摘要：目的　以药效学方法评价结果为参照 ,考察药动学方法评价沙丁胺醇气雾剂生物等效性的适用性。方法　采用随机分组、自身对照、开放试验设计 ,舒喘灵为试验制剂 ,喘乐宁为参比制剂。轻中度哮喘患者单剂量吸入沙丁胺醇 40 0 μg ,给药后0 ,5 ,10 ,15 ,2 0 ,3 0min采血 ,并在 6h内定时测定肺功能指标FEV1.0 ,PEF ,FVC和FEF2 5～ 75及不良反应指标HR。以HPLC测定血浆药物浓度 ,非房室模型计算生物利用度参数cmax,tmax,AUC0～ 2 0min和AUC0～ 30min,通过双向单侧t检验和 90 %置信区间评价生物等效性。计算FEV1.0 ,FVC ,PEF ,FEF2 5～ 75改善百分数的最大值与平均值 ,AUCΔFEV1.0 >0 ,AUCΔFEV1.0 >15% ,tΔFEV1.0 (0～ 15% ) ,tΔFEV1.0 >15% ,tmax(FEV1.0 ) ,分别进行配对t检验 ,并对有显著差异的药效学参数进行多因素方差分析。结果　两种制剂的cmax分别为 ( 1.2 2± 0 .73 )和 ( 0 .98± 0 .5 2 )ng·mL-1,tmax分别为 ( 0 .2 1± 0 .0 9)和 ( 0 .2 6± 0 .0 8)h。AUC0～ 2 0min分别为 ( 0 .2 5± 0 .10 )和 ( 0 .18± 0 .10 )ng·h·mL-1。舒喘灵相对于喘乐宁的生物利用度为 63 % ( 90 %CI 45 %～ 88% )。双向单侧t检验和 90 %置信区间显示两种沙丁胺醇气雾剂生物不等效。两种制剂的药效学指标AUCΔFEV1.

摘要：目的　研究沙丁胺醇气雾剂在健康受试者体内的药代动力学及其相对于口服水溶液的生物利用度。方法　以 10名健康男性志愿者为研究对象 ,采取随机分组、自身对照、开放实验设计 ,在吸入或口服沙丁胺醇 1 2mg后 ,定时采血 ,用HPLC方法测定血浆药物浓度 ,通过PCNONLIN软件进行房室模型拟合 ,求算药代动力学参数 ,用非房室模型计算相对生物利用度。结果　沙丁胺醇气雾剂的人体内动力学过程符合二室开放模型。两种给药方式的Tmax分别为 (0 2 2± 0 0 7)h和 (1 8± 0 6 )h ,Cmax分别为 (3 4± 1 1)ng·mL- 1 和 (3 9± 1 4)ng·mL- 1 ,T1 2 β分别为 (4 5± 1 5 )h和 (4 6± 1 1)h。AUC0 - 2 0min (inhal) 为AUC0 - 2 0min (po) 的 7 94倍。相对生物利用度为 5 7 2 3 %。结论所建立的HPLC方法灵敏、专一、准确、精密。

摘要：目的 探讨细胞学标本表皮生长因子受体（EGFR）基因突变检测的规范化流程.方法 收集北京6家医院287例临床怀疑肺癌的细胞学标本,应用设计的规范化检测流程检测细胞学标本中EGFR基因突变状态.选择40例非小细胞肺癌（NSCLC）患者富于肿瘤细胞胸水标本,比较同一标本采用石蜡包埋和细胞学甩片中刮取癌细胞同时检测EGFR突变的一致性,比较直接测序（Seq）法及扩增受阻突变系统（ARMS）方法检测EGFR基因突变状态的差异.对应用吉非替尼治疗的患者分析其基因突变状态与疗效的关系.结果 287例怀疑肺癌的细胞学标本中,发现肿瘤细胞236例（82.2％,236/287）,其中寡肿瘤细胞标本31例（13.1％,31/236）,富于肿瘤细胞学标本205例（86.9％,205/236）.富于肿瘤细胞学标本中,180例（87.8％,180/205）诊断为***法检测富于肿瘤细胞NSCLC标本EGFR基因突变率为27.8％ （50/180）,腺癌标本为28.2％ （50/177）.ARMS方法检测富于肿瘤细胞NSCLC标本EGFR基因突变率为45.6％ （82/180）,腺癌标本为46.3％（82/177）.寡肿瘤细胞标本ARMS方法检测EGFR突变率为38.7％（12/31）,与富于肿瘤细胞标本EGFR突变率差异无统计学意义（P=0.12）.40例富于癌细胞胸水标本中,ARMS检测石蜡包埋细胞学标本和细胞学甩片刮取癌细胞标本的EGFR基因突变率均为37.5％ （15/40）,一致率为100％.吉非替尼治疗ARMS（＋）组和ARMS（-）组患者的无进展生存时间（PFS）分别为12个月和2个月（P ＜0.001）,总生存时间（OS）分别为19个月和7个月（P=0.003）.吉非替尼治疗Seq（＋）组和Seq（-）组患者的PFS分别为12个月和7个月（P =0.227）,OS分别为20个月和15个月（P=0.510）.吉非替尼治疗Seq（＋）ARMS（＋）组和Seq（-）ARMS（＋）组患者的PFS分别为12个月和10个月（P =0.354）,OS分别为20个月和17个月（P=0.334）.结论 细胞学标本EGFR基因突变检测的流程具有可靠性和可行性,病理质控和免疫组化染色在细胞学标本EGFR基因突变检测流程中作用重要,细胞学标本EGFR基因突变检测需采用高灵敏度的检测方法.

