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土壤中弓形虫半套式PCR检测方法的建立
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《甘肃农业报》2013年 第5期48卷 19-23,31页
作者:孟鹏 叶强 王萌 张德林 赵晋军甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 
根据NCBI上公布的弓形虫RH株的529bp基因序列(登录号:AF146527)用Primer Premier 5.0设计3条特异性引物TX1、TX2和TX3,建立土壤中弓形虫的半套式PCR检测方法,并将引物TX1与TX3扩增产物克隆到pMD18-T载体上进行测序.结果表明:该方法能扩...
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弓形虫硫氧还蛋白样蛋白基因的克隆与原核表达
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中国兽医科学2014年 第11期44卷 1145-1149页
作者:杨晓宇 王萌 张德林中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 
为掌握刚地弓形虫硫氧还蛋白样蛋白(thioredoxin-like,TRXL)的生物学特性及其作为诊断候选分子的潜力,针对trxl基因序列设计引物,通过RT-PCR法扩增弓形虫trxl基因,并将其连接至pET-30a(+)原核表达载体。转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱...
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PRRSV JX0708株结构蛋白基因的克隆及其生物信息分析
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《甘肃农业报》2012年 第1期47卷 1-7页
作者:何小兵 贾怀杰 孙晓林 郭晓青 景志忠甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046 甘肃省中医学院附属医院甘肃兰州730020 
根据GenBank中登录的美洲型PRRSV JXA1株基因组序列设计合成了4对引物,应用RT-PCR技术对PRRSV JX0708株结构蛋白基因进行扩增、克隆和测序,将测序结果应用Blast和DNAStar软件进行分析,并与国内外分离株进行核苷酸序列以及推导的氨基酸...
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分枝杆菌分型三重PCR检测方法的建立及应用
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中国畜牧兽医2016年 第1期43卷 8-15页
作者:娄忠子 刘聪暖 贾万忠 周继章 闫鸿斌 曹小安 李立 李兆才 付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009 
研究旨在建立一种快速鉴定分枝杆菌的三重PCR方法,并比较分析其在临床检测中的可靠性。根据已发表的结核分枝杆菌、牛分枝杆菌和非洲分枝杆菌rv3036c基因,结核分枝杆菌rv1970f基因(RD7)和牛分枝杆菌pncA基因的序列,改造并设计合成了3...
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A型口蹄疫病毒VP1基因的克隆及原核表达
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中国通报》2012年 第14期28卷 110-113页
作者:刘明 刘航 柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046 
通过利用原核表达系统表达并纯化出A型口蹄疫病毒VP1蛋白。首先从实验室冻存的含A型口蹄疫病毒的细胞中提取FMDV总RNA,通过RT-PCR获得cDNA。并根据FMDV全基因组序列设计了一对针对VP1基因的引物,通过PCR扩增得到目的基因VP1并亚克隆入pM...
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羊口疮病毒QH02株VEGF基因的克隆及其序列分析
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《新疆农业报》2013年 第2期36卷 98-102页
作者:王盈盈 贾怀杰 白刚 何妍萍 岳城 景志忠新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室兰州730046 
根据GenBank中登录的羊口疮病毒SA00株基因组序列,针对VEGF基因设计特异性引物,从感染OR-FV/QH02/2010的Hela细胞中提取病毒DNA作模板进行PCR,扩增VEGF基因并将其克隆入pEGM-T Easy载体,经鉴定且测序结果正确后对其序列进行分析。结果表...
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羊口疮病毒青海QH02株ORF011基因的克隆、原核表达及鉴定
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中国病毒病杂志》2019年 第3期9卷 188-194页
作者:耿嘉谦 贾怀杰 陈国华 何小兵 房永祥 景志忠 王晓霞兰州大学公共卫生学院营养与食品卫生学研究所甘肃兰州730000 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046 
目的克隆羊口疮病毒QH02株ORF011基因并进行序列分析及原核表达、鉴定。方法提取羊口疮病毒QH02株的DNA,根据GenBank中(GU320351.1)的序列设计并合成引物,PCR扩增ORF011基因。将测序正确的序列用生物信息软件对其基因及蛋白的结构进...
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5株猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7全长基因的克隆及序列分析
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中国病原生物学杂志》2009年 第8期4卷 561-566页
作者:贾怀杰 景志忠 房永祥 王晓霞 陈国华 李克斌 窦永喜 瞿惠玲 杨孝朴甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046 甘肃省兽医局甘肃兰州730030 
目的通过测定5株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7基因序列,结合GenBank登录的国内外PRRSV分离株核苷酸序列,分析PRRSV核衣壳蛋白(N蛋白)的遗传变异情况。方法根据GenBank公布的PRRSV ATCCVR-2332株全基因组核苷酸序列,设计合成1...
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