摘要：目的探讨胰十二指肠切除术(PD)后早期生化漏进展为B级胰瘘的预后因素。方法回顾性分析2014年11月至2017年4月于中国医科大学附属第一医院肝胆外科暨器官移植科接受PD术后的190例患者的病历资料。男性112例,女性78例,年龄(73±6)岁(范围:22~77岁)。对可能与生化漏进展为B级胰瘘有关的指标进行单因素及Logistic多因素分析,再选择能够绘制受试者工作特征(ROC)曲线,且经Logistic多因素分析后具有统计学意义的术前指标绘制ROC曲线,计算曲线下面积(AUC),评价该指标的预测价值,针对具有中等预测价值以上的指标设计不同切割点值,计算约登指数等指标,找出具有最大预测效能的临界值。结果190例PD患者术后共发生生化漏81例,其中未进展36例,生化漏进展为B级胰瘘41例,B级进展为C级4例。各临床指标的单因素分析结果显示,术前胰体部平扫CT值及急性胰腺炎、术后3~4 d血小板计数(PLT)、血清前白蛋白和ALT是生化漏进展为B级胰瘘的预后因素。多因素分析结果显示,术前胰体部平扫CT值、急性胰腺炎、术后3~4 d PLT为生化漏进展为B级胰瘘独立预后因素,且术后发生生化漏患者若术前存在急性胰腺炎易进展为B级胰瘘,以及术前胰体部平扫CT值、术后3~4 d PLT越低越易进展为B级胰瘘。术前胰体部平扫CT值的AUC为0.734,CT值界定在39.8 HU时,灵敏度为73.2%,特异度为75.0%,约登指数为0.482,预测效能最高。结论通过对术前胰体部平扫CT值进行分析可判断胰腺质地,术前急性胰腺炎的合理治疗及围手术期适当给予患者提高血小板相关药物可分别预测及预防术后早期生化漏进展为B级胰瘘。

摘要：目的依据血浆中存在游离DNA的理论,采用磁珠作为固相吸附载体并使用特定设计的试剂体系及提取流程,建立一种简便、高效提取尿液样本中游离甲基化DNA的方法,评价其作为用于尿液样本的甲基化基因检测技术的可行性。方法使用磁珠法提取40例成人尿液中游离甲基化DNA,进行甲基化修饰后,紫外分光光度计测定DNA的浓度和纯度。结果结果显示,提取50 m L尿液可得61~200 ng/μL的甲基化DNA,OD260/280为1.8±0.05。使用甲基化阳性对照DNA引物进行PCR及电泳后可见目的条带,说明其纯度可以满足后续甲基化基因检测和PCR等操作要求。结论尿液中确实存在游离甲基化DNA,同时磁珠法提取尿液游离DNA提取过程简单,且提取纯度高,是一种高效的提取方法。

摘要：背景:肝移植后排斥反应发生时,肝细胞被浸润的T淋巴细胞破坏,肝细胞减少,肝功能进行性恶化。诱导肝移植免疫耐受仍然是目前面临的重大课题。目的:观察受体血预先经门静脉输入供体对大鼠移植肝内浸润淋巴细胞凋亡的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2002-05/2004-05在中国医科大学器官移植实验室完成。材料:选用纯系大鼠制作大鼠原位肝移植模型。24只供体为雄性ACI大鼠(RT1a),24只受体为雄性LEW大鼠(RT1l)。方法:大鼠肝移植采用改良的两袖套法进行原位移植。受体大鼠按随机数字表法分为4组,每组6只。对照组未作处理;受体血经阴茎静脉输入组于移植前7d将受体血1mL经阴茎静脉输入供体;非受体血经门静脉输入组于移植前7d将非受体大鼠(BN大鼠)血1mL经门静脉输入供体;受体血经门静脉输入组于移植前7d将受体血1mL经门静脉输入供体。主要观察指标:肝移植后观察大鼠生存时间;移植后检测各组大鼠血清γ-干扰素质量浓度;移植后观察移植肝组织学变化;移植后7d检测移植肝内树突状细胞数量;移植后3,5,7,14d检测移植肝内浸润淋巴细胞的凋亡情况。结果:受体血经门静脉输入组大鼠的生存时间显著长于对照组(P0.05)。受体血经门静脉输入组大鼠移植肝汇管区内的淋巴细胞浸润显著减少,移植肝内检测到大量供体来源的树突状细胞。移植后受体血经门静脉输入组大鼠肝组织切片每平方毫米的凋亡细胞数显著多于对照组(P<0.01)。结论:受体血预先经门静脉输入供体,可以延长异系肝移植受体大鼠生存时间,促进移植肝内浸润淋巴细胞的凋亡。