摘要：目的　观察磷酸奥司他韦在自然获得流行性感冒 (以下简称流感 )受试者中的临床疗效、安全性及耐受性。方法　采用随机、双盲和安慰剂对照的多中心临床试验设计。共入组 478例 ,入组条件为年龄≥ 18岁 ,≤ 6 5岁 ;发热≥ 37 8℃ ;至少有两个流感样症状 ;出现症状后不超过 36h。合格的受试者随机接受磷酸奥司他韦 75mg或安慰剂治疗 ,每日 2次 ,共 5d。结果　证实为流感患者(即ITTI总体 )有 2 73例 ,试验组 134例 ,对照组 139例。ITTI总体试验组疾病持续时间中位数为 91 6h(95 %可信区间为 80 2～ 10 1 3h) ,对照组疾病持续时间中位数为 95 0h(95 %可信区间为 84 5～10 5 3h) ,两组疾病缓解率差异有显著性 (P =0 0 46 6 )。ITTI总体试验组症状总分下降值的曲线下面积中位数为 1382 9,明显高于对照组 (12 36 7,P =0 0 196 )。共有 45 9例可进行安全性分析 ,试验组和对照组不良反应发生率差异无显著性。不良反应主要为消化系统症状。结论　磷酸奥司他韦在流感发病后早期使用可以明显缩短疾病的持续时间、减轻症状的严重程度 ,其安全性和耐受性较好 ,适合在临床中推广使用。

摘要：目的：研究细胞学标本间变性淋巴瘤激酶（ ALK）蛋白表达及基因融合检测的规范化流程。方法收集北京市7所三级甲等医院晚期肺腺癌细胞学标本，按照设计的规范化流程检测ALK蛋白表达及基因融合状态。制作福尔马林固定石蜡包埋（ FFPE）细胞学蜡块，应用免疫组化（ IHC）方法鉴别肿瘤细胞的来源与分型；应用Ventana IHC ALK（ D5F3）检测ALK蛋白的表达；应用实时荧光定量PCR（ qRT-PCR）方法检测表皮生长因子受体（ EGFR）基因野生型标本中ALK基因融合，并对无法制作细胞学蜡块的细胞学标本进行ALK基因融合检测；Ventana IHC ALK（ D5F3）检测阳性标本应用荧光原位杂交（FISH）方法验证ALK基因的融合状态。分析Ventana IHC ALK（D5F3）检测阳性并采用克唑替尼治疗患者的疗效。结果229例细胞学标本符合肺腺癌诊断，其中207例标本采用至少1种方法检测并获得ALK蛋白表达和基因融合检测结果，检测率为90．4％（207／229）。203例标本成功制作FFPE细胞学蜡块，应用Ventana IHC ALK（D5F3）检测ALK蛋白表达的成功率为100．0％，阳性率为10．3％（21／203）。98例EGFR基因野生型肺腺癌FFPE细胞学标本采用qRT-PCR方法检测ALK基因融合，96例检测成功（97．96％）。以qRT-PCR方法为标准，Ventana IHC ALK（D5F3）检测ALK蛋白表达的灵敏度为100．0％，特异性为98．7％。2种检测方法一致率为94．7％（ Kappa＝0．967， P＜0．001）。 FISH方法对Ventana IHC ALK（ D5F3）表达阳性的结果进行验证，2例寡肿瘤细胞学标本无法获得明确判读结果。6例Ventana IHC ALK（ D5F3）检测ALK蛋白表达阳性的患者选用克唑替尼治疗，有效5例。2例细胞学蜡块应用4％甲醛固定72 h后，Ventana IHC ALK（ D5F3）染色强度明显减弱；10例患者分别用FFPE细胞学蜡块标本切片和刮取细胞学甩片中细胞提取总RNA，qRT-PCR检测ALK基因融合结果一致。结论所设计的ALK蛋白表达及基因融合检测流程，扩展了细胞学标本的检测类型，提高了检测率。 Ventana IHC ALK（ D5F3）是检测细胞学标本ALK蛋白表达的可靠方法，检测前病理质量控制过程对检测结果的准确性至关重要。细胞学标本无法制作细胞学蜡块时， qRT-PCR是进行ALK基因融合检测的可选方法。

摘要：随着城市和工业化发展,支气管哮喘(简称哮喘)呈逐年增加趋势.哮喘可引起患者气喘、咳嗽,严重影响患者的生活质量.哮喘的临床治疗不仅要改善患者的肺通气功能,更要以提高其生活质量为首要目的;因此,关于哮喘患者生命质量问卷(AQLQ)调查表得到了越来越普遍的应用.AQLQ是1992年由Juniper等设计,并首先应用于哮喘的一种问卷调查[1].

