摘要：测定被调控蛋白保护的DNA顺序是阐明基因调控机制的必不可少的环节.为此,通常先将被保护的DNA片段克隆到合适的质粒上,再用化学法测定被调控蛋白保护的DNA序列.但此法操作步骤繁多,又要求多量的DNA,测定的灵敏度也较低.我们设计了“足迹测序”法,它能直接、快速测定已克隆的被蛋白保护的DNA序列.已用此法测定了和结瘤调控蛋白专一性结合的DNA序列.

摘要：除传统的加热杀菌及辐照保鲜食品技术外,目前国外正在研究高压力(hydrostatic pressure)食品加工法。食品经此法处理后,可杀死绝大多数细菌,且仍能保持食品新鲜及原味,不会破坏其营养成分。这项技术已被国外列为10大关键科技之一。近来,作者以大肠杆菌为模型,研究了高压力的大小、施压时间及施压时的温度对其存活率的影响。 1 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 菌株:大肠杆菌(Escherichiacoli No.44156)购自上海市卫生防疫站菌种室。 1.1.2 仪器:高压力设备按Paladini和Weber的设计,作者自行研制,可产生1～2500bar压力。 1.1.3 LB培养基(％):胰蛋白胨1,酵母抽提粉0.5,NaCll,pH 7.5,琼脂1.5。

摘要：基于噬菌体展示的结果 ,对三种拟糖多肽与葡糖淀粉酶的相互作用进行了分子动力学模拟 .计算机模拟结果表明 ,多肽N 端碱性氨基酸残基可与酶的活性中心结合 .在此基础上 ,设计并用液相法合成了 3个三肽 (RSA ,KSA ,RCA) ,用于制备与葡糖淀粉酶或α

摘要：作为肿瘤疫苗,重组痘苗载体具有很多优点,如安全,表达效率高,基因组容量大,对热稳定,成本低廉,表达产物近乎天然构型,能产生有效免疫应答,构建操作简便,转导高效快速,以及可口服给药等。当构建重组痘苗病毒时,要考虑痘苗病毒自身的一些分子生物学特性,如痘苗病毒的RNA聚合酶只识别其自身的转录调控序列、RNA剪接能力的缺乏、具有特殊的转录终止序列TTTTTNT等。用痘苗载体作肿瘤疫苗研究也要遵循一套基本程序,即选取适宜的肿瘤抗原,设计动物模型,构建表达肿瘤抗原的重组痘苗病毒,小动物试验,大动物试验,人体自愿者试验和Ⅰ期临床试验等。近年采,重纽痘苗载体在表达细胞因子、肿瘤抗原和共刺激分子等方面已取得重要进展,但仍有一些潜在问题有待解决。

摘要：增殖细胞核抗原(PCNA)是DNA聚合酶δ的辅助蛋白,它是细胞染色体DNA复制所必需的。人工设计的ribozyme具有可特异地切割PCNA mRNA的性质,将此ribozyme的自修剪体内表达质粒导入HeLa细胞,从细胞总RNA中分离相应部分能在体外切割靶RNA片段,证明此表达质粒在细胞内能表达出有活性的ribozyme分子。与对照相比,导入ribo-zyme表达质粒的HeLa细胞进入S期的时间从12 h推迟到20 h,而突变ribozyme的对照表明反义抑制对细胞进入S期的影响较小(推迟到15 h)。证明该ribozyme能有效抑制He-La细胞DNA复制,同时亦证明PCNA对于细胞DNA复制及细胞周期进程的重要性。

摘要：近年来出现了多种新型抗生素。它们比目前常用的抗生素优点更多,而且很多种除抗细菌外,还能抑制和杀灭支原体,这对于细胞培养工作者无疑是一大“福音”。但目前,这些抗生素大都还没有在国内广泛使用,而且有关它们的文献分散在各种医学和药学杂志上,查阅不便。为了有针对性地设计杀灭支原体的配方,有必要将国际上发表的有关文献加以整理,以便应用。

摘要：用自行设计的能专一切割家蚕核多角体病毒即刻早期蛋白（BmNPVIE）mRNA上三个位点的三联体ribozyme－R426（由R47，R208和R687三个ribozyme串联而成），构建了在家蚕细胞中瞬时表达的质粒pGL2Rz。为了检测和筛选的方便，在BmNPVIE启动子和R426之间装入了荧光素酶基因。细胞实验的结果表明，Bm－N细胞转染36小时，荧光素酶基因的表达已达最高峰；细胞中抽提的R426的体外切割反应表明，单体R47和R208具有切割活性，而检测不出R687的切割条带。与体外转录的R426比较，细胞中抽提出的R426的活性明显降低。对表达R426的细胞进行野生型病毒BmNPV的感染实验表明，与仅表达荧光素酶基因的对照比较，细胞中形成的多角体减少约30％。

摘要：本文针对苜蓿夜蛾Autographa californica核多角体病毒的多角体蛋白mRNA设计并合成了两个ribozyme。体外实验结果表明它们都能准确、高效地切割体外转录得到的mRNA片段。实验表明,在一定的范围内,切割百分率随着温度的升高、时间的延长和ribozyme浓度的提高而增加。Ca^(2+)、Mn^(2+)可以代替Mg^(2+)作为ribozyme切割反应所必需的二价金属离子。

摘要：本文分析了已分离提纯的12个抗菌肽的一级结构特征,划分出作为12个抗菌肽基本成分的3类保守氨基酸,确认抗菌肽序列的前半部分对于活性有主要页献。根据Garnier定向信息法分析了12个抗菌肽的二级结构,结果证实了12个抗菌肽均有形成N端螺旋的倾向。这提示了用两亲性螺旋解释抗菌肽的抗菌机制,在此基础上设计了3个新的抗菌肽。理论计算表明:新肽的N端螺旋度增加,而C端螺旋保持完整,推测其抗菌活性应较已知的12个抗菌肽为高。

摘要：本文研究了反义核酸(Antisense Nucleic Acids)对小鼠腹水瘤病毒(SRSV),M-MuLV反转录病毒之一种的抑制作用.设计和合成了不同序列,长度和核苷酸间磷酸根有无修饰等几种脱氧寡核苷酸片段,对经SRSV感染后的宿主细胞(NIH 3T3)的生长抑制和对无病感染的3T3正常细胞的毒性作用进行了试验.发现互补于病毒RNA基因5’端引物tRNA区序列的片段和均聚体脱氧胞嘧啶寡核苷酸片段(Homooligo-dC14)效果很好,病毒感染后宿主细胞生长抑制达到90％,并且在动物身上进行毒性试验,结果表明无毒性作用.对均聚体脱氧胞嘧啶寡核苷酸片段作了感染细胞内的反转录酶活力和细胞融合试验等,结果均与对照组有明显差别;并对它的作用机制进行了讨论. 提出上述效果很好的两种反义核酸片段是两种具有很大潜力的抑制SRSV反转录病毒的化合物.