摘要：病毒囊膜与宿主细胞膜的膜融合是囊膜病毒入侵的重要过程,病毒囊膜融合糖蛋白的一系列结构变化引发此过程.综述了Ⅱ类囊膜病毒、弹状病毒及疱疹病毒融合蛋白结构与功能研究的最新进展,介绍了软件分析并定位融合蛋白功能区域的方法.Ⅱ类病毒与Ⅰ类病毒融合蛋白的融合前结构不同,但融合后结构(发夹三聚体结构)相似.弹状病毒与疱疹病毒的融合蛋白集合了Ⅰ/Ⅱ类融合蛋白的某些特征,但其结构变化及融合过程各不相同,被归为新型融合蛋白.上述研究为基础设计的以病毒融合过程为靶标的抑制子,可为抗病毒新药的研制提供新思路.

摘要：囊膜病毒可能采用相似的病毒 宿主细胞膜融合机制 ,即病毒表面糖蛋白结合到宿主细胞受体后 ,启动了病毒融合蛋白的一系列构象变化 ,根据囊膜蛋白构象变化特征 ,囊膜病毒可采用两种以上的方式发生膜融合 ,并据此分为两类 :Ⅰ型病毒膜融合和Ⅱ型病毒膜融合 .Ⅱ型病毒膜融合以黄病毒为代表 ,其分子机制与Ⅰ型病毒膜融合不同 ,但不很清楚 .而Ⅰ型病毒膜融合中 ,如艾滋病毒 ,流感病毒等 ,在囊膜蛋白变构形成稳定折叠的发夹三聚体结构时 ,拉近了两膜之间的距离 ,此过程释放出来的能量进一步促使两膜融合 .膜融合使病毒蛋白及病毒RNA基因组释放到宿主细胞内而感染宿主 .以上述研究为基础设计的C肽 /N肽小分子抑制子 ,可以在病毒糖蛋白中间体构象形成的短时间内 ,高效、特异地竞争结合其配体 ,从而阻止糖蛋白的进一步折叠 ,达到抑制病毒入侵的目的 ,为病毒疾病的防治提供了新思路和策略 .针对艾滋病毒设计的C肽 ,即T2 0或Enfuvirtide在临床应用效果很好 .以艾滋病毒和流感病毒为例 。

摘要：以纯化的柔嫩艾美耳球虫的孢子化卵囊为模板 ,根据已知的序列设计一对引物 ,用RT PCR方法扩增出球虫的SO7基因 ,通过三亲接合转移、新霉素筛选、序列分析等方法得到了转球虫基因工程蓝藻。这为球虫基因在蓝藻中表达奠定了基础。

摘要：根据红色原鸡IFN A基因设计了引物对 ,采用PCR法克隆并测序了我国地方标准品种惠阳胡须鸡的IFN α基因 ,定名为HyIFNA4。HyIFNA4与红色原鸡类IFN α比较 ,ORF长度均为 582个核苷酸、编码 162个氨基酸 ,相互间同源性在 97 4 %～ 99%。

摘要：为了进行北京鸭重组干扰素 (IFN)类生物制剂的研究 ,根据现有鸭Ⅰ型IFN基因设计了引物对 ,用PCR法克隆了我国标准品种北京鸭IFN基因 ,定名为BDIFN α。BDIFN α开放框架 (ORF)由 576个核苷酸构成、编码 191个氨基酸。BDIFN α与鸭 1型IFN基因核苷酸间同源性为 99 8% ,在 390位存在点变异 ,但在氨基酸水平完全一致。BDIFN α氨基酸与鸡Ⅰ型IFN同源性在 50 5%～ 51% ,与狗、猪等哺乳类Ⅰ型和Ⅱ型IFN比较同源性低于 39%。结果揭示了BDIFN

