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一种新型T细胞免疫原的原核表达及对口蹄疫疫苗的免疫增强作用
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生物工程报》2011年 第9期27卷 1281-1291页
作者:赵清 孙普 刘在新 李平花 包慧芳 曹轶梅 白兴文 付元芳 卢曾军 李冬中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046 
主要探讨了T细胞免疫原TI对口蹄疫疫苗的免疫增强作用。设计并原核表达产生了一种包含口蹄疫病毒VP1,VP4,3A和3D蛋白上多个T细胞表位与两个通用T细胞表位的T细胞免疫原,命名为TI;同时表达了O和Asia 1两个型口蹄疫病毒VP1蛋白的串联编码...
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口蹄疫反向疫苗研究进展
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《病毒报》2014年 第2期30卷 213-220页
作者:杨波 杨帆 王松豪 张岩 曹伟军 殷宏 郑海中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 
利用反向遗传技术对口蹄疫病毒基因的改造和修饰,可以实现对疫苗种毒的生产性能、抗原匹配性、抗原稳定性、免疫应答能力、生物安全性等特征的改良,能够迅速获得预期生物学特性的疫苗候选株,进而可以减少和避免流行毒株驯化环节带来的...
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表达O型口蹄疫病毒衣壳蛋白的重组腺病毒构建及其免疫原性分析
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生物工程报》2022年 第5期38卷 1824-1836页
作者:王灿灿 张莉萍 刘新生 周鹏 潘丽 王永录中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室OIE/国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 
为构建表达O型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)衣壳蛋白的复制缺陷型人5型腺病毒(Ad5)为载体的重组腺病毒,本研究设计、合成特异性引物并扩增出FMDV-OZK93的P12A、3B3C基因,通过融合PCR方法连接2个片段,获得P12A3B3C基...
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CRISPR/Cas9介导的RPSA基因敲除细胞系的建立及其应用
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《微生物学报》2021年 第7期61卷 1945-1956页
作者:高利利 王聪聪 杨帆 曹伟军 张向乐 刘湘涛 朱紫祥 郑海中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 
【目的】利用CRISPR/Cas9技术建立RPSA基因缺失的乳仓鼠肾细胞(baby hamster kidney cells,BHK21)细胞系,为开展RPSA调控病毒复制机制研究提供工具;同时,初步探究RPSA对塞内卡病毒复制的影响。【方法】根据GenBank中仓鼠的RPSA基因序列...
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Asia I型口蹄疫病毒中和表位与羊IgG重链恒定区的融合表达及免疫原性测定
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生物工程报》2010年 第4期26卷 454-461页
作者:王景锋 邵军军 李菁 高闪电 独军政 丛国正 林彤 常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046 
VP1蛋白是口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)诱导机体产生抗病毒感染免疫的主要蛋白,含有病毒的若干中和表位。本研究设计和合成了由AsiaI型FMDVVP1蛋白136~160aa和198~211aa两个表位组成的重复串联表位的编码基因,并克...
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口蹄疫病毒非结构蛋白2C基因主要表位区的表达及活性检测
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《畜牧兽医报》2008年 第9期39卷 1235-1239页
作者:付元芳 卢曾军 田美娜 张小丽 刘在新 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室 
根据测定的口蹄疫病毒(FMDV)2C基因序列,设计了一对特异性的表达引物,用于扩增2C基因5′-端174bp和3′-端279 bp连接片段,该区含有较丰富的B细胞表位编码序列。扩增片段通过NcoⅠ和SalⅠ酶切位点插入表达载体pET-30a。序列测定表明,目...
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美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测方法的建立及其应用
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《病毒报》2023年 第1期39卷 161-173页
作者:王方洲 孙普 张婧 李平花 马雪青 赵志荀 李凤娟 李国秀 李冬 王健 袁红 曾巧英 刘在新 卢曾军中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046 甘肃农业大学兰州730070 
美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)在我国出现了多种基因亚型毒株混合流行和重组的复杂变化,其引起的猪繁殖与呼吸综合征(PorcineReproductiveand Respiratory Syndrome,PRRS)...
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三种大肠杆菌表达的口蹄疫病毒A型多表位蛋白对猪的免疫原性比较
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《微生物学报》2019年 第4期59卷 711-718页
作者:曹轶梅 王兴凯 王省 李坤 付元芳 李冬 卢曾军 刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 
【目的】研制猪口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)A型多表位蛋白疫苗,为猪FMDV A型的防控提供安全有效的疫苗。【方法】根据前期试验结果及国内外FMDVA型流行病信息,设计并合成了3种多表位免疫原基因A10、IA10和FA10。...
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A型口蹄疫病毒衣壳蛋白主要抗原表位区的原核表达及免疫效果分析
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中国兽医科学2019年 第10期49卷 1207-1215页
作者:汪肖肖 孙普 贾怀杰 李冬 付元芳 陈应理 曹轶梅 景志忠 白兴文 卢曾军 刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室 
为了探索更有效的A型口蹄疫(FMD)表位疫苗,根据已鉴定的A型口蹄疫病毒(FMDV)主要抗原位点,结合基因序列比对分析,选择了A型FMDV流行毒株的主要抗原位点区进行表位蛋白分子的设计表达。用表位序列包括A/QH/CHA/2013的VP2 70~81位、118~...
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猪流行性腹泻病毒N基因的原核表达与鉴定
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中国兽医科学2013年 第11期43卷 1152-1156页
作者:刘华南 曹伟军 杨帆 张艳 杨华 王松豪 郑海中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 
为了克隆和表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)的N基因,根据GenBank中登录的PEDV(CV777株)的N基因序列设计1对特异引物,提取阳性临床样品的总RNA,通过RT-PCR方法获得PEDV的N基因。将N基因定向克隆至表达载体pET-28a-His-Sumo中,酶切和测序鉴定...
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