摘要：系统性红斑狼疮（SLE）是自身免疫介导的，以免疫性炎症为突出表现的弥漫性结缔组织病。抗Sm抗体由于其在SEE诊断中具有高度特异性被认为是疾病的标志性抗体。目前研究认为，SmD1是其中最主要的抗原分子。本研究通过构建表达载体进行重组SmD1蛋白的表达和纯化的方法获取纯度较高的抗原，并通过生物学软件设计并化学合成SmD1抗原表位肽段，用ELISA法分别检测其在SLE中的临床意义。

摘要：每隔数年,总有人宣称'神药'的问药,它可以治愈癌症.但是一次又一次地,在小鼠体内显示出奇迹般疗效的神物,一旦用于临床实践,却又黯然失色.2001年gleevec的问世,不仅给人们带来了希望,更重要的是启示人们要用新的思路寻找更有效的药物.

摘要：目的对中国山东一个并多指(趾),又称型并指(趾),畸形大家系进行致病基因突变的鉴定,确定中国人并多指(趾)畸形家系中是否存在HOXD13基因突变;通过检测突变HOXD13基因对高危胎儿进行产前基因诊断。方法根据家族史、临床体征和手足X线检查进行临床诊断;采集家系成员外周血标本及受检孕妇羊水和绒毛标本,常规提取基因组DNA;设计并合成1对特异引物,通过PCR扩增HOXD13基因第1外显子内多聚丙氨酸链编码序列;PCR扩增片段经琼脂糖凝胶电泳检测,异常扩增片段经TA克隆后测序鉴定;产前诊断中,通过PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染检查HOXD13基因内及基因两侧共3个微卫星多态标记进行单体型分析。结果本家系4代54人,患者16人(男6人,女10人);手足共同表现为3/4完全并指伴软组织蹼内多指,4/5并趾伴软组织蹼内多趾;外显率为100%,表现度变异明显。上述表现符合典型常染色体显性并多指(趾)的表型特征。对家系中18人(患者9人)进行HOXD13基因分析,结果显示全部患者多聚丙氨酸链中丙氨酸残基数由正常的15个延长为24个。通过HOXD13基因多聚丙氨酸链延展突变检测和单体型分析,对家系中1女性患者两次怀孕进行产前诊断,发现胎儿均携带突变HOXD13基因。结论首次在中国人典型并多指(趾)

摘要：补体系统活化C_5～C_9形成末端补体复合物(terminal complement complex,TCC),其中结合在细胞膜上的称为膜攻击复合物(membrane attack complex,MAC),存在于血浆中的为SC_5b-9。SC_5b-9、MAC及人工制备的多聚C_9(poly C_9)均形成单个补体中所没有的新抗原,用兔抗人MACIgG可与SC_5b-9、poly C_9有特异反应。本组曾报道了TCC研究中兔抗人MAC抗体的制备纯化,SC_5b-9的纯化。在上述工作基础上用纯化的抗MAC IgG和辣根过氧化物酶联抗MAC IgG为双抗体,中间夹纯化抗原SC_5b-9或血浆,设计建立了双抗体夹心ELISA法,并初步检测了一些正常人和SLE患者血浆中SC_5b-9的浓度,发现活动期SLE患者血浆中SC_5b-9浓度明显高于非活动期SLE患者和正常人。

摘要：目的分析变应性支气管肺曲霉病(ABPA)患者的临床表现及囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)基因变异的种类。方法选取2010年1月至2018年12月于北京协和医院呼吸内科及变态反应科门诊确诊的9例汉族ABPA患者,采集外周血2 mL,常规提取基因组DNA,设计并合成27对特异引物,通过聚合酶链反应扩增CFTR基因全部27个外显子片段,扩增片段经琼脂糖凝胶电泳检测,然后采用Chromas Pro 2.1.3软件对CFTR基因序列进行读图分析。结果9例ABPA患者均携带CFTR基因变异,共发现4种CFTR基因变异类型(c.1408G>A,c.2562T>G,c.374A>G和c.1666A>G),未发现国外文献报道最常见的ΔF508变异类型。结论CFTR基因变异与ABPA发病可能具有一定的相关性,广大医务工作者需提高对此病的认识,并进一步扩大样本进行分析。

