摘要：目的:制备SARS冠状病毒S蛋白串联表位重组蛋白,为SARS的防治提供新型抗原蛋白。方法:应用抗原表位分析软件分析S蛋白的表位。选取其中16个表位,设计并合成表位串联重组蛋白编码基因Z,构建其原核细胞表达重组体,在大肠杆菌BL21(DE3)表达该重组表位蛋白Z,应用Ni离子亲合层析法纯化重组蛋白Z做抗原,采用皮下注射法免疫新西兰白兔。斑点杂交法测定抗Z-血清中S蛋白的抗体,ELISA法检测Z蛋白的抗原性。结果:构建了S蛋白重组表位蛋白Z的原核表达体,在BL21菌中表达了Z蛋白,Z蛋白免疫新西兰白兔后获得了抗Z血清。斑点杂交分析显示,抗Z血清识别哺乳动物细胞中表达的S蛋白。ELISA检测结果显示,抗Z血清识别SARS冠状病毒抗原。结论:建立了制备SARS冠状病毒S蛋白重组表位蛋白的方法,为防治SARS提供了新型抗原蛋白Z。

摘要：目的:构建针对21种常见致病菌的快速诊断用芯片。方法:针对细菌的高度保守区域设计特异探针,优化条件下与细菌的PCR扩增产物进行杂交。结果:得到特异的杂交结果。结论:芯片方法可用于快速鉴别不同种类的细菌,该方法简便可行,优于传统诊断方法。

摘要：目的探讨RNA干扰(RNAi)介导的端锚聚合酶1(TNKS1)的表达下调对人神经母细胞瘤(NB)细胞SH-SY5Y体外增殖能力和凋亡的影响及机制,为开发治疗NB的新靶点提供一定的实验基础。方法根据TNKS1基因序列,设计合成3个TNKS1基因的特异性短发夹环(shRNA)干扰片段,利用慢病毒作为载体,构建目的基因的RNAi序列。慢病毒感染SH-SY5Y细胞,实时定量PCR(Real-time PCR)法检测TNKS1基因的表达,筛选出最佳干扰序列进行后续实验。然后进行克隆形成实验,检测RNAi-TNKS1后细胞增殖能力的改变。并进一步用Western blotting法检测抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Caspase-3、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路的关键蛋白β-catenin及其下游靶蛋白Cyclin D1和c-Myc的表达,最后用透射电镜观察凋亡形态的改变,探讨RNAi-TNKS1对细胞凋亡的影响及其作用机制。结果慢病毒载体构建成功,病毒滴度为5×1011TU/L。Real-time PCR检测结果显示,#3 shRNA为最佳的有效靶点。克隆形成实验的结果显示,RNAi-TNKS1后SH-SY5Y细胞的克隆形成率较对照组明显下降。Western blotting结果显示,RNAi-TNKS1可显著抑制Bcl-2蛋白的表达,促进Caspase-3蛋白的表达。此外,Wnt/β-catenin通路的关键蛋白β-catenin及其下游靶蛋白Cyclin D1和c-Myc的表达也降低。透射电镜结果显示,RNAi-TNKS1后细胞呈现明显的凋亡结构和形态。结论 RNAi介导的TNKS1的表达下调可降低SH-SY5Y细胞的体外增殖能力,诱导其凋亡,可能部分是通过抑制Wnt/β-catenin通路发挥作用。

摘要：如何进行中药方剂中各种成分在某一疗效中作用的比较和筛选；以及如何获得最佳中药组方等问题都是急待解决的关键问题之一。有鉴于此。本文用数学领域中常用的排列组合及数理统计等方法对这一问题进行了初步探讨。

摘要：目的研究适用于芯片捕获细胞的最佳免疫组化方法,并用其验证细胞芯片的特异性。方法CD7、CD13、CD19抗体固定于醛基玻片上,形成3×3阵列的芯片,从外周血中分离全白细胞,芯片上孵育后,细胞芯片捕获的细胞固定,S-P法进行免疫组化及苏木素复染,显微镜下观察和计数。结果乙醇∶甲醛∶水(AF液)固定胞内外抗原染色阳性率、阳性程度高,阳性细胞形态较好;芯片上免疫组化所用抗体最佳浓度为1μg/ml,最佳孵育条件为室温,1h;芯片上阳性细胞胞浆或胞膜有棕色颗粒,阴性抗体点细胞无此表现;细胞芯片的特异性结合阳性率在96.7%以上,非特异性结合阳性率在0.8%以下。结论本实验方法能将细胞芯片捕获细胞的胞内及胞浆抗原直观稳定表达出来,设计出了细胞芯片上免疫组化方法,同时验证了细胞芯片的特异性。

