摘要：为了解国内鸡蛋生产的耗水情况,探究不同蛋鸡养殖模式和蛋鸡品种对耗水情况的影响,研究利用水足迹核算方法分析评价中国5家蛋鸡养殖场的鸡蛋生产耗水情况。结果显示:5家蛋鸡养殖场的鸡蛋水足迹为2537.69~3446.85 m^(3)/t,其中,绿水足迹为1653.02~2314.94 m^(3)/t,蓝水足迹为484.07~616.65 m^(3)/t,灰水足迹为400.60~515.26 m^(3)/t,养殖场A中海兰褐和海兰灰品种的鸡蛋平均总水足迹分别为3042 m^(3)/t和3224 m^(3)/t;5家养殖场的鸡蛋水足迹中绿水足迹占比最高,达到66.75%,饲料消耗是影响鸡蛋水足迹的主要因素;养殖场A的鸡蛋水足迹最高,养殖场E最低;相比于海兰褐品种,海兰灰品种产蛋所消耗的饲料量、直接和间接用水更多。建议通过优化饲料配比、提高农业用水效率、增设养殖场的节水设施设备并选择适宜的蛋鸡品种能够有效降低鸡蛋水足迹。

摘要：目的通过组织实施奶粉中沙门菌的能力验证,对国内实验室的沙门菌检测能力进行分析和评价。方法采用人工污染的方式制备奶粉中沙门菌能力验证样品,即菌种复苏、增菌后配制成菌悬液加入配制好的复原牛乳中混匀分装,进行冷冻干燥;对制备好的样品进行均匀性检验和稳定性检验。本次能力验证设计3组不同的能力验证样品,每个实验室随机发送2个样品,将各参加实验室提交的检测结果与指定值比较,评定各参加实验室的测试结果为满意或不满意(假阴性或假阳性)。结果全国共337家实验室参加该项沙门菌的检测能力验证,有满意结果的实验室323家,满意率为95.8%,有不满意(假阴性和假阳性)结果的实验室14家,占比为4.2%。共向实验室发送674个样品,658个结果满意,满意率为97.6%;16个样品结果不满意(假阴性或假阳性),占比为2.4%。结论采用不同组别的样品随机编号且随机发样的方式,取得了良好的考核效果;本次人工污染方式制备的能力验证样品,充分考虑了目标菌、类似干扰菌和背景菌,制备的样品与实际样品一致性较好,考核效果良好。能力验证评价结果表明,全国参加考核的实验室奶粉中沙门菌检测能力总体较好,少部分实验室的检测能力有待改进提高。

摘要：【目的】纳米孔测序技术是单分子实时测序技术的一种,正在被广泛应用于临床快速诊断及微生物检测等领域。本研究以实蝇这一类重要的检疫性有害生物为例,探究该技术在昆虫检疫鉴定中应用的可行性,为昆虫检疫鉴定提供新方法。【方法】分别采用一代测序技术和纳米孔测序技术,对14种经形态学鉴定的实蝇成虫进行DNA条形码测序,通过BOLD和NCBI数据库对测序结果进行比对分析,并比较2种测序技术所得序列结果准确性的差异。【结果】通过纳米孔测序,14个实蝇样品在44 min内获得181Mb bases,每个样品平均得到11280条reads,单个reads的准确度为92.10%~94.53%;经一致性序列校正,所有实蝇样品均可得到与一代测序结果完全一致的序列,序列分析结果与形态学鉴定结果完全一致。【结论】采用本研究的实验流程和数据分析方法,纳米孔测序技术可以应用于实蝇类害虫的检疫鉴定,测序结果准确、高效;本研究提供的实验方案同样适用于基于扩增子测序的物种鉴定,满足大规模样品的高通量精准鉴定需求。

摘要：为能快速检测阿胶中驴、马、猪源性成分,建立了三重环介导等温扩增(LAMP)检测方法。针对驴、马、猪线粒体基因的保守区域,设计并筛选出3套LAMP特异性引物。通过优化反应条件,建立三重LAMP方法,将检测为阳性的产物进行酶切法鉴定,判断样本中驴、马或猪源性成分。驴、马和猪的检测限分别为7.9×10^(-3)、1.36×10^(-3)ng和8.5×10^(-2)ng。结果表明该检测方法操作简便、特异性强、灵敏度高,适合于市场阿胶真伪鉴别与驴、马和猪源性成分的鉴定。

摘要：为建立一种快速诊断猴痘病毒(MPXV)的检测方法,根据2022年公布的MPXV的靶基因片段F3L(462 bp,GenBank登录号ON563414)保守区域,设计了1对特异性的引物和1条探针,建立了猴痘病毒荧光定量PCR检测方法。结果显示,本方法仅能有效检测MPXV,与天花病毒、牛痘病毒、痘苗病毒及鼠痘病毒均无交叉反应;对重组质粒标准品的最低检测限为36.5 copies/μL;组内与组间的重复试验变异系数均小于2%;该方法与中国计量科学研究院使用的绝对定量数字PCR方法检测F3L假病毒颗粒的结果一致性达100%。由此表明,本研究中建立的检测方法特异性强、敏感性高、重复性和实用性好,可以用于猴痘病毒的快速鉴别诊断,为口岸进境动物和入境人员的筛查提供了有效的技术手段。

