摘要：为了寻求新型表达系统来研制戊型肝炎基因工程疫苗,利用甲基营养型汉逊酵母(Hansenulapolymorpha)系统表达戊型肝炎病毒(HepatitisEvirus,HEV)Ⅳ型结构区ORF2编码蛋白第112-607氨基酸片段。为实现目的基因在汉逊酵母中的高效表达,根据汉逊酵母偏爱密码子优化设计目的基因,用搭桥PCR法合成优化后的基因序列,并克隆到多拷贝表达载体上,转化汉逊酵母营养缺陷宿主菌ATCC26012(Ura3-),在选择培养基上培养,运用PCR法筛选得到携带外源基因的重组菌株,然后用含甲醇的培养基诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE、ELISA和Westernblot检测和鉴定。SDS-PAGE实验结果表明目的蛋白分子量约为56kD,表达量占菌体总蛋白的12%;ELISA检测结果表明表达产物为具有免疫反应性的HEVORF2蛋白,ELISA效价最高可达1∶2048,目的蛋白表达量随着基因拷贝数的增加呈升高的趋势;Westernblot鉴别实验结果证实表达产物与HEV多抗有特异性抗原抗体结合反应。HEV结构区ORF2蛋白在汉逊酵母中的成功表达,为研制基因工程戊型肝炎疫苗奠定了基础。

摘要：目的　在静脉吸毒人群队列研究现场 ,通过 6个月随访核实参加者个人联系信息的真实情况初步探讨其影响因素。方法　自 2 0 0 3年 5～ 6月在四川省西昌市以社区为基础的HIV阴性的静脉吸毒人群队列研究 6个月随访中 ,使用设计好的调查表通过现场工作人员和种子调查 333名队列参加者个人联系信息真实情况。结果　本次随访研究对象按约定期限完成回访的占 73 3%。 2 8 5 %的参加者在队列招募时提供虚假个人联系信息 ,在单因素和多因素Logistic回归模型分析中具有统计学意义的变量是年龄、文化程度和居住情况。影响联系信息真实性的多因素Logistic回归模型分析中具有统计学意义的变量是年龄、文化程度、居住情况。提供虚假个人联系信息的参加者回访率 (4 4 2 % )明显低于提供真实联系信息的参加者回访率 (84 9% ) ,在调整了人口学和高危行为因素等变量后 ,发现联系信息真实性与随访保持率有关。结论　需进一步调查队列研究中的静脉吸毒人群提供虚假个人关系信息的情况及其影响因素。

摘要：目的 比较在门诊患者中实施病症筛查和抽血患者全员筛查策略在促进HIV感染者多发现、早发现方面的效果.方法 于2011年7-11月,采用流行病学类实验设计方法,在广西壮族自治区选取艾滋病流行水平、人口和医疗资源均相近的L县和J县的县医院门诊部为研究现场,分别实施HIV病症筛查策略和抽血患者全员筛查策略,并选取两所医院15岁以上的就诊患者为研究对象,分别为62 106和58 057人次.在实施策略期间,收集两所医院各科室门诊逐月就诊人次数,通过医院HIV筛查实验室检测记录获取不同科室患者检测情况、初筛阳性结果.采用x2检验比较两种策略在新发现HIV阳性者比例、HIV阳性检出率和HIV阳性者早期感染等指标上的差异.结果 实施抽血患者全员筛查策略的J县县医院和实施病症筛查策略的L县县医院门诊患者中,接受HIV检测的比例分别为9.69％ （527/58 057）和1.38％（859/62 106）；年龄分别为（46.23±16.81）、（40.75±15.48）岁,差异有统计学意义（t=8.81,P＜0.05）；J县县医院新发现HIV阳性者比例[0.03％（19/58 057）]高于L县[0.02％（10/62 106）]（P＜0.05）,而J县县医院HIV阳性检出率[0.34％（19/5627）]低于L县[1.16％ （10/859）]（x2=9.66,P＜0.05）.结论 医疗机构实施抽血患者全员筛查策略相对病症筛查策略可以发现更多HIV感染者.

