摘要：狂犬病病毒(rabies virus,RABV)是狂犬病的最主要病原体,属于弹状病毒科(Rhabdoviridae)狂犬病病毒属(Lyssavirus),是有包膜的单股负链RNA病毒。RABV基因组编码核蛋白(nucleoprotein,N)、磷蛋白(phosphoprotein,P)、基质蛋白(matrix protein,M)、糖蛋白(glycoprotein,G)和依赖于RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)共五种结构蛋白。N蛋白主要在病毒的转录与复制过程中发挥重要作用,多用于诊断和病毒鉴定;P蛋白可与一些宿主的蛋白伴侣相互作用,颠覆抗病毒信号通路,影响RABV的致病性;M蛋白则在调节病毒转录与复制之间的平衡方面起重要作用;G蛋白是诱导中和抗体的靶点,融合前其三聚体结构的解析、融合环对G蛋白成功三聚体化和构象稳定的影响,以及有效和广谱中和抗体表位的可视化等为研发广谱疫苗提供了依据;而RdRp蛋白主要催化病毒RNA进行转录。近年结构蛋白晶体结构的解析、相关功能位点以及与小分子相互作用等方面的研究,有助于研究者更好地了解RABV的致病机理、寻找有效抗病毒药物靶点以及设计更广谱的疫苗。

摘要：评价一种SARS-CoV-2 Beta变异株和甲型流感病毒H3N2新型重组双价疫苗在小鼠模型中的免疫保护效果。本研究构建了表达SARS-CoV-2南非变异株(B.1.351)棘突蛋白1(S1)和H3N2柬埔寨分离株(A/Cambodia/e0826360/2020)血凝素(HA)的重组双价非复制Ad5载体疫苗,命名为HAdV5-S1-2A-HA,经单针肌肉注射免疫BALB/c雌鼠后,采用ELISA、血凝抑制实验、假病毒中和实验与Elispot实验进行体液与细胞免疫学检测,免后3~6周采用H3N2-X31病毒、H1N1-PR8与SARS-CoV-2(B.1.351)进行攻毒保护实验。HAdV5-S1-2A-HA免疫两周后,低剂量组(1×10^(8)vp/只)免疫小鼠后可检出HA特异体液免疫与S1特异的细胞免疫应答;而高剂量组(5×10^(9)vp/只)诱导小鼠产生了较强的双抗原(S1,HA)特异的体液和细胞免疫应答,并能完全保护小鼠对H3N2-X31攻击,降低SARS-CoV-2(B.1.351)感染后小鼠肺部病毒载量,延迟H1N1-PR8病毒感染后小鼠死亡发生。本研究制备的重组双价疫苗HAdV5-S1-2A-HA在小鼠体内诱导抗原特异的体液与细胞免疫应答。同时,它还可以在小鼠中诱导对SARS-CoV-2和H3N2感染的免疫保护,具有较好的研发与应用前景。