摘要：目的 :为了开展禽类重组IFN α类生物治疗制剂的研究。方法 :根据原始红鸡IFN A类基因设计了引物对 ,采用PCR法克隆了我国地方标准品种丝羽乌骨鸡的IFN α基因 ,并进行了序列分析 ;构建了鸡IFN α基因系统进化树。结果 :丝羽乌骨鸡的IFN α基因 (TSIFNA5 )与红色原鸡类鸡的IFN α基因相比 ,ORF长度都为 5 82个核苷酸、编码 193个氨基酸 ,相互间同源性在 97.4%～ 99.0 %。结论

摘要：根据犬新孢子虫NcSRS2基因序列,设计了1对含有Kozak序列、PstⅠ和XbaⅠ酶切位点的引物,以含有NcSRS2基因的质粒P43为模板,经PCR扩增获得NcSRS2ORF基因片段,用PstⅠ和XbaⅠ双酶切该片段,回收得到含有以上2个酶切位点黏端的NcSR2ORF基因,将此基因片段克隆至相同酶切回收后的pcDNA3.1(+)真核表达载体中,获得重组质粒pcNCSRS2。经PCR鉴定、限制性内切酶分析和克隆片段序列测定、比较,证实了重组质粒的正确性。

摘要：作者根据子孢子微线基因(Etmic-2)的 cDNA 序列,利用计算机设计出一对引物,从孢子化7h 卵囊中用 RT-PCR 技术扩增出1个片段(mic2～7h).把这个片段克隆到 pGEM-T-Easy Vector 中后,我们得到一个阳性克隆 pmic2～7h.酶切分析证明 pmic2～7h 含有 mic2～7h,并且外源片段以反方向插入 T 载体中.核苷酸序列测定结果表明 mic2～7h 比 Etmic-2基因至少长111bp.但这多出的111bp 并没有造成基因读框错位,也没有造成基因读框终止.这111bp 由2部分组成,一部分长42bp,另一部分长69bp.虽然这二个片段的3′端均有典型的真核生物 mRNA 内含子剪切信号,但5′端却没有内含子的剪切信号点.这说明多出来的111bp不是内含子序列,mic2～7h 基因也不是 Etmic-2基因的前体,而可能是 EtMIC-2的一种蛋白异形体基因.

摘要：用表达非融合蛋白的原核表达载体 p BV2 2 0 ,通过 PCR技术的引物设计对猪繁殖与呼吸综合征( PRRS)病毒 BJ-4株核衣壳蛋白 ( N)基因起始密码子上游进行了改造和修饰 ,成功地构建了含有 PRRS病毒 N基因的原核重组表达载体 p BV-N。 p BV-N转化大肠杆菌 DH5α,温度诱导后菌体裂解物经 SDS-PAGE分析发现 ,在约 1 5 0 0 0处出现 1条诱导前后的 p BV2 2 0载体对照和诱导前的 p BV-N中均缺少的特异性的蛋白条带 ,分子量大小与 PRRS病毒 N蛋白相符 ,并随着诱导时间的延长而变化 ,在诱导后 4 h达到高峰。薄层扫描结果显示 ,重组 N蛋白表达量最多可占菌体总蛋白的 2 7.4 %。 Western-blotting检测 ,此 1 5 0 0 0的蛋白带可为 PRRS病毒 N蛋白的单克隆抗体所识别 ,表明该重组

摘要：本文参照已发表的柔嫩艾美耳球虫(***)折光体蛋白基因序列,根据其阅读框及载体序列特点,两端分别加上EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点设计引物,以***株的总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,成功扩增出Et1A基因。将PCR产物与pGEM-T载体连接后,转化JM109感受态细胞,蓝白斑法筛选阳性克隆并测序。测序表明,该基因全长1978bp,其阅读框大小为1944bp;与GenBank登记的Et1A基因相比较,有6个部位、共7个碱基发生了突变,其中5个有意义突变,2个无意义突变,同源性达99 5%。与堆型艾美耳球虫(***)的Ea1A基因的同源性为79 3%,而与牛艾美耳球虫(***)的同源性只有19 5%。表达产物具有核苷酸转氢酶的功能,推测可为子孢子侵入宿主细胞提供能量。