摘要：用分子力学方法,结合药理结果,考察了胆碱能化合物的空间构象和构效关系,从而提出了药物与胆碱能受体相互作用的分子药理学模型,为阐明这类药物的立体化学和药理现象以及选择性药物分子设计提供了基础。

摘要：目的探讨寡核苷酸芯片在儿童急性淋巴细胞性白血病（ALL）融合基因检测中的应用。方法针对儿童ALL常见的5种融合基因：TEL／AML1、E2A／PBX1、BCR／ABLp190、BCR／ABLp210、MLL/AF4，设计特异的融合基因片段为芯片探针，合成后用点样仪点片制成寡核苷酸芯片。提取疾病初期白血病患儿的骨髓／外周血标本的总RNA，进行多重巢式逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）、荧光标记并与芯片杂交，以检测白血病细胞中特异融合基因。结果该芯片可以从患儿骨髓样本RNA中准确检测到阳性内参序列、特异的融合基因以及融合位点。结论采用寡核苷酸芯片方法，可快速、同时筛选出5种染色体结构畸变产生的融合基因及融合位点，为ALL患儿危险分层、治疗选择、预后判断提供重要依据。此种方法应用于筛查初治白血病患儿融合基因表达时优缺点并存，具有一定临床实用价值。

摘要：目的通过对来自云南省鼠疫自然疫源地155株鼠疫菌进行基因分型,了解鼠疫菌的进化规律。方法根据22个差异区段(differentregions,DFR)设计引物,PCR扩增鼠疫菌的每个DFR。结果滇西山地闽广沿海居民区黄胸鼠鼠疫自然疫源地137株鼠疫菌的基因型均为9型。滇西山地齐氏姬鼠大绒鼠鼠疫自然疫源地18株鼠疫菌,有10株菌为7型,8株菌为9型。结论滇西山地齐氏姬鼠大绒鼠鼠疫自然疫源地鼠疫菌的基因型为7型和9型,而滇闽广沿海居民区黄胸鼠鼠疫自然疫源地鼠疫菌的基因型主要为9型。两疫源地鼠疫菌在遗传关系上有亲缘性,后者可能由前者进化而来。

摘要：目的 比较来自我国新疆4大片山地鼠疫自然疫源地的144株鼠疫菌的基因组组成的差别，研究新疆山地鼠疫自然疫源地鼠疫菌的基因分型和进化规律。方法 根据已经证实的22个差异区段（DFR）设计引物，每株鼠疫菌的每个DFR都采用PCR技术进行验证。结果 新疆4大片山地鼠疫自然疫源地的144株鼠疫菌的基因型DFR图谱可归类为14种，分为7个主要基因组型和7个次要基因组型。西天山北坡灰旱獭-长尾黄鼠鼠疫疫源地存在3个主要基因组型和5个次要基因组型，西段以01型基因组型为主，占种群体的91．7％，02型占8．3％；中段以03型为主，占68．8％，01型占4．2％，02型占20．85％，另有02M1和02M3（02型的突变型）占2．1％，03M1型（03型的突变型）占2．1％；东段以02型为主，89．8％，01型、02M2、02M3和02M4型（02型的突变型）各占2．0％。南天山灰旱獭鼠疫疫源地存在2个主要基因型和1个次要基因型，以4型为主，占66．7％，02型占16．7％，04M1型（04型的突变型）占16．7％。帕米尔高原-阿赖山红旱獭鼠疫疫源地仅存在04型1种基因型。昆仑山喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地分为中昆仑和东昆仑鼠疫自然疫源地，中昆仑山存在2种鼠疫基因组型，以11型为主，占群体的90％，12型占10％；东昆仑山存在3种鼠疫基因组型，以05型为主，占66．7％，02型和11型分别占16．7％。结论 新疆山地鼠疫自然疫源地鼠疫菌基因组的演化由3个演化路线组成。西天山北坡鼠疫自然疫源地的鼠疫菌基因组，自西向东在不同的生态地理环境和宿主媒介作用下发生适应性进化和演变，由较为古老的01型基因组逐渐演化为02和03型，最后南下至青海和东昆仑演变为05型，并且在这条演化路线上存在许多演变过程中发生的基因组地域交叉和次要基因组型；南天山和帕米尔高原-阿赖山鼠疫自然疫源地的鼠疫菌的04型基因组型是由01型直接演化而来，并在这一区域形成主要鼠疫基因组型；中昆仑山鼠疫自然疫源地的鼠疫菌基因组型可能是由西藏冈底斯山喜马拉雅旱獭鼠疫源地的鼠疫菌的10型基因组演化而来，形成以11型为主，12型为辅的鼠疫基因组构型特点。

摘要：采用发光二极管、大芯径大数值孔径分叉光导纤维作传光介质、硅光电二极管作探测器，以双光束补偿原理为基础，仅用一套光路、一套电路和计算机系统设计和研制成可供ｐＨ、ＮＨ３／ＮＨ＋４和ＳＯ２检测的多用途光纤生化检测系统。仪器具有体积小、检测灵敏度高、性能稳定、准确方便等优点；ｐＨ值的响应可低达０．０１ｐＨ、对水中的ＮＨ＋４检测限为２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ、ＳＯ－３的检测限为２×１０－４ｍｏｌ／Ｌ。仪器可做成便携式，可用于环境监测、生物医学研究或临床诊断检测工作。

