摘要：目的 不同类型金属有机骨架材料(metal organic frameworks,MOFs)制备工艺优化及筛选,用于负载抗肿瘤单体成分雷公藤红素(celastrol,Cel),从而改善其生物利用度并增强抗肿瘤药效。方法 以粒径大小为指标,单因素考察结合正交试验优化MOFs制备工艺,选择最佳MOFs;吸附法负载雷公藤红素,单因素优化载药工艺,CCK-8法初步评价其抗肿瘤细胞药效。结果 UIO-66最佳工艺为苯甲酸为调节剂,投料比1∶1,溶剂60 mL,溶剂热法反应24 h,粒径(172.3±3.0)nm,多分散指数(polydispersity index,PDI)为0.166±0.023;ZIF-8最佳工艺为投料比1∶50,水10m L,室温密闭搅拌30 min,粒径(154.0±1.4)nm,PDI为0.245±0.060;MIL-101(Fe)最佳工艺为投料比1∶1,溶剂10 mL,溶剂热法反应24h,粒径(553.5±36.2)nm,PDI为0.642±0.109;选择ZIF-8进行雷公藤红素的包载,最佳载药工艺为ZIF-8与雷公藤红素比例2∶1,载药时间24 h,药物质量浓度为1 mg/mL,制得ZIF-8@Cel粒径为(164.9±8.0)nm,PDI为0.297±0.029,载药量为(23.47±0.26)%;实验剂量下ZIF-8对HepG2细胞无毒,雷公藤红素处理HepG2细胞24h的半数致死浓度(half-inhibitory concentration,IC_(50))为3.821μg/mL,ZIF-8@Cel的IC_(50)值为3.289μg/mL(以雷公藤红素含量计)。结论 优选的ZIF-8材料制备及载药工艺稳定可行,粒子形状规则,晶型良好,分布均匀,载药量高,生物安全性好,载药后可明显增强药物药效,为雷公藤红素抗肿瘤纳米制剂的研究提供了基础。

摘要：目的探究改性工艺及参数对栀子水提物可压性的影响,并对工艺进行优化。方法以羟丙甲基纤维素(HPMC E2)为改性剂,考察流化包裹、共喷雾干燥、高剪切等粒子修饰技术对栀子水提物可压性的影响,筛选修饰技术;基于质量源于设计(quality by design,QbD)理念结合模糊层次分析法(fuzzy analytics hierarchy process,FAHP)-熵权法对关键质量属性进行综合赋权得到总评归一值(overall desirability,OD),以其作为评价指标对改性工艺参数进行优化设计。结果相比于其他修饰技术,流化包裹改性效果最佳,可显著改善栀子水提物压缩成型性和流动性;工艺参数影响研究结果显示,OD值与进风温度和进料速度呈正相关,与改性剂质量浓度呈负相关,各因素影响程度顺序为进风温度>进料速度>改性剂质量浓度;单因素与响应面优化得到的最佳参数为进风温度70℃,进料速度11 r/min,改性剂质量浓度12%,最优条件所得实测值与预测值RSD2 MPa、休止角<40°,达到片剂生产要求。结论改性工艺和工艺参数对可压性改善效果有显著影响,且优选的改性工艺具有较好的可行性和可靠性,为可压性差的中药片剂的工业化生产提供参考依据。

摘要：对2种不同配体铁基金属有机骨架(iron-based organic framework,FeMOF)MIL^(-1)00(Fe)和MIL^(-1)01(Fe)的制备工艺进行优化及筛选,将优选后的FeMOF负载荜茇酰胺(piperlongumine,PL),以增强PL的生物相容度及抗肿瘤药效。采用溶剂热法,以优选后的反应溶剂分别制备MIL^(-1)00(Fe)和MIL^(-1)01(Fe),以粒径、多分散指数(PDI)、得率为指标,采用确定性筛选设计(DSD)试验并分别构建数学模型,结合Derringer期望函数优化得到两者的最优制备工艺;表征后选择最佳的FeMOF使用溶剂扩散法负载PL,单因素结合正交试验优化其载PL工艺;使用CCK-8法初步评价空白FeMOF的生物安全性以及载药后纳米制剂的抗肿瘤药效。实验结果表明,MIL^(-1)00(Fe)最优制备工艺为温度127.8℃、反应时间14.796 h、溶剂总量11.157 mL、投料比1.365,制得粒径(108.84±2.79)nm、PDI 0.100±0.023、得率36.93%±0.79%;MIL^(-1)01(Fe)最优制备工艺为温度128.1℃、反应时间6 h、溶剂总量10.005 mL、投料比0.500,制得粒径(254.04±22.03)nm、PDI 0.289±0.052、得率44.95%±0.45%;选择MIL^(-1)00(Fe)载PL,最佳载药工艺为MIL^(-1)00(Fe)与PL投料比1∶2,PL药液质量浓度7 mg·mL^(-1),DMF-水1∶5,制得MIL^(-1)00(Fe)/PL纳米粒载药量为68.86%±1.82%;MIL-100(Fe)在0~120μg·mL^(-1)剂量下对HepG2细胞无毒性,游离PL处理HepG2细胞24 h半数抑制浓度(IC_(50))为1.542μg·mL^(-1),MIL^(-1)00(Fe)/PL的IC_(50)为1.092μg·mL^(-1)(以PL计)。该研究创新性地使用了确定性筛选设计构建数学模型,结合Derringer期望函数优化出MIL-100(Fe)和MIL-101(Fe)的最优合成工艺,优选后的MIL-100(Fe)纳米粒制备及载PL工艺稳定可行,MIL-100(Fe)粒子大小形状均一,晶型良好,载药量高,能够显著地增强PL的抗肿瘤药效。为纳米制剂的工艺优化提供了全新的方法,为PL的抗肿瘤纳米制剂的进一步开发研究奠定了基础。

