摘要：目的:通过均匀设计法结合体外实验,优化菟丝子方对卵巢储备功能影响的组方配比并探讨其作用机制。方法:采用均匀设计法对菟丝子方水提物进行5因素11水平的实验设计,以细胞增殖与活性检测(CCK-8)实验测定菟丝子方水提物1~11处理的人卵巢颗粒细胞(KGN细胞)活力为指标,进行多元回归分析得出最优组方配比;在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中药百科全书数据库(ETCM)中查询活性成分潜在靶点,与疾病靶点取交集获得共同靶点,分别将共同靶点导入基因/蛋白质相互作用检索工具数据库(STRING)构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络及基因功能注释数据库(DAVID)进行基因本体(GO)分析;以CCK-8实验测定金丝桃苷对卵巢生殖干细胞活力的影响;以CCK-8、细胞增殖检测试剂盒(EdU)、细胞凋亡检测试剂盒(TUNEL)、酶联免疫吸附测定法(ELISA)实验对均匀设计得出最优组方和菟丝子方水提物11(菟丝子-枸杞子-山药-茯苓-莲子4∶4∶2∶1∶1)在影响KGN细胞增殖、凋亡、雌二醇(E2)分泌方面进行对比研究,以期得出对卵巢储备功能影响的最优组方配比及初探其机制。结果:菟丝子方的278个药物靶点和1721个疾病靶点取交集,获得共同靶点147个;GO分析显示主要涉及细胞对外源性化合物刺激的反应、凋亡过程的负调控、正向调控细胞增殖等194个生物学过程,细胞膜、线粒体、神经元细胞体等84个细胞组成,酶结合、雌激素应答元件结合、核雌激素受体结合等144个分子功能;多元回归分析得出菟丝子方各药材按照菟丝子-枸杞子-山药-茯苓-莲子27∶30∶17∶12∶14组方时增强KGN细胞活力具有最佳效果;CCK-8结果表明,与正常组比较,金丝桃苷组卵巢生殖干细胞活力显著提高(P<0.01);CCK-8和EdU结果表明,与正常组比较,均匀设计筛选出的最优组方和菟丝子方水提物11组KGN细胞增殖能力明显提高(P<0.05,P<0.01);TUNEL结果表明,与正常组比较,均匀设计筛选出的最优组方和菟丝子方水提物11组明显减少KGN细胞凋亡(P<0.05);ELISA结果表明,与正常组比较,菟丝子方水提物11组显著促进KGN细胞E2的分泌(P<0.05),而均匀设计得出的最优组方对KGN细胞E2的分泌差异无统计学意义。结论:菟丝子方水提物11(菟丝子-枸杞子-山药-茯苓-莲子4∶4∶2∶1∶1)与均匀设计筛选出的组方(菟丝子-枸杞子-山药-茯苓-莲子27∶30∶17∶12∶14)均可能是菟丝子方改善卵巢储备功能的最佳组方配比,但尤以组方11配比效果最佳。菟丝子方可通过Hyperoside等活性成分,正向调控细胞增殖、抑制细胞凋亡等生物学过程和影响酶结合、雌激素应答元件结合等分子功能,从而促进KGN细胞增殖、E2分泌、抑制凋亡,进而发挥对卵巢储备功能的保护作用。

摘要：目的:通过异源表达不同植物来源的法尼基二磷酸合成酶(FPS)编码基因,提高酿酒酵母中法尼基焦磷酸(FPP)的合成效率,进而提高工程酵母合成萜类化合物的产量。方法:采用柱色谱法提取拟南芥、玫瑰、青蒿、积雪草、啤酒花、苜蓿和人参7种的植物根、茎、叶混样RNA,并反转录为互补DNA(cDNA)第一链,基于该7种植物的转录组数据,设计CaFPS、RrFPS、MsFPS、HiFPS、PgFPS、AtFPS和AaFPS基因序列特异性引物,克隆基因全长,对这些基因进行生物信息分析,构建pESC酵母穿梭载体。利用实验室构建的产β-榄香烯酿酒酵母为底盘菌株,异源表达7种不同植物来源的FPS,以β-榄香烯的产量作为评估标准,在实验室先前构建的高产β-榄香烯的酿酒酵母菌株中进行验证。结果:7种基因获得编码区域序列长均为1021 bp,编码301个氨基酸,均与酿酒酵母内源的FPS编码基因ERG20具有相近的亲缘关系。通过在酿酒酵母中异源表达7种基因,筛选出催化异戊烯焦磷酸酯(IPP)和二甲基烯丙基二磷酸(DMAPP)合成FPP效果最佳的基因为RrFPS,过表达RrFPS酿酒酵母菌株YB-1-Rr和YB-3-Rr的β-榄香烯产量分别比对照菌株YB-1和YB-3高231.25%和189.3%。结论:通过比较7种不同植物来源的FPS编码基因的功能,确定了来自玫瑰中的RrFPS基因所编码的蛋白具有最佳的催化能力。该研究为构建高产萜类化合物的工程酵母菌株构建提供了关键基因元件。