摘要：目的通过抗原特异性记忆B细胞(Memory B)分选、抗体基因克隆表达和鉴定方法,从艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者中获得HIV-1中和抗体,并进一步探讨获得抗体的特征。方法通过检测血浆中和抗体活性和表位筛选,挑选出1例含有CD4结合位点(CD4bs)特异性抗体的慢性HIV-1感染者。采用一对含有/缺失CD4-bs的探针RSC3/ΔRSC3进行Memory B分选,获得抗体可变区基因后进行抗体的表达纯化,并检验所得抗体的结合能力和中和能力。结果从9×106外周血单核淋巴细胞(PBMCs)中分离得6个特异性Memory B。通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增出3对重链和轻链可变区基因,配对得到3个抗体,其中有一个抗体具有HIV-1CD4bs结合能力。中和实验表明,这个抗体能中和毒株SF162[50%抑制浓度(IC50=0.89μg/mL]。抗体可变区基因家系分析表明,该抗体属于IGHV1-18家系,重链可变区(VH)自体突变率为12%,低于广谱中和抗体VRC01VH的自体突变率(32%)。结论建立的单克隆特异性Memory B分选方法,可以获得有中和能力的抗体。该平台有希望获得具有我国自主知识产权的广谱中和抗体,并为开发抗体药物和设计新型免疫原提供技术支持。

摘要：目的了解云南省美沙酮门诊就诊人群丙型肝炎(简称丙肝)防治知识知晓状况及影响因素。方法选择云南省4县区的社区美沙酮维持治疗门诊(简称美沙酮门诊)为研究现场,采用中国疾病预防控制中心设计的电子调查问卷对所有符合条件者进行一对一调查。结果调查对象丙肝相关知识总体知晓率为79.9%,问卷中22道题回答正确率为53.0%~94.2%,平均得分为(17.6±4.1)分,但丙肝治疗(均<60%)及母婴传播相关知识(68.6%)知晓率较低;多因素分析显示,宣传教育[接受宣传教育者:比值比(OR)=9.82,95%可信区间(CI):5.19~18.57]、调查对象的就业状况(就业者:OR=0.29,95%CI:0.16~0.55)、文化程度(文盲:OR=0.12,95%CI:0.03~0.55;小学文化:OR=0.30,95%CI:0.10~0.91)以及美沙酮治疗时间(≤5年:OR=0.34,95%CI:0.15~0.77)为知晓率的影响因素(P均<0.05)。结论调查对象的丙肝防治知识知晓程度较高,但未来的工作中应进一步加强丙肝治疗和母婴传播知识的宣传,并重视对该人群中文化程度低及就业者的宣传。

摘要：本研究中的复合型疫苗是采用双疫苗组分.DNA疫苗和重组痘病毒载体疫苗(简称“痘苗”),免疫策略为“ptime-boost”方案。本研究设计了DNA单独免疫、复合型疫苗以及痘苗单独免疫1次和2次的毒性研究。并且根据其体液免疫和细胞免疫的特点,检测其免疫原性、免疫毒性相关指标,进行了DNA疫苗和痘苗的DNA分布研究。建立了对DNA疫苗以及重组病毒载体疫苗进行安全性研究的试验体系。[第一段]

摘要：目的了解北京市公共服务场所流动青少年艾滋病知识知晓情况及其影响因素,为开展流动青少年艾滋病健康教育、控制艾滋病在流动青少年中传播提供参考依据。方法选取2014年北京市海淀区和顺义区公共服务从业人员体检中心前来体检的全部16～24岁流动青少年为调查对象,采用自行设计的调查问卷对其进行艾滋病相关知识知晓情况调查。使用SPSS 17.0进行统计分析。结果共获取有效问卷2182份,调查对象艾滋病知识知晓率仅为31.0%。艾滋病主要传播途径相关知识知晓率较高,艾滋病检测相关知识知晓率较低,对题目＂病毒感染之初的窗口期内,检查结果是阴性的＂知晓率仅为23.3%。二元Logistic回归分析结果显示,男性[比值比（OR）=1.332]、已婚（OR=1.909）、文化程度在本科及以上（OR=3.943）和接受过艾滋病教育（OR=1.774）等,是公共服务场所流动青少年艾滋病知识知晓情况的保护性因素。结论北京市公共服务场所流动青少年艾滋病相关知识知晓率较低,尤其缺乏对艾滋病检测相关知识的了解。应采取措施提高流动青少年的受教育水平,加强艾滋病健康教育。