摘要：基于天麻转录组数据,设计特异性引物,克隆天麻二羧酸-三羧酸载体蛋白编码基因GeDTC,并利用ExPASy、ClustalW、MEGA等软件对其进行生物信息学分析,利用马铃薯遗传转化体系,获得阳性转基因植株和微型薯,并对微型薯块茎的大小、质量、有机酸和淀粉含量等农艺性状进行了检测和分析,对GeDTC基因功能进行初步研究。结果显示,GeDTC开放阅读框(open reading frame)全长981 bp,编码326个氨基酸残基,相对分子质量为35.01 kDa。预测GeDTC蛋白的理论等电点为9.83,不稳定系数为27.88,亲水性平均指数为0.104,属于稳定的亲水性蛋白。GeDTC蛋白存在1个跨膜结构,无信号肽,定位于线粒体内膜。系统进化树显示,GeDTC与其他种类植物DTC蛋白之间具有较高的同源性,其中与铁皮石斛DcDTC(XP_020675804.1)同源性最高,为85.89%。运用双酶切方法构建GeDTC过表达载体pCambia1300-35Spro-GeDTC,并通过农杆菌介导转化法获得了马铃薯转基因植株,移栽收获的转基因株系微型薯和野生型株系相比体积更小,质量更轻,有机酸含量低,淀粉含量无显著差异。初步推测天麻GeDTC基因可能为三羧酸的外排通道并参与调控块茎的发育,为深入阐明天麻块茎形成的分子机制奠定了基础。

摘要：目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射器(HPLC-ELSD)法同时测定参芪益气方中人参皂苷Rg1、Re、Rb1和黄芪甲苷的含量,并优选参芪益气方的最佳提取工艺。方法:采用XBridge Shield RP_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 mL·min^(-1),ELSD漂移管温度106.5℃,氮气流速2.9 L·min^(-1)。以上述4种成分转移率和干膏得率为评价指标,采用层次分析法(AHP)-指标相关性的指标权重确定方法(CRITIC)混合加权法确定各评价指标的权重系数,结合正交试验结果优选参芪益气方最佳提取工艺。结果:建立的含量测定方法可同时测定4种指标成分的含量,线性关系良好(r≥0.9994);精密度、稳定性、重复性试验的相对标准偏差(RSD)均小于3.0%;加样回收率为97.5%~103.0%(RSD 1.2%~2.8%,n=6)。参芪益气方的最佳提取工艺为加10倍量水,提取2次,每次1 h。验证试验综合评分均值为95.4(RSD为1.2%,n=3)。结论:建立的含量测定方法可靠高效,优选的提取工艺稳定可行,为参芪益气方的进一步研制开发奠定了基础。

摘要：目的探究低共熔溶剂法提取淫羊藿中黄酮类化合物的最佳提取工艺。方法以淫羊藿中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷的总提取率作为评价指标,在料液比、摩尔比、含水率、提取温度、提取时间等单因素试验的基础上结合正交试验设计对淫∶羊藿中黄酮类成分∶的提取工艺进行优化,并利用大孔树脂对溶剂中的成分进行回收。结果氯化胆碱与乙醇胺形成的低共熔溶剂提取效果最好,当氯化胆碱与乙醇胺的摩尔比为1总提取率为(20.07±0.43)mg/g,且AB-8大孔树脂能够回收低共熔溶剂中的黄酮类成分,平均回收率为88.29%。结论低共熔溶剂较传统提取溶剂提取效率高,回收工艺简单,回收率高,在中药活性成分提取应用中有巨大的潜力。