摘要：目的：观察中国人阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）的ＰＩＧ－Ａ基因突变，以与其他国家的突变类型比较。方法：应用逆转录－多聚酶链反应、异源双链分析／单链构象分析互补筛选异常片段，克隆，测序，针对ＰＩＧ－ＡｃＤＮＡ全长设计７个区域进行分析。结果：４例ＰＮＨ患者均有ＰＩＧ－Ａ基因突变，皆在第２外显子，共确定了５个突变位点，包括４个单碱基突变（１个同义突变，３个错义突变）和１个移码突变（为１个碱基丢失）。５个突变位点各不相同，散布于基因的不同区域，显示突变位点有随意性，无突变热点。结论：中国ＰＮＨ患者的ＰＩＧ－Ａ基因突变均为小突变，无两个以上碱基置换或丢失。此发现与日本人相近，而与欧美、泰国人有一定差异，提示ＰＮＨ在不同地区可能有不同的致突变原。

摘要：目的克隆人干燥综合征B抗原基因(human sjogren’s syndrome antigen B,SSB)并进行原核表达,为使用重组抗原用于自身抗体的临床检测奠定基础。方法根据GenBank中检索到的人SSB cDNA序列,在5′非编码区和3′非编码区设计特异性引物,提取人源HeLa细胞总RNA作为模板,逆转录RT-PCR扩增人干燥综合征B抗原cDNA。PCR产物纯化后连接至载体PET-30a,导入大肠埃希菌DH5α,构建重组质粒PET-30a-SSB。对重组质粒进行酶切鉴定,选择阳性克隆测序。重组质粒导入大肠埃希菌BL21,阳性克隆经鉴定后在IPTG诱导下表达。结果RT-PCR扩增产物为1245bp。重组质粒PET-30a-SSB经EcoR Ⅰ和HindⅢ双酶切证实含目的基因片段。序列分析提示与GenBank中检索到的一致。SDS-PAGE和Western印迹结果显示融合蛋白相对分子量为73ku,具有天然SSB抗原活性。结论成功克隆SSB基因并表达融合蛋白。

摘要：背景:SF-36量表有良好的信度和效度,适于在欧美人群中进行生活质量评价。目的:探讨健康调查量表SF-36在农村老年人群中应用的信度、效度和可行性。设计:本研究为现况研究,研究对象由两阶段随机抽样得到。单位:中国协和医科大学流行病与卫生统计研究所和一所大学的流行病与卫生统计研究所。对象:本研究于2002-05/2002-07在深圳市宝安区随机抽取6个村,选取6个村内687名老年人作为调查对象。纳入标准:年龄≥60岁、有常住户口者;排除标准:患严重精神及听力障碍者。实际获得有效问卷666份,其中男264名,女402名。方法:由经过培训的访问员用SF-36生活质量测量量表对农村老年人进行面对面访问调查,用可行性、信度和效度来评估SF-36量表。主要观察指标:SF-36量表的分半信度、内部一致性、效标关联效度、构想效度和结构效度。结果:该量表具有良好的内部一致性,8个维度的Cronbach'a系数均≥0.8,除心理健康外,各维度的分半信度较好,Pearson相关系数均≥0.7。构想效度和效标关联效度令人满意。因子分析产生两个因子,能解释总方差的63.14%,且除精神影响外,其它各维度在相应因子有较满意的因子载荷量(≥0.4)。结论:SF-36量表基本适用于农村老年人生活质量评价,但部分条目需进行调整。脆弱的老年人群应该给予更多的关怀?

摘要：用脉冲场凝胶电泳分离回收覆盖脆性X位点的酵母人工染色体YAC209G4中475kb片段，经MboⅠ完全酶解为平均长度400bp的片段，与pBSⅡKS质粒载体重组，共得到3500个重组作，筛选出60个含单拷贝序列插入片段的克隆。经序列测定，并与基因数据库分析比较，其中28个序列被基因数据库接受为新的序列标签位点，GenBank收录号为U26560-U26587。根据其中3个新序列标签的核普酸顺序设计PCR引物，在人基因组DNA中扩增出相应的特异片段。

摘要：胶原中多个成分如ⅩⅤ ,ⅩⅤⅢ的NC结构域能抑制血管内皮细胞增殖和迁移 ,具有抑制肿瘤生长和转移的活性 .从胎盘组织中提取总RNA ,根据文献报道的胶原Ⅳα1链cDNA序列 ,设计一对特异性引物 ,应用RT -PCR方法扩增出胶原Ⅳα1链NC1结构域基因 .DNA序列测定发现 ,扩增得到的基因与文献报道序列存在单个核苷酸变异 (A132C) ,编码氨基酸 (Gly)不变 .将扩增得到的胶原Ⅳα1链NC1结构域基因克隆到原核表达载体 pPROEXHTb上 ,并在大肠杆菌BL2