摘要：目的:观察搏动信号对人脐静脉内皮细胞中反映内皮细胞活性的内皮型一氧化氮合酶mRNA表达的影响。方法:实验于2004-06/2005-03在湘雅二医院心胸外科生物材料研究室和上海生物工程有限公司进行。将取自剖宫产产妇自愿捐献的无菌脐带的人脐静脉内皮细胞培养、传代,传4代后分为两组:①搏动培养组:先静放6～8h待细胞贴壁后,用自行设计的细胞搏动培养装置,进行搏动培养。搏动参数:搏动频率150次/min,搏出量0.3mL/次,搏动产生的压力30/9mmHg(1mmHg=0.133kPa)。②静态培养组:不进行搏动,其余条件同搏动培养组。每组每个时间点5个样本。用反转录-聚合酶链反应方法,分别在第1,2,4,6,9,12,15,18天检测两组的人脐静脉内皮细胞的内皮型一氧化氮合酶mRNA的表达水平(相对吸光度值)。结果:人脐静脉内皮细胞的内皮型一氧化氮合酶mRNA表达:①培养第1,4天,静态培养组明显高于搏动培养组(1.0±0.55比1.10±0.35;1.17±0.23比1.42±0.44,P0.05)。③培养第6,9,12,15,18天,搏动培养组明显高于静态培养组(1.52±0.14比1.27±0.30;1.60±0.19比1.16±0.33;1.68±0.44比0.99±0.31;1.7±0.24比1.1±0.94;1.7±0.16比1.0±0.28,P<0.05)。结论:搏动信号能提高人脐静脉内皮细胞的内皮型一氧化氮合酶的表达。提示搏动信号在维持细胞发挥正常的生理功能方面起到重要的作用,能增强细胞的生物活性。

摘要：目的:构建有效针对人Dystrophin Dp71基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体,并验证其干扰效果。方法:设计合成3对针对人Dystrophin Dp71基因的和1对无同源性的siRNA片段,在两端和中间加上酶切位点和Loop环。将合成的DNA片段插入到干扰载体pRNAT-U6.1/Neo中,经过酶切和测序验证,成功构建人Dp71基因的shRNA和空白对照载体。将各干扰载体和空白载体转染人正常胃黏膜上皮细胞(gastric epithelial cells,GES-1)和人支气管上皮细胞(human bronchial epithelium,HBE),Western印迹检测Dp71 shRNA真核表达载体的干扰效率。结果:酶切和测序验证均表明各Dp71-shRNA载体构建成功。将空载体及各Dp71 shRNA载体分别转染GES-1和HBEC,和空白细胞对照及shRNA空白载体组相比,3组Dp71-shRNA能够明显抑制Dp71蛋白表达,但是3组质粒的抑制效率有一定的差异,以Dp71 shRNA2对Dp71表达的干扰效率最强。结论:成功构建了3个有效针对人Dystrophin Dp71基因的shRNA干扰载体,3组质粒都能有效地抑制Dp71在GES-1和HBEC中的表达,其中以Dp71-shRNA2的抑制效率最高。

摘要：背景：慢性排斥反应限制了心脏移植患者的长期存活．有报道结缔组织生长因子因其与细胞增殖和胶原合成有关，似乎参与了此过程。目的：假设结缔组织生长因子在大鼠心脏移植慢性排斥反应中发挥作用，实验拟验证其表达与心脏慢性排斥反应病理过程的关系。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007—04／08在中南大学湘雅二医院动物实验中心完成。材料：取20只Wistar大鼠作为供体，20只SD大鼠作为受体，制作腹部异位心脏移植模型20例次；另选择10只Wistar大鼠作为对照。方法：大鼠腹部异位心脏移植术后，给予环孢素A、霉酚酸酯和甲泼尼龙三联免疫抑制治疗。移植后2．8周分别按随机数字表法麻醉后处死10只受体大鼠．取心脏；10只Wistar大鼠心脏作为对照。主要观察指标：采用苏木精-伊红染色及Van Gieson染色观察心肌病理形态、心肌血管密度及心脏血管狭窄程度：并进行心肌纤维化半定量评分。采用免疫组织化学法检测心肌组织结缔组织生长因予蛋自的表达：并分析结缔组织生长因子表达与慢性排斥反应过程中心肌血管病变及纤维化的相关性。结果：①术后8周移植心脏血管狭窄程度、心肌纤维化评分及结缔组织生长因子蛋白表达量明显高于术后2周及正常心脏（P〈0．05-0．01）；术后8周移植心脏血管密度低于正常心脏（P〈0．05）；结缔组织生长因子在正常心脏基本没有表达。②心肌组织结缔组织生长因子蛋白表达灰度值与心肌纤维化、血管狭窄程度均呈负相关（r=0．734，-0．713，P〈0．01），表明结缔组织生长因子表达与心肌纤维化及血管狭窄程度呈正相关。结论：结缔组织生长因子在有心肌血管病变的移植心畦心肌组织中表达增强，其表达与心肌纤维化和心肌血管病变形成有关，在心肌移植排斥反应的病理过程中起重要作用。

摘要：目的构建有效的针对人FoxA1基因的shRNA干扰载体,并验证其干扰效果。方法设计合成3对针对人FoxA1基因的和1对无同源性的shRNA片段,将合成的shRNA片段插入到干扰载体pRNAT-U6.1/Neo中,经过酶切和测序验证,成功构建人FoxA1基因的shRNA和空白对照载体。将各干扰载体和空白载体转染人正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞(SGC-7901),Realtime RT-PCR和Western-blotting检测干扰载体的干扰效率。结果①酶切和测序验证均表明各shRNA载体构建成功。将空载体及各干扰载体分别转染人正常胃黏膜细胞(GES-1)和胃癌细胞(SGC-7901)发现,和空白对照组相比,3组干扰载体能够从mRNA和蛋白表达水平明显抑制FoxA1的表达,但是3组质粒的抑制效率有一定的差异,以3号质粒对Foxa1的干扰效率最强。结论成功构建了三个有效的针对人FoxA1基因的shRNA干扰载体,三组质粒都能有效地抑制FoxA1在GES-1细胞和SGC-7901细胞中的表达。

