摘要：对溴甲酚绿(BCG)法测量血清白蛋白(ALB)进行评价以及探讨其在不同疾病中发生偏倚的影响因素。本研究为横断面研究,以2021年7月在中南大学湘雅三医院肾内科、普外科、感染科等科室的128例住院患者作为研究对象,根据疾病类型分成慢性肾脏病组(47例)、肝病组(40例)、其他疾病组(41例),同时用BCG法和免疫比浊法检测患者血清ALB,所得结果分别用ALBBCG和ALBI表示。根据ALBI结果将各组再分成白蛋白相对高值、相对中间值、相对低值三个亚组,对所有组和亚组中的ALBI与ALBBCG进行配对T检验。用Passing-Bablok回归和Bland-Altman图评估ALBBCG在各组中的应用。以免疫比浊法为参考方法评估BCG法的偏倚,ALBI与ALBBCG的差异表示如下:ΔALB=ALBBCG-ALBI,分别用Pearson相关分析和多元线性回归分析评估各组中ΔALB与ALB自身浓度(ALBI)、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β1-球蛋白、β2-球蛋白、γ-球蛋白、肌酐(Cr)、尿素(UN)、尿酸(UA)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)、C反应蛋白(CRP)水平的相关性。结果显示,在总患者组、慢性肾脏病组、肝病组、其他疾病组的相对低值亚组中,ALBBCG均高于ALBI,差异具有统计学意义(t值分别为8.025,6.878,2.628,4.915,P均<0.05)。在相对高值亚组中,ALBBCG均低于ALBI,其中,在总患者组、肝病组、其他疾病组的相对高值亚组中,差异具有统计学意义(t值分别为-4.388,-2.927,-3.979,P均<0.05)。Passing-Bablok回归和Bland-Altman分析显示BCG方法存在比例偏倚。在慢性肾脏病组中,ALBI和Cr浓度对BCG方法偏倚影响最大,回归模型方程为ΔALB=5.437-0.146×ALBI-0.001×Cr,R2=0.505。在肝病组中,ALBI、α1-球蛋白和β1-球蛋白浓度对BCG方法偏倚影响最大,回归模型方程为ΔALB=3.652-0.230×ALBI+0.398×α1-球蛋白+1.171×β1-球蛋白,R2=0.658。在其他疾病组中,ALBI和α2-球蛋白浓度对BCG方法偏倚影响最大,回归模型方程为ΔALB=5.558-0.225×ALBI+0.281×α2-球蛋白,R2=0.646。综上,BCG法存在比例误差,其偏倚会导致不可接受的差异,BCG法检测ALB的偏倚主要受ALB自身浓度的影响,其他还受α1-球蛋白、α2-球蛋白、β1-球蛋白、Cr的影响。

摘要：目的制备可检测全长SUN5的特异性抗体,并用该抗体检测SUN5蛋白在人类生殖细胞中的表达。方法通过生物信息学比较SUN5与新剪切体SUN5β之间的差异,在差异区域设计合成短肽,制备SUN5多克隆抗体并纯化。用新制备的SUN5抗体对Ntera-2细胞中的SUN5蛋白进行Western blotting和免疫荧光检测,验证抗体的特异性;最后,用该抗体对人睾丸细胞涂片进行检测,观察SUN5蛋白在人生殖细胞中的表达。结果成功合成了SUN5短肽,而且用该短肽制备了SUN5多克隆抗体。Western blot结果显示,新制备的SUN5特异性抗体可检测到全长SUN5蛋白。免疫荧光实验结果表明,在Ntera-2细胞中SUN5蛋白定位在核膜和胞浆。通过对人睾丸细胞涂片的检测发现,SUN5在睾丸精母细胞、圆形精子细胞及精子中均有表达。结论成功制备了SUN5特异性抗体,该特异性抗体的制备对于深入研究SUN5的功能具有重要的意义。此外,发现SUN5蛋白在精母细胞、圆形精子细胞及精子中均有表达,提示SUN5蛋白可能在精子发生中发挥着重要的生理功能。

