摘要：目的探讨胰十二指肠切除术(PD)后早期生化漏进展为B级胰瘘的预后因素。方法回顾性分析2014年11月至2017年4月于中国医科大学附属第一医院肝胆外科暨器官移植科接受PD术后的190例患者的病历资料。男性112例,女性78例,年龄(73±6)岁(范围:22~77岁)。对可能与生化漏进展为B级胰瘘有关的指标进行单因素及Logistic多因素分析,再选择能够绘制受试者工作特征(ROC)曲线,且经Logistic多因素分析后具有统计学意义的术前指标绘制ROC曲线,计算曲线下面积(AUC),评价该指标的预测价值,针对具有中等预测价值以上的指标设计不同切割点值,计算约登指数等指标,找出具有最大预测效能的临界值。结果190例PD患者术后共发生生化漏81例,其中未进展36例,生化漏进展为B级胰瘘41例,B级进展为C级4例。各临床指标的单因素分析结果显示,术前胰体部平扫CT值及急性胰腺炎、术后3~4 d血小板计数(PLT)、血清前白蛋白和ALT是生化漏进展为B级胰瘘的预后因素。多因素分析结果显示,术前胰体部平扫CT值、急性胰腺炎、术后3~4 d PLT为生化漏进展为B级胰瘘独立预后因素,且术后发生生化漏患者若术前存在急性胰腺炎易进展为B级胰瘘,以及术前胰体部平扫CT值、术后3~4 d PLT越低越易进展为B级胰瘘。术前胰体部平扫CT值的AUC为0.734,CT值界定在39.8 HU时,灵敏度为73.2%,特异度为75.0%,约登指数为0.482,预测效能最高。结论通过对术前胰体部平扫CT值进行分析可判断胰腺质地,术前急性胰腺炎的合理治疗及围手术期适当给予患者提高血小板相关药物可分别预测及预防术后早期生化漏进展为B级胰瘘。

摘要：目的依据血浆中存在游离DNA的理论,采用磁珠作为固相吸附载体并使用特定设计的试剂体系及提取流程,建立一种简便、高效提取尿液样本中游离甲基化DNA的方法,评价其作为用于尿液样本的甲基化基因检测技术的可行性。方法使用磁珠法提取40例成人尿液中游离甲基化DNA,进行甲基化修饰后,紫外分光光度计测定DNA的浓度和纯度。结果结果显示,提取50 m L尿液可得61~200 ng/μL的甲基化DNA,OD260/280为1.8±0.05。使用甲基化阳性对照DNA引物进行PCR及电泳后可见目的条带,说明其纯度可以满足后续甲基化基因检测和PCR等操作要求。结论尿液中确实存在游离甲基化DNA,同时磁珠法提取尿液游离DNA提取过程简单,且提取纯度高,是一种高效的提取方法。

摘要：目的探讨自行设计并合成的短肽FLPNF抑制过表达人胰岛淀粉样多肽(hIAPP)的大鼠胰岛素瘤INS-1细胞内hIAPP的聚集作用和机制,及其对hIAPP-INS-1细胞增殖活力及胰岛素分泌功能的保护作用。方法以慢病毒转染人hIAPP基因构建的hIAPP-INS-1细胞株为研究对象,用不同浓度的FLPNF处理hIAPP-INS-1细胞并分组,硫黄素T染色法检测细胞内hIAPP的聚集情况,MTS法检测细胞增殖活力,ELISA法检测细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能;根据FLPNF、脑啡肽酶抑制剂单独及联合处理hIAPP-INS-1细胞分组,应用酶活性测定法检测FLPNF对脑啡肽酶活性的影响及硫黄素T染色法检测细胞内hIAPP的聚集情况。结果与空白对照组相比,200μmol/L FLPNF可以明显抑制细胞内hIAPP聚集,绿色荧光强度明显降低(F=14.442,P0.05)。FLPNF可使hIAPP-INS-1细胞内脑啡肽酶活性明显增加,为空白对照组的2.356倍(F=84.265,P<0.01)。同时加入脑啡肽酶抑制剂时,FLPNF抑制hIAPP聚集的作用较单独加入FLPNF组明显降低(F=9.868,P<0.01)。结论FLPNF在hIAPP-INS-1细胞内可以通过增强脑啡肽酶活性,抑制hIAPP的聚集,对细胞的增殖活力及胰岛素分泌功能具有一定的保护作用。