摘要：采用 RAPD 方法对水牛梭形住内孢子虫、待定种及黄牛枯氏住内孢子虫缓殖子基因组 DNA 进行了分析,待定种 PCR 产物的电泳带型与枯氏住肉孢子虫的差异较梭形住内孢子虫大,这与二者表型性状一致的研究结果不吻合.对3种包囊种特异性的 PCR 指纹进行了筛选,回收和纯化了3种包囊种特异性的 DNA 片段,待定种0.7kb 片段经α-^(32)PdATP 标记后用作探针,只与同源 DNA 杂交,不与其它包囊、宿主细胞和艾美耳球虫杂交,用 pGEM-T Easy Vector 对该片段克隆成功,并测出其全长序列,为进一步设计特异引物建立标准 PCR 诊断方法和用作核酸探针奠定了基础。

摘要：用RT—PCR法从NDV Lasota疫苗株中扩增出HN基因，将其克隆到pGEM—T easy vector中，构建了重组质粒pT—HN．设计了1对引物，用PCR法扩增出HN蛋白主要抗原表位基因（442—1734bp共1239bp），将其连接到原核表达载体pET-28a（＋），构建重组质粒pET—HN．用IPTG诱导使其在大肠杆菌BL21（DE3）中表达．SDS—PAGE结果表明，NDV HN主要抗原表位基因在pET—HN中获得了高效融合表达，其表达蛋白的分子量为28kD．同时，通过试验摸索并确定了表达HN蛋白主要抗原表位基因的最佳诱导条件：IPTG终浓度为0．4mmol·L^-1，诱导时间为4h，温度为37℃．

摘要：血凝素是副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragallinarum,Hpg)的主要抗原成分之一,鸡只对Hpg的免疫力与血凝素抗体滴度成正相关。根据GenBank上已发表的B型Hpg Dalian株的血凝素基因序列(AY622378),设计合成了1对特异扩增Hpg血凝素基因的引物。以大连分离株Hpg中提取的细菌DNA为模板,利用PCR扩增出了1 038 bp的血凝素基因,将其克隆到pET-32a载体上,构建了pET-HA原核表达质粒并在BL21大肠杆菌中过量表达。血凝试验显示纯化的重组蛋白具有血凝活性;Western试验证明该重组蛋白可以被B型Hpg特异性鸡血清所识别。本研究在国内首次对Hpg的血凝素基因进行克隆表达,并分析了重组蛋白的血凝活性。

摘要：根据GenBank中登录的A型Hpg Hp8株血凝素基因序列,设计合成了1对特异性引物,以Hpg Hp8株中提取的细菌DNA为模板,利用PCR扩增了Hpg血凝素全长基因(1 035 bp),将其克隆到pET-32a(+)载体上,构建了原核表达载体pET-HA,表达并纯化了重组蛋白,通过免疫印迹及血凝和血凝抑制试验鉴定了该重组蛋白的生物学活性。结果显示,表达并纯化的HpgHA重组血凝素蛋白可以和A型Hpg抗血清特异性结合,并且可以凝集鸡红细胞。表明,成功地构建了Hpg血凝素基因的原核表达载体,并表达、纯化了具有凝集鸡红细胞活性的Hpg-HA融合蛋白。

摘要：从血液流变性、氧自由基和一氧化氮自由基变化角度研究补气活血法防治产后气虚血瘀征的作用。试验分为3组:产后健康组18例,气虚血瘀征组9例,气虚血瘀征用药组8例。用药组按0 8g/kg体重投喂归芪益母散,给药方法为产后1、2、3、5、7d每日1剂,共计5剂。于产后1、2、4、7、10d按设计指标采血、化验分析。结果表明喂服归芪益母散可显著降低产后气虚血瘀征奶牛1、2d全血低切比黏度(P<0 05),显著降低4、7、10d血浆比黏度(P<0 01或P<0 05);显著降低1、2、7d血液MDA含量(P<0 01或P<0 05);显著降低1、2、4、7、10d血液一氧化氮含量(P<0 01或P<0 05)。补气活血可显著改善产后气虚血瘀征奶牛的血液流变性、氧自由基和一氧化氮自由基失衡状况。