摘要：目的调查大肠埃希菌中质粒头孢菌素酶(AmpC酶)的基因型分布以及耐药性。方法收集对头孢西丁耐药的24株大肠埃希菌,根据头孢菌素酶和超广谱内酰胺酶(ESBLs)各种已知基因序列设计引物,进行聚合酶链反应(PCR)及序列分析确定AmpC酶基因以及ESBLs的基因型分布;接合试验证实质粒ampC基因有无可转移性。结果24株耐头孢西丁的大肠埃希菌中13株产CMY型类似AmpC酶,1株产DHA-1型AmpC酶;PCR检测发现ESBLsTEM型15株,CTX-M型2株,SHV型1株。结论耐头孢西丁的大肠埃希菌中发现CMY型类似AmpC酶和DHA-1型AmpC酶。药敏结果对大多数新型广谱β-内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感。

摘要：探讨红细胞碎片计数(FRCs)、红细胞碎片比例(FRC%)对脓毒症预后的诊断效能。采用前瞻性研究,选取2022年6月1日至2023年1月10日在中南大学湘雅三医院重症医学科收治的符合要求的101例脓毒症患者作为研究对象,根据患者30 d结局分为生存组和死亡组。比较脓毒症生存组与死亡组的临床资料和FRCs、FRC%、血小板(PLT)等实验室指标。以是否发生死亡为因变量,将脓毒症患者的病例资料和实验室指标先进行单因素logistic回归,后进行多因素logistic回归分析以分析影响预后的因素,对纳入模型的各参数绘制受试者工作特征曲线(ROC)并计算曲线下面积(AUC),评价单独使用和联合使用各参数对脓毒症患者死亡的预测效能。结果显示,脓毒症死亡组的FRCs、FRC%、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、D二聚体要明显高于生存组,PLT明显低于生存组(Z或t值分别为-3.712,-3.793,-2.119,-2.007,-2.209,均P<0.05),FRCs或FRC%、PLT可能是脓毒症患者30 d死亡的风险预测指标。PLT预测脓毒症患者死亡的AUC为0.727(95%CI 0.629~0.811,P<0.01),最佳截断值为137×10^(9)/L,敏感度为83.87%,特异度为57.14%。FRCs预测脓毒症患者死亡的AUC为0.732(95%CI 0.635~0.815,P<0.01),最佳截断值为10.1×10^(9)/L,敏感度为77.42%,特异度为67.14%。FRC%预测脓毒症患者死亡的AUC为0.737(95%CI 0.640~0.820,P<0.01),最佳截断值为0.34%,敏感度为77.42%,特异度为65.71%。综上,PLT、FRCs、FRC%在脓毒症的预后中具有较大的应用价值。当脓毒症患者PLT、FRCs、FRC%检查结果分别大于137×10^(9)/L、10.1×10^(9)/L、0.34%时,需要及时对病情进行全面综合考虑,尽早采取必要合理的临床干预措施以预防患者死亡。

摘要：目的:研究嵌合寡核酸对端粒酶活性的抑制作用。方法:合成各种寡核苷酸(ODNs),利用HL-60细胞溶解液实施体外实验,U-87细胞系观察这些寡核苷酸在细胞水平的作用。结果:硫代磷酸酯寡核甘酸(PS-ODNs)和RNA模板反义ODNs都可以抑制端粒酶的活性,且可产生累积效应。PS-ODNs的3’端延长一段与端粒酶RNA模板区域互补的各种修饰的ODNs则可以更进一步地提高它们的抑制效率。结论:研究设计的嵌合反义寡核苷酸(cODNs)作为目前较有效的端粒酶活性抑制剂,可成为肿瘤治疗中较有前途的药物之一。