摘要：目的了解活跃于移动互联网的大学生MSM最近1年HIV检测现状及相关因素。方法按照横断面调查设计，基于中国同性恋流行使用的一款同性恋社交软件Blued，按18—25岁大学生MSM的HIV检测率50％推算样本量为500人。于2016年9月开始手机端电子问卷调查，主要收集人口学特征、HIV检测行为、性行为等信息。采用疋。检验和非条件logistic回归分析大学生MSM最近1年HIV检测的相关因素。结果共调查1384名大学生MSM，平均年龄（20．99±0．04）岁，最近1年HIV检测比例为47．1％（652／1384）。多因素分析结果显示：听说过HIV检测（OR=6．37，95％CI：3．592。11．300），愿意定期接受HIV检测（OR=2．64，95％CI：1．191—2．631），部分了解（OR=3．58，95％CI：2．138～5．996）和完全不了解（OR=2．25，95％CI：1．479—3．422）固定性伴HIV感染状况皆使大学生MSM的HIV检测可能性增加；信任固定性伴无感染HIV风险（OR=0．65，95％CI：0．445-0．938），最近1年固定性伴仅为1人（OR=0．37，95％CI：0．232—0．589）使大学生MSM的HIV检测可能性降低。结论活跃于移动互联网的大学生MSM人群最近1年HIV检测比例较低，该群体性行为活跃，固定性伴间相互信任，或仅为1人的原因，反而使HIV检测比例更低，应予以重视。

摘要：目的建立快速鉴定广西HIV-1主要流行亚型CRF01_AE、CRF07_BC、CRF08_BC、B和C的多重巢式PCR方法。方法针对HIV-1gag基因设计CRF01_AE、CRF07_BC、CRF08_BC、B和c亚型特异性引物，建立多重巢式PCR法，用该法鉴定来自广西的HIV-1毒株的亚型，并与基因测序法的鉴定结果比较。结果多重巢式PCR法能正确鉴别5种已知亚型的样本，10份HIV阴性样本均无扩增，在72份未知亚型样本中，正确鉴定出66份，分别属于CRF01_AE、CRF07BC、CRF08_BC、B亚型，多重巢式PCR法的灵敏度为91.7％，特异度达100％。结论多重巢式PCR法能准确鉴定广西CRF01_AE、CRF07_BC、CRF08_BC和B亚型毒株，是_种简便、快速、低成本的亚型鉴定方法。

摘要：目的了解天津市高一学生艾滋病知识知晓率及其相关因素,与艾滋病健康教育需求情况。方法采用横断面调查设计,采用分层整群抽样与方便抽样相结合的方法,选取天津地区高中2所、职业高中1所,对所有高一学生进行匿名调查。问卷内容包括一般人口学特征、艾滋病相关知识、艾滋病健康教育需求信息等条目。结果调查对象共1082人,艾滋病知识知晓率为34.3%(371/1082)。既往接受过艾滋病知识的比例为71.9%(778/1082),既往接受过性健康知识的比例为59.4%(643/1082),2类学校间差异有统计学意义;发生插入性性行为的比例为7.0%(76/1082)。多因素logistic回归分析结果显示,职业高中(与普通高中相比,OR=0.41,95%CI:0.29~0.59)、无性健康知识需求(与有需求相比,OR=0.62,95%CI:0.43~0.91)、未关注艾滋病宣传材料(与关注相比,OR=0.41,95%CI:0.30~0.56)、不知晓安全性行为(与知晓相比,OR=0.55,95%CI:0.39~0.77)和不知晓正确使用安全套(与知晓相比,OR=0.33,95%CI:0.24~0.46)的调查对象艾滋病知识知晓率较低。结论调查的天津市高一学生艾滋病知识知晓率普遍较低,有的学生发生过插入性性行为。性健康知识对艾滋病知识有显著影响,需加强高中生的性健康教育和艾滋病健康教育工作。