℃。采用双周期随机交叉试验设计。分别给予18名男性健康受试者试验制剂或参比制剂氟桂利嗪20 mg,采用LC-MS/MS法测定给药后不同时间的血药浓度。结果：氟桂利嗪线性范围为0.38-196 ng/mL,氟桂利嗪最低检测限为0.1 ng/mL,方法灵敏、稳定、特异性高。试验制剂与参比制剂的主要药代动力学参数Cmax、tmax、AUC0-24和AUC0-∞分别为：（86±36）和（82±34）ng/mL、2.5 h（1-3 h）和3 h（2~5 h）、（725±338）和（709±320）***-1.h、（811±375）和（780±330）***-1.h。氟桂利嗪受试制剂与参比制剂具有生物等效性。结论：该方法简便、准确、重复性好,并成功地应用到人体盐酸氟桂利嗪生物等效性评价。

摘要：目的:评价试验制剂氯沙坦钾片(杭州民生药业)与参比制剂氯沙坦钾片(杭州默沙东制药)的生物等效性及CYP2C9*3基因多态性对氯沙坦药代动力学的影响。方法:采用PCR测序法对健康中国汉族受试者CYP2C9*3(rs1057910A>C)位点进行基因分型,筛选36名受试者入组本试验,其中CYP2C9*1/*1(AA)基因型个体32例,CYP2C9*1/*3(AC)基因型个体4例。本研究为两制剂、两周期交叉设计,单次、开放口服给药的单中心试验,给药剂量为氯沙坦钾片(50mg/片)1片。通过液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中氯沙坦钾及其代谢产物E-3174的浓度,采用DAS3.2.2非房室模型药动学参数计算的方法求算药动学参数。结果:受试试剂对参比制剂的相对生物利用度分别为氯沙坦(101.5±20.2)%、E-3174(100.0±13.8)%;同CYP2C9*3为AA基因型受试者相比,AC基因型受试者中氯沙坦的药代动力学参数AUC0-12、AUCinf以及Cmax升高,其中AUC0-12、AUCinf差异有统计学意义;E-3174的药代动力学参数AUC0-48和AUCinf降低,不同基因型间差异无统计学意义。结论:两种制剂生物等效;CYP2C9基因1075A>C突变可导致氯沙坦代谢减慢,但氯沙坦临床剂量可能不需要根据CYP2C9基因型进行调整。

摘要：目的克隆人长链非编码RNA H19基因,构建表达载体,研究H19表达对MCF-7增殖的影响作用。方法制备乳腺癌MCF-7细胞总RNA,RT-PCR扩增长链非编码RNA H19全长序列,分子克隆至pc DNA3.1(-)真核表达载体;分别转染HEK-293T和COS 7细胞并行Real-time q PCR验证载体构建是否成功;转染H19表达载体入MCF-7细胞株,转染0、24和48 h后行MTS检测H19表达,同时设计siRNA小分子片段干扰H19的表达,观察对MCF-7细胞增殖活性的影响。结果成功克隆和构建了h H19-pc DNA3.1(-)表达载体;转染入MCF-7细胞48h后,H19过表达,MTS检测H19表达载体组吸光度明显高于空载体组和空白对照组;而转染H19 siRNA小分子片段后能干扰其表达,同时抑制细胞增殖。结论 H19过表达能够促进乳腺癌MCF-7细胞增殖。

摘要：目的研究洛索洛芬钠分散片的相对生物利用度。方法采用双周期随机交叉试验设计。分别给予18名男性健康受试者试验制剂或参比制剂洛索洛芬钠60mg,采用HPLC法测定给药后不同时间的血药浓度。结果参比制剂与试验制剂的主要药物动力学参数Cmax、tmax、AUC0～6和AUC0～∞(均数±标准差)分别为:(5 221.3±1 726.1)和(5 309.0±1 946.1)***-1,(0.61±0.26)和(0.69±0.30)h,(9 507.2±4 062.0)和(9 380.5±3 765.3)***-1,(10 580.8±4 385.6)和(10 552.4±3 852.8)***-1。试验制剂对参比制剂的相对生物利用度F(以AUC0～6作为评价依据)为106.7%(94.8%～120%)。结论经统计学分析,广东先强药业有限公司生产的洛索洛芬钠分散片与上海三共制药有限公司生产的洛索洛芬钠片剂具有生物等效性。

摘要：肺癌是世界范围内癌症死亡的主要原因,而肺鳞癌是肺癌中最常见的组织病理类型,约占原发性肺癌的40～50%。临床和分子机制研究表明肺鳞癌是多因素复杂疾病。长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)是长度大于200nt的非编码RNA的统称。最初的研究认为它是转录组的"噪音",但近十年来的生命科学研究发现,它们参与了多项生物调控过程。有研究表明lncRNAs在许多癌症类型中均异常表达。本研究通过全基因组lncRNAs表达研究探索lncRNAs是否有可能与肺鳞癌的形成相关。我们从中南大学湘雅医院收集了16例肺鳞癌手术病人的肺癌及癌旁组织并保存于液氮中,采用Trizol法提取组织总RNA,反转录成cDNA,体外转录合成cRNA,使用RNA纯化柱纯化cRNA,以cRNA为模板,用随机引物进行反转录,荧光标记反转录产物,最后进行Agilent human4×180K芯片杂交。使用Agilent Feature Extraction(v10.7)软件对杂交图片进行分析并提取数据,然后用Agilent GeneSpring软件对数据进行归一化和差异分析,使用R语言对归一化后的表达数据进行统计分析。此芯片中设计了总共38361个lncRNAs探针,我们的数据结果显示,肺鳞癌组织组与正常肺组织组比较,有28055个lncRNAs探针的表达有一定水平的改变,其中3460个显著差异表达(倍数变化绝对值≥2),而我们对所有样本对统计发现,127个在所有肺鳞癌组织中与配对正常组织相比,其表达有显著差异。在这3460个lncRNAs中,1559个lncRNAs表达下调,1901个lncRNAs表达上调,绝大部分lncRNAs的功能未知,因此我们试图通过构建共表达网络预测lncRNAs的功能。我们以相关系数0.99和P<0.05为基础,构建了lncRNAs和mRNAs的共表达网络,并在此基础上从两个方面对lncRNAs可能的靶基因进行预测,分别是顺式距离在10Kb内的lncRNA-mRNA对和与mRNA的3'UTR的序列比对相似的lncRNA-mRNA对,共得到33个lncRNA-mRNA对。对这33个mRNA进行分析发现,TERC很可能是非小细胞肺癌的诊断标志物,因此考虑与之对应的两个lncRNA:ENST00000363312和sno-RNA_scaRNA_0_548也可能作为非小细胞肺癌的诊断标志物。因此我们得出结论:肺鳞癌组织中差异表达的lncRNAs可能参与到肺癌的发展过程中,也可能作为未来肺鳞癌的潜在治疗靶标。