摘要：目的 建立鉴定布鲁杆菌属及种的膜基因芯片技术方法.方法 试验菌株羊种标准株16M,牛种标准株544A,猪种标准株1330S;临床标本羊种81190,牛种80176、104M,猪种80177、19971、19972,共9个样本,均为中国疾病预防控制中心鼠布基地菌种库保存.提取各菌种DNA,进行PCR扩增,并以耶尔森菌O∶9为对照.设计布鲁杆菌鞭毛蛋白基因flhA保守片段中两个位点（379、576）的单个核苷酸多态性探针,在探针中引物入生物素,并将探针固定在膜上,制成膜芯片,与目的片段进行杂交,用生物素显色技术检测目的片段.结果 9个样本的扩增产物长度均为357 bp,与预期结果一致.与布鲁杆菌有相同抗原的耶尔森菌O∶9无特异性PCR产物产生.在鞭毛蛋白基因序列379和576两个核苷酸位点上,猪种为379G和576C,牛种为379T和576T,羊种为379T和576C,与所设计探针序列完全相同.经膜基因芯片实验验证,猪种菌株在379G、576C及F位点（公共探针）显色;牛种菌株在379T、576T及F位点显色;羊种菌株在379T、576C及F位点显色.结论 膜基因芯片可用于布鲁杆菌属和种的鉴定,且是一种优越的鉴定方法.

摘要：目的采用布鲁菌实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法，探讨布鲁菌的早期、快速检测，为临床医生对布鲁菌感染的诊断提供指导。方法根据布鲁菌表面蛋白31基因序列设计引物和探针，建立布鲁菌实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法，并验证反应体系的特异性（布鲁菌标准株16M、544A、1330S、菌苗株104M，参考菌株小肠结肠炎耶尔森菌O：9、大肠埃希菌O：157）、重复性（4种不同浓度的标准品），分析反应体系的最低检测限。结果所建立的检测方法仅能对布鲁菌进行特异性扩增：反应体系中不同底物浓度与循环（Ct）值之间呈良好的线性关系（Y=-2．77X＋43．19，R2=0．9948），反应体系的最低检测限为1×103 copies／ml；对布鲁菌标准株16M、544A、1330S与104M的检测结果为阳性，0：9型小肠结肠炎耶尔森菌、0：157大肠杆菌的检测结果为阴性；4种不同浓度的标准品和阴性质控品进行4次重复检测。变异系数分别为0．15％、0．16％、0．23％、0．18％。结论利用实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法，可快速、准确地检出布鲁菌，对临床布鲁菌病的诊断有指导意义。