摘要：目的探讨自行设计并合成的短肽FLPNF抑制过表达人胰岛淀粉样多肽(hIAPP)的大鼠胰岛素瘤INS-1细胞内hIAPP的聚集作用和机制,及其对hIAPP-INS-1细胞增殖活力及胰岛素分泌功能的保护作用。方法以慢病毒转染人hIAPP基因构建的hIAPP-INS-1细胞株为研究对象,用不同浓度的FLPNF处理hIAPP-INS-1细胞并分组,硫黄素T染色法检测细胞内hIAPP的聚集情况,MTS法检测细胞增殖活力,ELISA法检测细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能;根据FLPNF、脑啡肽酶抑制剂单独及联合处理hIAPP-INS-1细胞分组,应用酶活性测定法检测FLPNF对脑啡肽酶活性的影响及硫黄素T染色法检测细胞内hIAPP的聚集情况。结果与空白对照组相比,200μmol/L FLPNF可以明显抑制细胞内hIAPP聚集,绿色荧光强度明显降低(F=14.442,P0.05)。FLPNF可使hIAPP-INS-1细胞内脑啡肽酶活性明显增加,为空白对照组的2.356倍(F=84.265,P<0.01)。同时加入脑啡肽酶抑制剂时,FLPNF抑制hIAPP聚集的作用较单独加入FLPNF组明显降低(F=9.868,P<0.01)。结论FLPNF在hIAPP-INS-1细胞内可以通过增强脑啡肽酶活性,抑制hIAPP的聚集,对细胞的增殖活力及胰岛素分泌功能具有一定的保护作用。

摘要：背景与目的 趋化因子激素受体(CC chemokine receptor7,CCR7)与非小细胞肺癌(non-small celllung cancer,NSCLC)的淋巴结转移密切相关,但CCR7促进其淋巴结转移的机制尚不明了。本研究通过观察CCR7和MMP-9在NSCLC组织中的表达和相互关系,探讨CCR7促进NSCLC淋巴结转移的机制。方法 应用免疫组织化学染色(SP法)检测90例NSCLC组织中CCR7、MMP-9的表达;将BE1细胞经趋化因子CCL19处理24h后,应用RT-PCR和Western blot方法检测MMP-9mRNA和蛋白表达水平。结果 免疫组织化学结果显示:CCR7主要表达于癌细胞胞质和(或)胞膜,MMP-9主要表达于癌细胞胞质,NSCLC中CCR7、MMP-9阳性表达率分别为70%(63/90)和65.5%(59/90),χ2检验显示CCR7和MMP-9表达与NSCLC的临床病理分期(P=0.003,P=0.001)和淋巴结转移(P=0.004,P=0.003)密切相关,而与年龄、组织学类型、分化程度无关(P>0.05)。此外,CCR7和MMP-9表达正相关(r=0.342,P=0.001)。CCL21处理组BE1细胞后MMP-9mRNA和蛋白水平均上调(P<0.05)。结论 CCR7和MMP-9表达与NSCLC侵袭转移密切相关,CCL19/CCR7通过上调NSCLC中MMP-9表达促进其转移。

摘要：根据计算机体层成像(computed tomography,CT)/磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)影像制定合理精准的手术方案是肝胆外科医师的基本功,这需要医师能够通过阅片在头脑中建立起脏器和病灶的立体结构,而这种能力的培训往往是临床教学中的难点。正常肝脏和肿瘤病灶的三维重建技术有助于医学生更好地理解肝脏解剖及肝脏手术方式,大大提高学习效率。本文以临床教学需求为基础,设计并建立了基于互联网和三维可视化技术的肝脏影像快速学习与手术模拟教学系统,阐述了该系统的构架、功能模块及个人计算机(personal computer,PC)/移动端实现过程。