摘要：为建立检测绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)实时荧光定量PCR(Real-time qPCR)方法,根据外源性JSRV-NM株env基因序列,选其保守序列作为目的片段,设计引物和TaqMan探针,以自然病例的肺肿瘤组织基因组DNA为模板,经PCR扩增目的基因、克隆,重组质粒鉴定,并严格定量后,梯度稀释作为阳性标准品,优化反应条件进行Real-time qPCR扩增,获得的标准曲线为:Y=-3.308X+47.848,线性相关系数为0.991;Ct值变异系数小,并且灵敏度高,初步建立了检测JSRV前病毒DNA的Real-time qPCR方法。应用该方法对不同来源(A、B、C、D、E组)的绵羊外周血及其他组织样品进行测定其前病毒载量。结果显示B组和C组外周血白细胞、肺脏、肺门淋巴结以及鼻液中检测均为阳性,并发现前病毒DNA的载量在肺脏中明显高于外周血白细胞;D组虽未发现有绵羊肺腺瘤(SPA)临床症状,但在肺门淋巴结里可以检测到;E组中1只绵羊的肺脏也检出低拷贝数的前病毒DNA,而在A组中检测结果均为阴性。本研究对检测未知羊群JSRV感染程度及研究SPA流行病学等均有重要意义。

摘要：定量资料统计分析错误辨析一、因误判实验设计类型而误用统计分析法1.误用配对设计定量资料t检验处理重复测量设计定量资料(1)例1:原文题目:消炎痛栓对肝硬化门静脉高压症病人门静脉压力的影响.原文作者将1994年2月至1998年10月入院手术治疗的肝炎后肝硬化病人25例作为观察对象.

摘要：目的研究维持性血液透析患者输血传播性病毒（ＴＴＶ）感染状况，及进行其部分基因序列分析。方法设计 ＴＦＶＯＲＦ１部分基因引物，巢式 ＰＣＲ检测 ８０例血液透析患者及 １２例血液透析工作人员血清标本，将ＰＣＲ产物克隆、测序分析。结果血液透析患者ＴＴＶ感染率为３５％（２８／８０），１２名工作人员中有１例呈ＴＴＶ阳性（８．３％）。与日本株相比较，本实验分离株ＴＦＶ ＯＲＦ１部分基因同源性为９６．７％，ＴＴＶ合并ＨＢＶ感染者８例（８％），合并ＨＣＶ感染者５例（６％）；ＴＴＶ与ＨＢＶ、ＨＣＶ同时感染者２例（２％）．ＴＴＶ阳性患者中，有输血史者占５７％。结论血液透析患者中存在严重的ＴＴＶ感染，血液透析工作人员亦存在ＴＴＶ感染，ＴＴＶ可以与ＨＢＶ、ＨＣＶ重叠感染，ＴＴＶ感染者可能与输血有关，但ＴＴＶ的非血液传播同样应引起重视，

摘要：为快速、准确地检测霍乱弧菌，控制霍乱流行，研究建立了一种聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测方法。根据霍乱弧菌肠毒素ＣＴ基因序列，自行设计一对特异引物，扩增片断为２９６ｂｐ，同时采用一种高效率、快速、简便的方法提取并纯化ＤＮＡ，该法能成功地检测各种样品中的产ＣＴ肠毒素Ｏ１群霍乱弧菌。应用ＰＣＲ技术和常规分离培养方法对９０９份腹泻患者粪便标本和１８份环境水样标本进行平行检测。结果表明，两种方法的检测结果一致，粪便标本阳性率为４．２％（３８／９０９）；水样标本为２２．２％（４／１８），其中１份粪便标本和１份水样标本，是经过第２次增菌培养后，检出用性，而ＰＣＲ方法未见假阳性及假阴性结果。表明ＰＣＲ方法准确、快速、灵敏，并可在２、３小时内检测出含３个菌细胞的标本。因此，该方法可广泛应用于检测各种临床、环境标本中的产ＣＴ肠毒素Ｏ１群霍乱弧菌。

摘要：为了建立原核高效表达体系,从自然感染绵羊肺腺瘤病毒内蒙毒株的肺肿瘤组织中提取基因组DNA,应用PCR技术分别扩增编码囊膜蛋白(env)基因的表面蛋白(surface protein,SU)和跨膜蛋白(transmembrane protein,TM)区域基因,通过T-A克隆的方法分别克隆入pGEM-TEasy载体中,然后利用设计的起始密码、终止密码以及相应酶切位点的引物,把env基因的SU区和TM区基因亚克隆到表达载体pGEX-4T-1中,分别构建SU和TM的重组表达质粒,经酶切、PCR及DNA测序鉴定后,将阳性质粒转化入大肠杆菌BL21 CodonPlus中并在IPTG的诱导下表达,表达产物用SDS-PAGE分析鉴定。结果表明,该基因可以在大肠杆菌中以稳定的包涵体形式高效表达,表达的SU和TM融合蛋白表观分子质量约为68 ku和46 ku,表达量分别占全菌蛋白的25%和30%,并且从包涵体分离纯化得到的表达蛋白具有较高纯度,是一种理想的免疫原。