摘要：《中医药多媒体资源标注规范》以国家及行业相关标准为依据,参考中医药学内容特点和多媒体资源特点制定,主要针对中医药图片、音视频等多媒体资源而设计,规范基于元数据的中医药多媒体资源内容标注,适用于中医药图书文献机构、中医药信息机构及科研人员、中医药教育机构对中医药多媒体资源进行编目、标注及管理利用等相关工作。

摘要：组方优化研究是中药复方研究的重要环节,近年来数理方法、数据挖掘技术及人工神经网络等工具方法的引入,为解析中药复方配伍规律提供了新的研究手段。中药复方涉及众多变量,如不同药材的配伍比例、各药材的具体提取部位及多组分的相互作用,这些因素共同构成了复杂的非线性量效关系。在这种背景下,寻找适合研究复方特点、能发挥复方优势的方法,并实现其在新药研发中的有效应用至关重要。该文就近年来在中药复方配伍研究中应用的前沿优化试验设计方法进行全面综述,探讨了方药来源优化、配伍中药材剂量优化及多目标优化指标等关键技术问题;归纳整理了在配伍优化过程中对组分效应的评价方法,旨在为中医药创新研究和基于中药复方的新药开发提供科学且实用依据。

摘要：目的:研究制川乌与生半夏不同配比和剂量变化对小鼠镇痛、抗炎、祛痰、镇咳作用的影响。方法:采用均匀设计法,按2因素7水平以小鼠醋酸致扭体次数、二甲苯致耳肿胀度、气管酚红分泌量、氨水引咳次数为指标,观察合煎液口服给药后对小鼠镇痛、抗炎、祛痰、镇咳作用的影响,并选取有显著意义的配比和剂量进行验证。结果:对扭体次数和耳肿胀度的影响:合煎液能有效降低小鼠扭体次数和耳肿胀度;经回归分析可知,生半夏与制川乌存在拮抗作用,二者比例为10∶1时,拮抗作用接近最大;二者比例小于等于1∶1时,小鼠扭体次数和耳肿胀度随总剂量的增加先降低后升高,且制川乌比例越高,下降或升高速率越快。对气管酚红分泌量和咳嗽次数的影响:合煎液能有效增加小鼠气管酚红分泌量和减少咳嗽次数;经回归分析可知,对于小鼠气管酚红分泌量,生半夏与制川乌存在协同作用,总剂量大于5 ***-1且二者比例为1∶1时,合煎液对气管酚红分泌量的增加作用最明显。结论:制川乌与生半夏配伍能降低制川乌的镇痛和抗炎作用并增强生半夏的祛痰作用,其作用强度随配比和剂量的不同而改变。本研究为十八反中制川乌与生半夏反药组合作用的深入研究提供实验依据。

摘要：目的:筛选获得金银花真伪鉴别SNP位点并建立双向位点特异性PCR方法,用于鉴别金银花和其常见伪品以及两者的混杂品。方法:通过对GenBank收录的忍冬属植物叶绿体trnL-trnF序列进行对比分析,获得金银花真伪鉴别SNP位点;并依据该SNP位点设计特异性引物,对84份金银花基原植物及其市售饮片、伪品进行双向位点特异性PCR扩增,并根据真伪品的特异性条带进行金银花药材鉴别。结果:退火温度为61℃时,正品均出现468 bp的条带,红腺忍冬、华南忍冬、灰毡毛忍冬、黄褐毛忍冬、水忍冬、金银忍冬、郁香忍冬、新疆忍冬、繁果忍冬等9个伪品均出现324 bp的条带,在正品DNA中掺入5%以上伪品时同时出现正品和伪品条带。结论:双向位点特异性PCR可以鉴别金银花真伪品及两者的混杂样品。