摘要：目的采用反向PCR对Ⅰ类整合酶基因侧翼序列进行检测分析。方法以临床分离的Ⅰ类整合子阳性大肠埃希菌为研究对象,用限制性内切酶HindⅢ对基因组DNA进行酶切,T4 DNA连接酶使酶切产物自身环化,设计Ⅰ类整合酶基因反向引物扩增Ⅰ类整合酶基因侧翼序列。结果临床分离大肠埃希菌中Ⅰ类整合子检出率为68.1%,反向PCR扩增得到1800bp大小的Ⅰ类整合酶基因侧翼序列。结论Ⅰ类整合子在临床分离大肠埃希菌中广泛存在,反向PCR对Ⅰ类整合酶基因侧翼序列检测进一步明确了Ⅰ类整合子的结构,并发现其侧翼序列存在RNA聚合酶基因β亚基,为Ⅰ类整合子调控基因分析及克隆奠定了研究基础。

摘要：目的建立荧光实时定量PCR(FQ-PCR)定量测定铜绿假单胞菌的方法,检测该方法的灵敏度并与传统细菌培养比较其特异性吻合率。方法选择铜绿假单胞菌的oprI基因为目的基因设计探针引物,建立Taqm an探针FQ-PCR体系定量检测5种标准菌株、3种病毒株、白色念珠菌、肺炎支原体、人基因组DNA及临床培养96株菌株。结果31株铜绿假单胞菌、铜绿假单胞菌与其它菌种或人全血的混合液均产生特异扩增信号,标准曲线的相关系数为0.997;其他菌种(76株)无扩增;乙肝病毒、巨细胞病毒及肺炎支原体及健康人全血均无扩增,与传统培养相比特异性吻合率达100%,铜绿假单胞菌标准株按等级浓度稀释后其拷贝数也呈等级梯度递减,实际可检测到的最小菌落数为100个/m l,全程检测<4 h。结论荧光实时定量法检测oprI基因可以运用于铜绿假单胞菌的快速检测。

摘要：目的监测2006年10月至2007年10月我国不同地区14家教学医院分离的腹腔感染病原菌的菌种分布及其体外药物敏感性。方法按设计方案收集来自腹腔感染的病原菌。菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定10类共29种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),数据输入WHONET5.4软件进行耐药性分析。结果此次监测收集的腹腔感染病例数为742例,分离出的病原菌为743株,其中革兰阴性菌占76.7%(570/743),革兰阳性菌占23.3%(173/743)。病原菌中分离率位于前5位的分别为大肠埃希菌(38.8%)、肺炎克雷伯菌(10.2%)、铜绿假单胞菌(9.2%)、屎肠球菌(8.2%)和金黄色葡萄球菌(4.4%)。对于所有肠杆菌科菌,敏感率高于90%的抗菌药物包括美罗培南、亚胺培南、替加环素、阿米卡星和他唑西林-三唑巴坦。对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和克雷伯菌,敏感性大于90%的药物包括亚胺培南(100%)、美罗培南(100%)、替加环素(100%)和他唑西林-三唑巴坦(91.5%～91.7%)。铜绿假单胞菌中多重耐药菌株的检出率为14.7%,鲍曼不动杆菌为61.3%。金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林(MRSA)的发生率为69.7%,所有菌株对替加环素、万古霉素和替考拉宁均敏感。替加环素对所有粪肠球菌和屎肠球菌均保持了100%的敏感率。粪肠球菌中敏感性较高的抗菌药物还有万古霉素(100%)、替考拉宁(100%)和氨苄西林(81.5%)。屎肠球菌中敏感性较高的抗菌药物还有万古霉素和替考拉宁(96.7%)。结论引起腹腔感染的病原菌以革兰阴性菌特别是肠杆菌科菌为主。替加环素、碳青酶烯类、他唑西林-三唑巴坦和阿米卡星对腹腔感染肠杆菌科菌保持了较高的抗菌活性,非发酵的革兰阴性杆菌的耐药性令人担忧。替加环素、万古霉素和替考拉宁对院内革兰阳性球菌保持了较高的抗菌活性。