摘要：目的筛选鉴定针对HIV-1vpr基因的小干扰RNA（siRNA）干扰片段，探讨siRNA对HIV-1vpr基因的干扰效率。方法根据siRNA设计要求合成针对HIV-1vpr靶点的2段寡核苷酸片段，并构建相应载体，转染含HIV-1vpr质粒的HEK293T细胞。设2个实验组（siRNA56、siRNA160组），1个阴性对照组（NC组），空白HEK293T细胞为对照组（Con组）。各组分别进行总RNA、蛋白提取，实时PCR和蛋白质印迹分别从核酸和蛋白水平验证有效的靶向HIV-1vpr的siRNA片段。ELISA检测各组培养细胞上清液中IL-17、丫干扰素水平。结果DNA测序结果表明成功构建了哺乳动物细胞pRNAT—U6．1／Neo—Vpr-56／160（siRNA56和***160）表达载体。siRNA56和siRNAl60干扰使HIV1vpr基因在mRNA水平的表达分别下降69．0％和76．1％；在蛋白表达水平分别下降76．3％和86．5％。Con组、NC组、siRNA56组和siRNA160组细胞培养上清液中IL-17分别为（1．936±0．415）、（1．815±0．393）、（1．935±0．356）和（2．03±0．421）pg／mL；了干扰素分别为（1．673±0．234）、（1．648±0．332）、（2．169±0．362）和（2．301±0．4125）pg／mL。结论表达pRNAT—U6．1／Neo—vpr-56／160（sirNA56和siRNA160）的质粒构建成功，针对不同基因片段的siRNA均可以下调HIV-1vpr的表达水平。

摘要：目的开发儿科严肃游戏并探讨其对儿科实习护士临床推理与反思能力的培养效果。方法本研究为非随机对照试验研究。采用便利取样法于2021年4月至2022年1月选取中南大学湘雅二医院儿科实习护士88名,按照随机抽签法分为对照组和试验组,每组44名。对照组按照实习大纲计划进行儿科临床实践教学;试验组以加涅教学事件为框架设计严肃游戏的教学环节并开展教学。采用临床推理与反思自评量表、学生学习满意度和自信心量表评估2组实习护士教学前后临床推理与反思能力、学习满意度和自信心,并对2组实习护士出科考试成绩进行评价。结果2组实习护士教学前临床推理与反思能力、学习满意度和自信心比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。试验组实习护士教学后临床推理与反思能力总分为(101.13±6.69)分,高于对照组的(94.57±8.86)分,差异有统计学意义(t=-3.92,P<0.05);试验组实习护士教学后学习满意度、自信心评分分别为(20.82±2.16)、(33.20±1.47)分,高于对照组的(19.52±2.30)、(31.89±2.44)分,差异均有统计学意义(t=-2.33、-3.07,均P<0.05)。试验组实习护士教学后出科考试成绩为(83.32±3.10)分,高于对照组的(80.64±1.99)分,差异有统计学意义(t=-4.83,P<0.05)。结论严肃游戏教学法能够有效提高儿科实习护士临床推理与反思能力、学习满意度和自信心以及出科考试成绩,可为儿科护理实践教学改革提供借鉴。

摘要：目的筛选鉴定针对Hl V-1vpr基因的小干扰RNA(siRNA)片段。方法根据siRNA设计要求合成siRNA56、siRNA160和siRNA185寡核苷酸片段,分别转染至含HIV-1vpr质粒的HEK 293T细胞,并进行总RNA提取,采用Real-time PCR和Western blotting分别从核酸和蛋白水平对HIV-1vpr基因表达水平进行验证。结果siRNAs成功转染含HIV-1vpr质粒的HEK 293T细胞,降低了HIV-1vpr基因的表达水平,其中在RNA水平siRNA160组干扰抑制作用最强,抑制率为89%;在蛋白水平siRNA56组干扰抑制作用最强,抑制率为96%。结论 3个基因片段的siRNA均可以下调HIV-1vpr的表达水平,但存在差异性,为探索HIV/AIDS基因治疗的可行性和高效性提供了可靠的实验依据。

摘要：深入讨论传染病医院建筑给排水设计的要点。提出未来传染病医院建筑给排水系统设计的根本是严格遵照清洁区、半污染区以及污染区的医疗功能分区,维持负压病区的安全运转,基于不同的传染病传播途径和院感防控策略设计合理安全的给排水系统,辅以完善的系统巡检与维护,杜绝院内二次传播,为医务人员和患者提供安全可靠的环境。

摘要：目的研究靶向PDGF-B链的小干扰RNA(siRNA)对肝星状细胞(HSCs)细胞外基质分泌的影响。方法根据PDGF-B链序列设计合成siRNA序列,将siRNA序列插入pSilencer3.1-H1hygro质粒,酶切后测序鉴定;PDGF-B链siRNA表达质粒转染HSCs,潮霉素筛选阳性细胞株,RT-PCR和Westernblot分别检测PDGFmRNA和蛋白的表达;将各组筛选的阳性HSCs细胞株培养,MTT观察各组细胞增殖,放射免疫法检测HSCs细胞株上清液中透明质酸和Ⅲ型前胶原的表达。结果成功构建3种表达PDGF-B链siRNA表达质粒,RT-PCR和Westernblot结果表明各siRNA表达质粒阳性HSCs细胞PDGFmRNA和蛋白表达均有明显抑制。PDGF-B链siRNA表达质粒HSCs细胞组较对照组能明显降低HSCs增殖,下调透明质酸和Ⅲ型前胶原表达。结论靶向PDGF-B链的siRNA能降低HSCs增殖和分泌细胞外基质的能力,具有抗纤维化治疗的潜力。

摘要：目的 评价盐酸安妥沙星片治疗呼吸道、泌尿道和皮肤软组织感染的安全性和有效性。方法 采用区组随机化、双盲双模拟、多中心、平行对照的临床试验设计方法，选用左氧氟沙星片为对照药物，疗程7～14d。结果 719例患者入选，其中安妥沙星组359例，左氧氟沙星组360例，分别有330与337例完成研究，进入符合方案集（PPS）分析人群；安妥沙星组和左氧氟沙星组PPS人群治疗结束后第1天临床痊愈率分别为79．7％与77．4％，有效率分别为95．2％和96．7％，细菌清除率分别为96．7％与97．5％。呼吸道、泌尿道、皮肤软组织感染患者分别为239、240与240例，两组临床疗效差异没有统计学意义。左氧氟沙星组与盐酸安妥沙星组分别有357例和356例进行了安全性评价，不良事件发生率均为10．1％，不良反应发生率分别为7．8％和7．9％，主要以轻度消化道反庸为主。没有发现心电图QTc延长患者，两组各有1例患者治疗结束时血糖轮度增加，随访均恢复正常；两组临床、细菌学疗效以及不良反心发生情况差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 盐酸安妥沙星片治疗急性细菌性呼吸道、泌尿道和皮肤软组织感染疗效确切，安全性良好。