摘要：目的:优化巴布剂基质处方。方法:采用面心设计,考察自变量卡波姆、聚丙烯酸钠、交联剂等因素对因变量初黏力的影响,拟合二次多项式方程,结合效应面法,优选较佳处方,并进行预测分析。结果:二次多项式拟合方程复相关系数R2=0.970,Ad j-R2=0.952,方差分析F四归=53.953,P=0.000 1,模型高度显著;效应面法分析确定了巴布剂基质较佳处方,验证实验结果满意。结论:面心设计-效应面法应用于巴布剂基质的优化,方法简便,预测性良好。

摘要：目的：优化荷叶中2类有效成分的醇提工艺。方法：采用星点设计，以荷叶碱，荷叶总黄酮的提取率为指标，对2种指标进行归一化处理，采用效应面法优化荷叶的提取工艺条件。结果：确定最优提取工艺为75％～80％乙醇，提取时间120～180min，加醇量20～25倍，提取2次，荷叶碱和荷叶总黄酮提取率的实际值与预测值的偏差分别为5.53％，-6．02％。结论：采用星点设计．效应面法优选荷叶的醇提工艺，实际值与预测值吻合度高，预测性良好，是可行的。

摘要：该实验采用中心组合设计-效应面法制备并优化了温敏型麝丹眼用即型凝胶,其处方最佳基质为18%的泊洛沙姆407(P407)和5%的泊洛沙姆188(P188);应用安东帕MCR302流变仪对其进行了流变学考察,振幅扫描结果显示应控制其应变(γ)<0.5%,在高频区其弹性模量(G')大于黏性模量(G″),表现为凝胶特征,有较好的稳定性,通过温度扫描G',G″及相角(δ)的变化来确定了其相变温度(TSG)为33.25℃,触变性实验显示其结构恢复时间短于5 s;分别采用表面张力仪、露点渗透压仪分别测定了其表面张力和渗透压,结果分别为36.43 m N·m-1,320.6 m Osm·kg-1;荧光标记示踪法观察了其在眼角膜的滞留时间为180 min;其溶出实验表现为零级释放动力学特征,麝香酮和丹酚酸B的释放与药物溶蚀线性相关;眼部刺激性实验显示其无刺激性。麝丹即型凝胶有望为临床视网膜静脉阻塞治疗提供一种新型外用长效制剂。

摘要：目的:通过比较金铃子散不同配比方对大鼠肝药酶CYP1A2活性的影响,探讨其配伍规律。方法:按L9(34)正交表,设计9个不同配比组方。体外实验采用大鼠肝药酶孵育体系,测定不同配比方对CYP1A2的半数抑制浓度(IC50);体内实验采用大鼠口服金铃子散不同配比方5 d后注射探针药物非那西丁,通过微透析探针采集肝脏部位样品,HPLC测定非那西丁及其代谢物对乙酰氨基酚浓度,winNonlin软件统计拟合药代参数。结果:川楝子、延胡索单味提取物和配比方1～9对肝药酶CYP1A2的IC50分别为(0.025 2±0.005 2),(0.012 1±0.007 9),(0.091 9±0.015 0),(0.071 9±0.005 3),(0.028 2±0.004 5),(0.075 4±0.015 5),(0.062 8±0.003 3),(0.091 9±0.015 0),(0.197 6±0.027 3),(0.159 1±0.008 1),(0.131 1±0.008 5)g.L-1,无显著抑制酶CYP1A2活性。体内实验,药代参数显示金铃子散不同配比方均能诱导CYP1A2活性,影响酶活性强弱顺序是:诱导剂组(方3)>方4(方5)>方9(方6,方1,方2,方8,川楝子,延胡索组)>方7>正常对照组。结论:金铃子散不同配比方对肝药酶CYP1A2活性有诱导作用,且诱导作用的强弱与配比有一定的相关性。