摘要：肺癌是癌症死亡的主要类型,大多数肺癌患者在诊断时就已为晚期,预后相当差。虽然低剂量计算机断层扫描已经进入临床作为肺癌筛查的工具,但是其假阳性率超过90%。作为研究热点的表观修饰之一,DNA甲基化在包括癌症在内的多种疾病中起着关键作用。抑癌基因的高甲基化和原癌基因的低甲基化是肿瘤发生发展中的重要事件。因此,DNA甲基化分析可以为肺癌的早筛、诊断、治疗和预后中提供一些有用的信息。尽管组织活检等侵入性方法仍然是肿瘤诊断和监测的金标准,但也存在取样不便等局限性。近年来,液体活检发展迅速,它可以检测原发性或转移性恶性肿瘤,并能反映肿瘤的异质性。此外,它可以微创或无创的形式进行样本收集,年老体弱患者也具有良好的耐受性。本文探讨了一些用于DNA甲基化分析的新兴技术并概述了DNA甲基化在肺癌诊疗中的应用。

摘要：目的　观察晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病 (SEDT PA)患者的X线及磁共振成像特点、关节软骨病理特点 ,筛查CCN6基因突变位点 ,探讨SEDT PA的发病机制。方法　应用放射学、磁共振成像方法分析汉族家系中两例SEDT PA患者骨骼及软骨等结构特点 ;应用HE和甲苯胺蓝染色法对关节软骨进行组织病理学特点观察 ;用电子显微镜观察关节软骨组织和细胞的超微结构 ;设计引物对CCN6基因外显子进行扩增和测序分析 ;应用突变CCN6蛋白质三维结构预测等方法研究SEDT PA的发病机制。结果　病理检查发现汉族家系中一例SEDT PA关节软骨细胞增生活跃伴成熟障碍 ,而基质胶原纤维大小和密度明显下降。突变筛查提示两患者在CCN6基因 8号外显子存在两种突变类型 ,其中的替换突变 (10 0 0T→C ,Ser334Pro)来自父方 ;而缺失突变(84 0delT)来自母方 ,导致其编码的氨基酸序列移码突变 ,在下游 31个氨基酸残基后提前出现终止密码子 ,导致蛋白质被截短 4 3个氨基酸残基。蛋白质三维结构预测结果显示 84 0delT截短突变蛋白质与野生型蛋白质相比 ,从信号肽至第一个结构域 (IGFBP)起始的 2 4个氨基酸残基区域由一个单一环变成两个小的交叉环 ,而且伴C末端明显缩短 ,而Ser334Pro蛋白质仅有C末端的延伸方向与野生型蛋白质相反 ,其余?

摘要：目的探讨选择性环氧化酶抑制剂塞来昔布对不同COX-2蛋白表达水平人类肿瘤细胞株的放射增敏作用及其发生机制。方法选用人乳腺癌细胞系MCF-7（低COX-2蛋白表达）和肺癌细胞系A549（高COX02蛋白表达）为研究对象。RT-PCR检测COX-2表达，MTT法及成克隆分析法测定塞来昔布对两种细胞系的细胞毒作用及放射增敏作用及流式细胞仪（FCM）检测细胞周期分布、细胞凋亡指数。结果塞来昔布作用于MCF-7细胞30h后的IC50值为（43．7±1．12）μmol／L，作用于A549细胞24h后的IC50值为（37．5±0．80）μmol／L。塞来昔布联合射线作用于A549细胞，与单纯照射组比较显示了放射增敏作用（P＜0．05），而在MCF-7细胞中则没有观察到这些现象。细胞周期检测发现，两种细胞各组都出现了不同的周期分布。塞来昔布组G0＋G1，期细胞比例增加，照射组的细胞则大多处于G2＋M期。不同浓度的塞来昔布10～80μmol／L作用6h后，均未观察到明显的凋亡现象，两种细胞照射组与照射加药组测得的凋亡均无差异。结论塞来昔布对MCF-7、A549细胞都有增殖抑制作用，并呈时间和剂量依赖性，其作用不完全呈COX-2依赖。塞来昔布能增加A549细胞放射敏感性，其机制可能与抑制COX-2蛋白、改变细胞周期分布有关。

摘要：背景:复方黄连能够抑制鼻咽癌细胞移植瘤的生长,但其作用的机制并不很清楚。目的:探讨复方黄连抑制鼻咽癌细胞移植瘤生长的机制。设计:随机对照的实验研究。地点、材料和方法:实验在中南大学湘雅医学院动物实验中心完成。实验选用10只Balb/C裸鼠,鼠龄3～4周。饲养1周后,在每只裸鼠的前腋下接种0.5mL(0.5×107个)HNE1细胞。移植瘤形成后,根据移植瘤的大小,按数字法将裸鼠随机分成实验组和对照组,每组5只。实验组灌喂复方黄连,对照组裸鼠仅灌喂无菌水。从瘤组织提取RNA,经返转录荧光标记作为探针与cDNA芯片杂交后用激光共聚焦扫描仪分析基因表达并通过返转录-聚合酶链式反应技术进一步证实基因的表达。主要观察指标:复方黄连处理后HNE1鼻咽癌细胞移植瘤的基因表达。结果:复方黄连处理30d后,移植瘤明显减小,同时有335条基因的表达发生改变,即242条基因表达下调和93条基因表达上调。通过RT-PCR分析,6条基因证实为真正差异表达。其中,MAD3,H731和EGR-α基因mRNA表达增高,而TRAF5,P68激酶和CHK1基因mRNA的表达下降。结论:复方黄连能够抑制HNE1鼻咽癌裸鼠移植瘤的生长,对HNE1鼻咽癌裸鼠移植瘤的抑制作用可能与基因表达的改变有关。