摘要：植物检疫是一种生物安全措施,通过立法手段防止植物及其产品在流通过程中传播有害生物。检测鉴定是植物检疫措施实施的核心。该文概述植物检疫的作用及其面临的挑战、植物检疫检测技术的应用现状及发展趋势,并对多组学时代下植物检疫检测技术进行展望。

摘要：以特洛维塔、早金、哈姆林3种甜橙为原料,按照市售橙汁的主要生产工艺,模拟制备非复原(not from concentrated,NFC)橙汁和复原(from concentrated,FC)橙汁。针对甜橙叶绿体成熟酶K蛋白基因(maturase K,matK)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶基因(nicotinamide adenine dinucleotide dehydrogenase,ndhF),共设计8对引物用以扩增得到不同长度的目标条带,结合聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)技术分析了鲜榨、均质、巴氏杀菌、浓缩、二次巴氏杀菌关键加工工艺,对特洛维塔橙汁叶绿体matK和ndhF基因的DNA降解变化的影响,探讨NFC橙汁与FC橙汁DNA降解程度的差异,筛选出NFC橙汁和FC橙汁的特征差异性片段组,建立基于PCR-CE技术的NFC橙汁与FC橙汁鉴别方法。该方法适用于分析货架期内的NFC橙汁与FC橙汁,且同样适用于早金和哈姆林甜橙为原料的NFC橙汁与FC橙汁的鉴别。应用该方法对市售NFC橙汁进行检测,发现市售NFC橙汁存在标签不符的现象。本研究建立的基于PCR-CE技术的NFC橙汁与FC橙汁定性鉴别方法可以为果汁行业的有效监管提供技术支撑。

摘要：谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)是合成CHO细胞生长所需要的谷氨酰胺的关键酶。为了获得能快速稳定表达外源蛋白的CHO细胞GS筛选系统,根据CRISPR/Cas9技术原理,针对GS基因设计3对sg RNA,分别将连接sg RNA的pX459质粒转染至CHO-K1细胞中以便定向敲除GS基因;经筛选后利用PCR及测序分析鉴定GS基因敲除情况;将GS基因敲除的CHO细胞株(CHO^(GS-/-))分别在含有外源谷氨酰胺培养基与无谷氨酰胺培养基中进行培养,观察细胞的生长状态,绘制生长曲线,并验证该CHO^(GS-/-)细胞株中外源基因的表达能力。结果显示,sg RNA3与sg RNA4共转染能高效双靶位敲除CHO细胞中的GS基因;生长曲线显示CHO^(GS-/-)细胞在富含谷氨酰胺的培养基中生长速度正常或无差异,但无法在无谷氨酰胺的培养基中存活,这表明GS基因功能被破坏;外源基因表达水平及功能验证显示,敲除GS基因后不影响外源单抗在细胞中的表达。这表明,借助CRISPR/Cas9敲除系统获得了CHO^(GS-/-)细胞,大大提高了稳定转染外源基因阳性细胞株的筛选效率,为后期利用CHO细胞大量发酵表达蛋白技术建立了坚实的分子生物学平台。

摘要：有害生物防控是生物安全工作的必要组成部分;切断传播途径是做好有害生物防控工作的重要环节;市场流通作为有害生物的主要传播途径之一,加强监管将有助于有害生物的综合防控。近年来,市场监管部门已开展了一些生物安全工作,《中华人民共和国生物安全法》的出台,对市场监管领域植物生物安全工作又提出了更高的要求。本文对开展市场监管领域植物生物安全工作的必要性、市场监管领域植物生物安全工作现状及存在问题进行了分析,并就顶层设计、科技体系建设、人才队伍建设、加强宣传等几方面提出了建议。

摘要：随着人民生活水平的提高,食品安全问题也越来越受到社会关注,其中生物(微生物)因子是影响食品安全的最主要因素。食品安全研究领域针对生物(微生物)因子的检测技术众多,其中等温扩增技术因不需依赖复杂的仪器设备,能够快速、准确地进行生物成分检测而被广泛应用,尤其是新发展起来的重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)、重组酶介导等温扩增(recombinase-aided amplification,RAA)和酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)技术。这3种等温扩增技术相对于其他等温扩增技术具有反应条件更温和、引物设计更简单等优点,且检测原理相似,本文对这3种技术进行对比研究,从原理、概念以及近年来在食源性致病菌快速检测方面的研究应用情况进行综述,概括其在食品检测中的优势和面临的实际问题,并对未来的发展前景进行展望。