摘要：目的:明确中缅边境流行区间日疟原虫(***) pvama1基因DomainⅠ(DⅠ)区域的多态性和种群结构。方法:提取16例中缅边境P. vivax感染患者血gDNA; PCR和测序检测其pvama1基因DⅠ区域,参考韩国、泰国和巴布新几内亚(PNG)流行区相应序列,采用Dna SP6. 10. 1和Structure软件进行多态性、中性检验和种群结构分析。结果:成功扩增16例中缅边境pvama1基因DⅠ区;各流行区pvama1基因的DⅠ区π值为0. 013~0. 021,且d_N/d_S>1(P<0. 05)。PNG流行区Tajima's D~*值显著大于1(P<0. 05);各流行区pvama1基因分为3个亚群(K=3)。结论:Pvama1基因DⅠ区具有低多态性并经历阳性选择,提示其为红内期疫苗候选靶位;中缅边境、泰国和PNG流行区具有相似的种群结构,提示以其主要单倍体型为基础设计的疫苗具有广泛的保护作用。

摘要：目的本研究利用人体膝关节的CT/MRI二维断层扫描图片数据创建三维模型,并将重建的三维模型以IGES文件输出,可做人体结构的有限元分析等。方法使用逆向工程理论,Mimics逆向工程软件。结果研究人员可以根据特定人膝关节的CT/MRI影像的二维成像数据,通过Mimics逆向工程软件设计并创建三维膝关节模型。结论为膝关节模型数据库的建立提供了方法,给膝关节疾病的治疗,膝关节置换手术,膝关节假体设计提供临床上的精确数据,对假体、植入体的设计意义重大。

摘要：通过研究过去医疗诊断辅助系统(CADS)设计中存在的问题,分析其在临床应用中存在的缺陷,提出一套新型系统的设计方案。运用多元检测理论,利用最大后验概率(MAP)判别准则,把以往累积的经验和知识以规则的形式存入计算机内,建立知识库,用贝叶斯概率分析理论的方式对疾病进行医疗诊断。统计数据表明,该系统具有较高的准确率。由诊断系统和患者信息系统两部分组成的CADS能够很好地满足临床的需求,较好地实现了计算机信息技术在医学诊疗领域的应用。

摘要：[目的]应用Meta分析的方法,评价全膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)中应用固定平台型假体(fixed bearing total knee arthroplasty,FB)和活动平台型假体(mobile bearing total knee arthroplasty,MB)的疗效差异,为临床选择适当类型假体进行TKA术提供依据。[方法]计算机检索Pubmed、EMBASE、Ovid和Cochrane图书馆关于TKA术中应用FB和MB的随机或半随机对照试验,按照文中所述纳入标准收集后进行比较,利用RevMan5.0软件进行异质性分析及Meta分析,绘制森林图。[结果]本文检索了1979～2009年间发表的1 718篇关于TKA术中应用FB和MB的文献,经过筛选和评价,最后收集到已发表的14篇(共1 305例患者)随机或半随机的对照试验,符合本次Meta分析所纳入的试验标准。结果发现两组在KSS评分、关节活动度、患者满意率、放射学指标和假体相关并发症上差异无统计学意义(95%显著区间有重叠)。[结论]相对MB的先进设计理念,现有临床研究结果尚不支持在TKA术中应用MB疗效显著优于FB。

摘要：PBL课程模式是高等医学院校创新教育的重要组成部分。在PBL实施过程中,病例的选择与设计关系到PBL教学的成败。为激发学生独立思考、创新思维及分析问题和解决问题的能力,分别探讨了原始病例和模拟病例的作用及相互关系,提出了病原生物学PBL模拟病例设计过程中应遵循的基本原则,即客观性原则、灵活性原则、一致性原则、启发性原则和关联性原则。