摘要：目的克隆青石斑鱼MHCclassI基因,为研究石斑鱼的免疫系统和MHCclassI基因库提供材料。方法首先利用MHCclassI基因的特征,根据已知MHCclassI基因及其特点设计简并引物得到MHCclassI部分序列,然后分别利用5′RACE、3′RACE延伸至全基因的两端。将得到的序列拼接,经NCBI上BLASTx分析青石斑鱼MHCclassI基因核心区域,设计引物得到青石斑鱼MHCclassI基因。最后,将所得MHCclassI基因所对应氨基酸与几种鱼和人类MHCclass分子利用DNAMAN和MEGA软件分别进行比对和绘制分子进化树。结果成功得到青石斑鱼5个MHCclassI基因和绘制了MHCclassI分子进化树。同源性分析发现5个MHCclassI基因氨基酸同源性85.69%即高度的多变性。经氨基酸序列分析,青石斑鱼与已知鱼类和人MHCclassI基因的氨基酸序列存在30.27%～73.46%同源性其中不同鱼类同源性比对的比值表现为不同种类的鱼亲缘关系越近同源性比值越高。结论青石斑鱼MHCclassI基因具有已知物种MHCclassI基因特征。MHCclassI分子可以为生物进化分析提供依据。

摘要：根据人和动物的MHCIα2基因中两个半脱氨酸侧翼的保守序列设计了混合型引物，采用PCR法从白鲢基因组DNA中克隆了MHCIα2（Hymo－BX1）。经氨基酸序列和同源性分析，Hymo－BX1与人和动物的MHCIα2存在26．7％～50．6％同源性，并存在抗原多肽结合位点（T－143、K－146、W－147、Y－159）以及α2微球蛋白结合位点（Q－115、D－119、G－120、D-122）。由此认为：Hymo－BX1属MHCclassIa类可作为白鲢种群分子进化指标之一。

摘要：根据已发表的PRRSV基因组序列 ,设计并合成了 1对特异扩增ATCCVR 2 3 3 2株的ORF6基因的引物。以ATCCVR 2 3 3 2基因组为模板 ,通过RT PCR扩增出 5 86bp的cDNA产物。将该cDNA片段经T A连接插入 pGEM Teasy载体中 ,用重组质粒转化大肠埃希氏菌JM 10 9,获得重组质粒转化菌。对重组质粒DNA进行PCR及酶切鉴定 ,证明插入的DNA片段与PCR扩增的DNA片段大小相符。对整个ORF6进行序列分析 ,将测序结果与已发表的ATCCVR 2 3 3 2序列相比较 ,证实插入片段为PRRSVVR 2 3 3 2的ORF6片段的cDNA。

摘要：采用2×5因子设计,新城疫(ND)疫苗免疫分为免疫组和未免疫组,铅染毒按饮水中的醋酸铅浓度分为0、50、500、1000和2000mg/L5个组,将90只14日龄黄羽鹌鹑随机分组,实行自由饮水和采食,研究铅染毒和ND免疫对鹌鹑生长发育的影响。结果表明,ND免疫在1～2周内能显著降低鹌鹑的体重(P<0.01);ND免疫可导致肝脏指数增大,血清透明质酸含量升高;2000mg/L醋酸铅能显著降低试验期鹌鹑的体重(P<0.01),至试验第5周(7周龄)所有铅染毒组的鹌鹑体重均显著低于对照组(P<0.01)。铅能导致鹌鹑采食量下降、脱毛、性腺发育受阻和血清透明质酸含量升高。性腺发育不良是鹌鹑铅中毒的一个重要标志,透明质酸含量可作为检测鹌鹑群体是否经过ND疫苗免疫和遭受铅污染的指标。

摘要：根据报道的布氏锥虫(Trypanosoma brucei)微管结合蛋白p15(Tb-MAPp15)基因及其3′非翻译区保守序列设计引物,采用PCR法从伊氏锥虫云南水牛株(Trypanosoma evansi stock YNB)基因组DNA中克隆得到伊氏锥虫微管结合蛋白p15(Te-MAP p15)基因。克隆片段长273bp,编码90个氨基酸,预测分子量9.0kDa。经同源性比较,所得基因与Tb-MAP p15基因同源率达到94%。抗原性分析Te-MAP p15基因表达的氨基酸序列比***微管结合蛋白p15多5个,均参与组成其中1个抗原决定簇,并且此抗原决定簇序列形成在蛋白中常作为识别位点的α螺旋。将该基因亚克隆到pGEX-6P-1原核表达载体,转化大肠杆菌*** RS21宿主菌,经IPTG诱导,可成功表达。重组融合蛋白大小为35kDa,与预期大小一致,经SDS-PAGE和Western-blot鉴定为重组伊氏锥虫微管结合p15蛋白。