摘要：根据从GenBank上查到的PMV_2型Yucaipa株F基因序列———D1 3 977序列 ,设计特异性引物 ,从禽副粘病毒 2型Yucaipa标准株成功地克隆了F基因全编码序列。所测的核苷酸序列大小为 1 65 4bp,编码一个含 5 3 6个氨基酸残基的多肽 (未加工前 ) ,分子量约为 5 5 .75kDa。裂解位点在F基因的第 98和第 99个氨基酸残基之间 ,F2蛋白羧基端裂解位点区的氨基酸残基序列为Lys_Pro_Ala_Ser_Arg。F基因序列同源性比较结果表明本研究所测的序列是PMV_2型F基因序列 ,并进一步证实了副粘病毒 2型与分离自猴的Murayama病毒在系统进化上有非常紧密的关系。

摘要：设计了一种用两个隔离器连接法进行针对隔离器排风滤器中滤材效果的病毒攻击试验 。

摘要：背景:随着分子生物学和分子遗传学技术的发展和应用,人们利用基因工程方法进行人胰岛素的生产研究,并从分子水平再造分泌胰岛素的克隆细胞系来替代胰岛素注射和胰岛移植治疗糖尿病。目的:构建并筛选人胰岛素基因真核高效表达载体。设计:随机对照实验研究。单位:中国医科大学实验动物部。材料:实验选取健康成年清洁级昆明小鼠40只,雌雄各半,自由饮水,自由采食人工颗粒料,每日光照14h,实验动物由长春解放军军需大学实验动物中心提供。大肠肝菌DH5α和幼仓鼠细胞系由实验动物中心保存。方法:常规法构建重组质粒pEF1α-ImINS。将重组质粒pEF1α-ImINS和胰岛素其他3个重组质粒分别转染幼仓鼠肾细胞,经G418筛选,阳性克隆传至20代,分别用放射免疫和免疫组织化学技术方法分析胰岛素和/或胰岛素原在幼仓鼠肾细胞中表达的情况。并用重组质粒pEF1α-ImINS转染幼仓鼠肾细胞的阳性克隆20代的PBS细胞悬浮液(5×107细胞/只)及其培养上清(0.5mL/只)对昆明小鼠行腹腔注射,通过对注射前后小鼠血糖值测定,分析转基因产物降血糖的生物学效应。主要观察指标:胰岛素基因在幼仓鼠肾细胞中整合和表达的结果,以及注射前后血糖的变化。结果:胰岛素的表达量最高为7.984mIU/L,胰岛素表达水平的灰度值在幼仓鼠肾细胞质中为177.50±15.10,细胞核中为150.30±21.43;昆明小鼠注射pEF1α-ImINS转染幼仓鼠肾克隆细胞株的悬浮液后6h血糖值明显下降,与注射前24h比较,差异有极显著性意义(P<0.01)。结论:幼仓鼠肾细胞中重组质粒pEF1α-ImINS是胰岛素表达量最高的质粒;pEF1α-ImINS转染的克隆细胞株在小鼠体内有胰岛素表达,并且对正常小鼠有降血糖的作用。