摘要：目的　验证磷酸奥司他韦在自然获得流行性感冒 (流感 )患者中的临床疗效并观察其安全性和耐受性。方法　采用随机、双盲和安慰剂对照的临床试验设计。 95例患者随机接受磷酸奥司他韦 75mg或安慰剂治疗。 结果　证实流感患者 (即ITTI总体 ) 6 0例 ,治疗组 2 9例 ,对照组 31例。ITTI总体治疗组疾病持续时间中位数为 74.5h( 95 %可信区间为 5 7.0～ 10 4.3h) ,对照组疾病持续时间中位数为 119.0h( 95 %可信区间为 90 .4～ 138.8h) ,两组疾病缓解率在统计学上差异有显著性(P =0 .0 13 5 )。ITTI总体治疗组症状总分下降值的曲线下面积中位数为 15 15 .2 ,高于对照组的12 33 .8,但无统计学意义 (P =0 .12 76 )。共 91例可进行安全性分析 ,总结不良反应的发生率 ,治疗组和对照组无统计学差异。不良反应主要为消化系统症状。结论　磷酸奥司他韦在流感发病后早期使用 ,可以明显缩短疾病的持续时间、减轻症状的严重程度 ,而且其安全性和耐受性好。

摘要：目的验证盐酸阿比朵尔在中国自然获得流行性感冒受试者中的临床疗效并观察其安全性和耐受性。方法采用随机、双盲和安慰剂对照的多中心临床试验设计。共入组232人,入组条件为年龄≥18岁,≤65岁;发热≥37.8℃;符合流感疑似病例诊断标准;出现症状后不超过36h。合格的受试者随机接受盐酸阿比朵尔200mg或安慰剂治疗,每日3次,共5d。结果疗效分析总体为PPi,即指按规定服用药物并完成所有随访且实验室检查证明为流感病毒感染的病例,试验组59例,对照组66例。两组疾病缓解率经生存分析Logrank检验,试验组缓解率高于对照组。试验组疾病持续时间中位数为72.00h(95%可信区间为66.00～78.00h),对照组疾病持续时间中位数为96.00h(95%可信区间为87.46～104.54h),两组比较差异有显著性(P=0.0083)。试验组症状总分下降值的曲线下面积中位数为780.00(95%可信区间为700.77～859.23),对照组中位数为684.00(95%可信区间为559.81～808.19),两组经Wilcoxon检验差异有显著性(P=0.005)。共有232例可用于安全性分析熏试验组113例,对照组119例。共有20例不良事件可能与研究药物有关,其中试验组7例(6.19%),对照组13例(10.9%),两组间差异无显著性(P=0.245)。不良反应主要为消化系统症状和血清转氨酶升高。结论盐酸阿比朵尔在流感发病?

摘要：目的分析中国健康人血清游离DNA中表皮生长因子受体（EGFR）外显子18～22基因序列是否存在突变，为监测EGFR酪氨酸激酶选择性抑制剂（EGFR TKIs）的临床疗效提供正常参考数据。方法采用高灵敏度DNA提取方法结合高保真巢式PCR和基因测序技术对42例中国健康人外周血血清游离DNA中EGFR TKIs作用靶点所在结构域即EGFR外显子18-22的基因序列和氨基酸序列进行分析。结果从外周血血清游离DNA中均扩增出EGFR外显子18～22的基因片段，片段大小（分别为400，374，404，408和419bp）与预期设计片段完全相符。健康人外周血游离DNA中存在EGFR基因突变，突变频率出现最多的是EGFR外显子20，41名健康人样本中有7例样本出现1处相同位点的沉默点突变（4838499G→A），其氨基酸序列（Glu）没有发生改变；EGFR外显子18也出现点突变，34名健康人样本中有1名健康者样本出现3处点突变，其中2处点突变（4830989 G→C；4831025 G→C）导致氨基酸序列发生改变（Glu→Gln；Ala-Pro），另外1处点突变（4831000 A→C）为沉默突变，其氨基酸序列（Thr）没有发生变化；EGFR外显子19、外显子21～22没有出现基因突变。结论通过巢式PCR结合基因测序可以分析外周血游离DNA中EGFR基因序列，健康人外周血游离EGFR外显予18和20存在基因点突变，其中外显子18的点突变导致了氨基酸序列改变。