摘要：肿瘤的发生和发展是一个复杂的多因素多机制的过程,研究其易感基因的多态性对于阐明疾病易感性机制、设计个体化治疗方案和环境危险因素的评价与预警等均具有重要意义。Toll样受体既可以活化和促进肿瘤细胞的增殖和生长,也可以通过募集炎性细胞或激活免疫反应来抑制和杀灭肿瘤细胞,可调控肿瘤的发生、发展和周围细胞的免疫反应。Toll样受体基因的多态性使其编码的蛋白或传导的信号发生改变,从而使人群出现对某些肿瘤不同的遗传易感性,其基因特定位点的变异可影响肿瘤的发生和发展。本文就近年来有关Toll样受体基因多态性与肿瘤易感性的相关研究作一概述。

摘要：目的研究松花粉超临界CO2萃取物对高血脂患者血脂的影响。方法实验选择100例高血脂症患者为受试者,其血清总胆固醇(TC)≥6.5mmol/L或血清三酰甘油(TG)≥2.26mmol/L,按血脂水平、年龄、性别等随机分为试食组和对照组两组,其中试食组50例,对照组50例,采用双盲随机分组、组间和自身两种对照设计,试食期间保持平常的生活和饮食习惯,试食组服用松花粉超临界CO2萃取物,对照组服用安慰剂,每日2次,每次2粒,连续给样30d后,取血测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)等指标,并观察试验期间产生的不良反应。结果松花粉超临界CO2萃取物能明显降低血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和低密度脂蛋白(LDL-C)(P<0.05),有提高血液中高密度脂蛋白水平的趋势,但差异不显著,其总有效率为70.00%,与对照组(8.00%)比较,差异有显著性(P<0.05),而且在试验中没有产生不良反应。结论松花粉超临界CO2萃取物具有辅助降血脂作用,并对高血脂症患者安全,值得开发应用。

摘要：目的:调查多个省级医疗中心工作人员对手卫生的认识及依从性,并探讨影响依从性的因素,为改进手卫生提供科学依据。方法:随机调查湖南省内5家大型三甲医院12个临床科室各类工作人员不同时刻的手卫生依从性情况,并对相关人员进行问卷调查,分析影响手卫生依从性的因素。调查问卷采用de Wandel等设计基于行为理论模式的56项调查问卷的中文修改版。结果:共随机调查416名医务人员(医师143名,护士192名,护工及卫生清洁人员81名),手卫生总的依从性为47.78%;护士的依从性最高为58.95%,医师为41.96%,护工及卫生员的依从率仅为21.62%,三者两两比较差异具有统计学意义。在不同洗手时刻的依从性方面,直接接触病人之前、进行无菌操作或护理程序之前、接触血液或体液之后、直接接触病人之后、接触病人直接范围之后的洗手依从率分别为27.59%、49.32%、63.37%、61.68%、38.62%。ICU、移植中心及新生儿科的手卫生依从性明显高于其他普通科室。问卷调查显示,对手卫生的重要性认识不足、工作时间紧、洗手设施不足、手卫生的人文关怀少、部分医务人员自律性差等因素是影响手卫生依从性的重要因素;同时护工等辅助人员的手卫生知识和依从性急需加强。结论:我省省级医院医务人员尤其是护工及辅助人员的手卫生依从率仍有待提高,需从增强手卫生的知识、提高对手卫生重要性的认识、改善洗手设备、加强人文关怀和管理等方面改进手卫生。

摘要：随着生物力学的诞生和计算机技术的飞速发展 ,学者们已经开始应用物理、数学、解剖、生理学的知识更深刻、更准确的认识生命过程 ,解决医学工程和临床医学所面临的问题。而对于人工心脏瓣膜 ,无论是机械瓣膜还是生物瓣膜 ,更是试图通过数值分析与实验手段研究其力学行为 ,为瓣膜的优化设计提供依据 ,从而延长瓣膜寿命。本文从生物力学的角度 ,阐述了人工心脏瓣膜与机械应力的关系。

摘要：背景：体外构建组织工程化心肌是当今医学领域的研究热点,支架材料的选择和设计是心肌组织工程的关键环节,但目前仍未找到理想的心肌支架材料。目的：对新型可降解材料聚氨酯进行体外评价,初步探讨其作为心肌组织工程支架的可行性。方法：以赖氨酸基二异氰酸酯为硬段,以赖氨酸为扩展链合成新型聚氨酯（PU-Lys）。在拉力机上测试材料的缝合强度和拉伸强度;在37℃,pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液中检测聚氨酯的降解性能;采用细胞培养MTT法、细胞形态学观察方法,分析该聚氨酯的细胞毒性。结果与结论：力学性能检测得出该聚氨酯的拉伸强度为（8.1±0.1）MPa,缝合强度为（12.2±0.8）N;体外降解8周后质量损失为（13.1±0.3）%;MTT比色法结果显示细胞毒性为0~1级;细胞形态学观察显示L929细胞在聚氨酯材料浸提液中呈梭形或三角形,贴壁良好。提示此种新型解聚氨酯具有良好的力学性能和降解性,细胞相容性良好,符合组织工程心肌支架材料的应用要求。