摘要：目前我国关于油茶林地中杂草的研究基本为零。为给油茶新造林安全除草控草提供科学依据,对湖南省林业科学院试验林场(杜家冲林场)油茶良种基地上油茶幼林中杂草的发生规律及危害情况进行了调查和总结分析,还设计了覆膜除草、割草-埋草、化学除草3种处理,就其对样地油茶幼林中杂草的防除效果进行了试验研究。调查结果表明:该基地油茶幼林中有22科43种的杂草。其中,禾本科杂草占杂草总数的23%,阔叶杂草占杂草总数的77%;1年生杂草有9种,占杂草总数的21%,多年生杂草有34种,占杂草总数的79%。试验结果表明:不同除草方式均能有效抑制杂草的生长,对于所有杂草的除草效果,各处理的影响顺序分别为化学除草>割草-埋草>覆膜除草>对照;对于禾本科杂草的防除效果,其影响顺序分别为化学除草>割草-埋草>对照>覆膜除草;对于阔叶杂草的防除效果,其影响顺序分别为化学除草>割草-埋草>覆膜除草>对照。鉴于草甘膦的毒性,文中提出了要结合采用机械化方式推广应用割草-埋草技术的建议。

摘要：为鉴定中国梨S-RNase基因及其S基因型,根据日本梨S-RNase基因保守区设计引物,对13个中国梨品种进行基因组PCR特异扩增,并对PCR产物克隆、测序、序列分析.结果鉴定出13个S等位基因,其中11个S基因与GenBank中已知的S1,S7,S12,S15,S16,S18,S19,S22,S27,S29,S34-RNases相同,另外2个则为新的S-RNase基因,命名为S37-RNase和S38-RNase,GenBank接受号分别为DQ839238、DQ839239.13个S等位基因中,在推导氨基酸水平上,S18与S27相似性最低,为58%,S7与S27,S12与S19,S15与S37及S15与S38间相似性最高,为94%.经分析,S19为中国梨中出现频率最高的等位基因,对其DNA序列进行限制性酶切位点分析,建立了一种快速、经济鉴定S19的方法,该方法无需测序而仅使用特异的限制性内切酶AflⅡ对PCR产物进行酶切消化.根据分子鉴定结果,13个中国梨品种S基因型被确定为:冰糖(S16S19),六棱(S16S19),锦香(S34S37),鹅酥(S15S38),蜜梨(S19S29),甜橙子(S7S12),大青皮(S19S34),秋白(S19S34),紫酥(S19S34),花长把(S19S22),灌阳雪梨(S18S27),早蜜(S19S29),青面(S1S18).

摘要：为得到高质量的油茶总RNA及稳定的内参基因，以油茶良种‘华硕’为试验材料，采用ambion试剂盒结合CTAB法进行总RNA提取。获得的总RNA完整性好，纯度高；从前期构建的油茶转录组数据中选取ACT（肌动蛋白基因）等14个基因作为候选内参基因，共设计22对引物，通过RT-PCR反应体系的优化及琼脂糖凝胶电泳检测，快速筛选出了适合油茶不同组织（器官）的内参基因。ALB（清蛋白基因），EF1α（延伸因子基因），ETIF3H（启动因子基因），UBC2（泛素结合酶基因）可以作为油茶果实初选内参基因，EF1α可以作为油茶根、茎、花及果实内参基因，ETIF3H可以作为油茶根、茎、叶、花瓣的内参基因。

摘要：利用从NCBI上下载的9 474条EST(Expressed Sequence Tags)序列,设计并开发EST-SSR引物,用于柿属种质资源的遗传多样性研究。下载的初始序列拼接成1 390条重叠序列和4 097条无重复序列。用SSRHunter软件搜索到601条EST序列中含有540个SSR。SSR出现频率为10.96%,其中以2核苷酸为主。依据检出的SSR-ESTs序列设计SSR引物100对,对9个柿属(Diospyros L.)种质资源样品进行了PCR扩增,其中42对引物有扩增带,占设计引物的42%,其中30对引物有多态性,占可扩增引物的71.4%。同时发现引物15是美洲柿(雄)的特异引物;引物30是青化北野柿的特异标记;引物69和引物80为美洲柿的特异引物;引物99是无核软枣的特异引物。

摘要：以云实当年生嫩叶为试材,设计正交试验优化脱分化和再分化培养基配方,获得体细胞胚并诱导不定芽;筛选最佳生根培养基,获得完整无菌植株并移栽成活。试验结果表明,最佳诱导愈伤组织培养基为:1/2MS+TDZ 0.5 mg.L-1+IBA0.3 mg.L-1,且该培养基也适合云实叶片愈伤组织再分化出芽;添加0.1%活性碳能抑制褐化,同时促进体细胞胚发生和不定芽产生;1/2MS+NAA 0.1 mg.L-1最适宜云实无菌苗生根,其根系数量质量均优于其他生根培养基组合;移栽采用蛭石∶珍珠岩∶草炭灰(1∶1∶1)基质,成活率达85%。

摘要：长链脂肪酰基Co A合成酶(LACS)在脂肪酸的合成与分解代谢中起着重要作用。本研究以油茶(Camellia oleifera Abel)国家审定品种华硕(Camellia oleifera Huashuo)种仁转录组数据为基础,根据LACS基因Unigene序列设计引物,分离克隆了油茶LACS1基因全长c DNA序列,命名为CoLACS1(Gene Bank登录号:KJ960228),全长2114 bp,开放阅读框2088 bp,编码695个氨基酸;生物信息学分析显示CoLACS1具有3个B1ock,从分子特征可判断CoLACS1属于LACS家族;氨基酸同源比对显示与其他物种的LACS氨基酸序列具有较高的相似性,其中与拟南芥LACS7相似性为78%,与麻风树、大豆、毛果杨等物种LACS6(peroxisomal)相似性可达80%以上;对CoLACS1进行原核表达分析,构建的p ET30a-CoLACS1载体成功转化至BL21(DE3)中经1 mmol/L IPTG诱导表达,菌液检测获得预测的目的蛋白(分子量约为76 k D);分析转录组数据中CoLACS1的Unigene序列RTKM值并对CoLACS1进行实时荧光定量PCR分析,结果表明CoLACS1在油茶华硕种子发育各时期平稳表达,表达丰度变化不大,荧光定量结果变化规律与转录组数据分析一致;同时分析华硕种仁不同时期含油率和脂肪酸成分变化,双变量统计分析发现CoLACS1表达模式与油茶油脂积累规律呈显著相关性。本研究为进一步研究油茶油脂积累与代谢的基因调控提供理论依据。

摘要：为给梨品种S基因芯片的制备及梨品种自交不亲和性S-RNase基因和S基因型的检测奠定基础,结合已有的对梨自交不亲和S-RNase基因的研究成果及Genbank中梨S-RNase基因信息,利用生物学比对软件Genedoce对梨S-RNase等位基因序列进行比对,得到等位基因HV区的特异序列;用oligo6.71、Premier Premier 5.0和Clustal.W等生物学软件设计特异性高、解链温度Tm值接近、长度均一的oligo探针,获得了24条32 mer的oligo探针。

摘要：为丰富柿树SSR引物来源,利用从NCBI下载的9 474条柿属EST序列开发柿EST-SSR引物,并用于分析7个柿品种的遗传多样性。EST序列经去除低质量及冗余片段后拼接成1 390条重叠序列和4 097条无重复序列。共搜索到601条EST序列中含有540个SSR。SSR出现频率为10.96%,其中以2核苷酸为主(61.06%)。利用检出的SSR-ESTs序列设计SSR引物100对,对7个柿样品进行了PCR扩增,31对引物有扩增带,占设计引物的31%,其中14对引物有多态性,占可扩增引物的45.2%。同时发现引物68是临潼板柿的特异引物。引物68的P68-115、P68-160和P68-210处为临潼板柿的3个特异性标记位点,而引物28的P28-225是麻城秋艳的特异性标记位点。

摘要：梨是典型的自交不亲和性果树,自然授粉结实率低,品质差。通过确定梨品种S基因型可寻找简便快速克服自交不亲和性,提高产量,改良品质的方法。根据梨S基因的一级结构特点,利用S基因的保守序列设计特异引物,并对雪花梨及其亲缘品种的基因组DNA进行PCR扩增。将基因组特异扩增电泳只显示一条S基因带雪花梨的特异扩增片段回收并与T载体连接,转化至大肠杆菌中。取其中1个阳性克隆进行测序,并通过生物信息学软件分析确定其核苷酸序列,推导出氨基酸序列,经网上Blast比较,确定该雪花梨S基因片段的S基因型,然后就该S基因进行酶切系统分析,有针对性地挑取另一个阳性克隆测序分析。另外,通过品种间的亲缘关系并经过酶切检测以分析雪花梨亲缘品种的S基因型,并确定各品种的S基因型分别为:雪花S4S16、冀蜜S1S16、雪青S3S16、雪峰S4S16、雪英S3S16、雪芳S4S16。

摘要：杜仲富含萜类物质,MVA途径是萜类物质合成的重要途径之一。从杜仲果实转录组数据KEGG中杜仲MVA途径共被注释30条Unigene,根据NCBI中的BLAST比较,分别鉴定了乙酰COA酰基转移酶,羟甲基戊二酰辅酶a合成酶,羟甲基戊二酰辅酶a还原酶,甲羟戊酸激酶,磷酸甲羟戊酸激酶,二磷酸甲羟戊酸脱羧酶基因,被注释7条,3条,11条,2条,2条,5条。表达差异分析表明,以上基因中分别为5条,3条,4条,1条,5条为幼果和成熟果实差异表达基因。对差异表达基因序列进行软件设计、引物特异性分析和实验验证,最终筛选出10对适合杜仲MVA途径SYBR GreenI荧光定量PCR的引物,为MVA途径基因表达差异研究及萜类物质积累的分子机理研究提供重要依据。