摘要：设计了一种简便的检测抗半抗原抗体的放射免疫方法(RIA)。它的特点是:可以用免疫原(半抗原—载体)标记^(125)I作抗原,通过载体的竞争结合,能特异地检测以半抗原—载体免疫的抗血清中的抗半抗原抗体。这样免避了检测抗半抗原抗体的一般方法所要求的必须有两种不同载体的半抗原—载体复合物,分别用于动物的免疫和抗半抗原抗体的检测。因此,本设计省略了一种半抗原—载体的制备,对偶联方法繁复的半抗原、载体来说尤有意义。本检测方法也具有RIA的一般特点,即对标记的半抗原—载体的需求量远比ELISA所需求的量少,这对来源稀少,价格昂贵的半抗原来说,尤其对样品数大的筛选杂交瘤中的应用来说是十分重要的。实验还表明本检测方法可以特异地检测杂交瘤培养物上清液中的抗半抗原抗体,方法的灵敏度甚高。

摘要：根据文献报道垂体腺苷酸环化酶激活肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAP)的氨基酸序列 ,推导出其核苷酸序列并设计成部分互补的 6条寡核苷酸片段 ,利用DNA合成仪人工合成、纯化这 6条寡核苷酸片段 ,通过片段退火、连接、克隆及测序鉴定获得了PACAP基因 .将PACAP基因克隆至 pGEX 4T 3质粒中转化BL2 1进行表达分析 ,融合蛋白约占细胞总蛋白的 30 % ,其中部分为可溶性 ,部分以包涵体形式存在 .通过亲和层析纯化GST PACAP融合蛋白 ,该蛋白质能促进PC12细胞轴突生长及脊髓神经元存活 .

摘要：根据人胰岛素A、B链的多肽顺序,设计并用一种简便快速的多肽基因合成了A、B链基因。合成的A 链和B 链基因分别克隆到pWR590质粒上,构建了表达型质粒pWR590-HIA和pWR 590-HIB,它们能够表达由β-半乳糖苷酶N-端约590个氨基酸残基与A 链或B 链组成的融合蛋白(两者之间由Met 连接)。A 链或B 链融合蛋白经BrCN 降解,磺化及分离纯化等步骤,得到了磺化A、B 链。磺化A、B链体外重组得到人胰岛素。

摘要：基于噬菌体展示的结果 ,对三种拟糖多肽与葡糖淀粉酶的相互作用进行了分子动力学模拟 .计算机模拟结果表明 ,多肽N 端碱性氨基酸残基可与酶的活性中心结合 .在此基础上 ,设计并用液相法合成了 3个三肽 (RSA ,KSA ,RCA) ,用于制备与葡糖淀粉酶或α

摘要：LPTS基因是利用定位候选克隆策略克隆的一个新的肝相关候选肿瘤抑制基因。LPTS基因编码一个全长为328氨基酸的蛋白质(LPTS-L),该蛋白具有抑制细胞端粒酶活性的功能。为了进一步研究LPTS-L蛋白的结构与功能,利用DNA重组技术,将LPTS-L的cDNA克隆到表达载体pET-24a中构建重组克隆pET-24-LPTS,并在大肠杆菌BL-21中进行融合表达,获得可溶形式的LPTS-L融合蛋白。采用Ni Sepharose4B柱亲和层析,可以获得纯度较高的蛋白,但不适合大量制备。通过设计引物去掉了pET-24a载体上的6×His tag将LPTS-L基因进行了非融合表达,然后采用磷酸纤维素P11阳离子交换层析纯化LPTS-L蛋白,纯度可达到55%。再经Sephadex G-100凝胶过滤,LPTS-L蛋白的纯度可达到80%。Western blot实验显示经纯化后的LPTS-L蛋白可与兔抗GST-LPTS-L的多抗发生特异性结合。采用TRAP法测定蛋白质活性,结果显示纯化得到的LPTS-L蛋白可抑制端粒酶的活性,与采用Ni Sepharose4B纯化获得的LPTS-L融合蛋白比较,其抑制效率基本一致。因此,所建立的技术可以有效地制备LPTS-L蛋白。

摘要：为了深入研究蚕丝丝素基材料的自组织/自组装机制,设计了四种结构单纯的蚕丝结晶区肽段:GXGAGAGXGA(X:A,S,Y,V),保温培养1～15d,使之自聚集.采用ThT荧光光谱法和尿素抑制处理研究了它们形成β-片层结构的能力.结果显示:肽段GA在溶液中保温聚集1d就明显有β-片层结构生成,按A,S,Y,V的顺序分别保温12,8,14,13d,聚集体中β-片层结构比例趋于稳定,其中形成β-片层结构比例最高的是GS,其次是GA,GY和GV较少.肽段溶液中尿素的存在对β-片层的形成影响十分显著,尿素浓度为1mol/L时足以使GS,GY和GV自聚集时无法形成β-片层结构;大于2mol/L时开始影响GA的β-片层形成,随着尿素浓度的增加β-片层结构的比例随之下降.

摘要：药物研制和开发的首要步骤是寻找和鉴定与生物靶分子高亲和力的配体化合物目前高通量筛选方法已得到广泛应用。随着核磁共振(nuclear magnetic resonance, NMR)技术和生物标记的发展，NMR技术已用于药物的筛选和设计领域。主要是NMR的参数众多，如化学位移、扩散系数、横向弛豫、NOE(转移NOE和NOE pumping)，这些参数都可用于配体化合物的筛选。另一特点是NMR能提供配体与靶蛋白结合的结构信息，有利于配体的设计。再是近代NMR技术的灵敏度提高和实验速度加快，结合组合化学的方法，每天能进行成千化合物的大规模筛选。本文着重介绍用~1H/~(15)N NMR化学位移法进行蛋白质抑制剂的筛选和先导药物的发现。

摘要：蛋白激酶在信号转导、基因转录和蛋白翻译等生物过程起关键性作用,因而与大量人类疾病密切相关。所以,蛋白激酶的抑制剂筛选是抗肿瘤药物开发的热点,正在向基于全激酶组的高通量多靶点筛选模式发展。为了降低大规模实验筛选的成本,提高成功率,本文构建人类蛋白激酶组的多靶点分子对接系统,对抑制剂-激酶组的相互作用进行预测。我们首先利用同源模建方法,对人类激酶组约500个激酶变异体的催化域进行结构建模;接着以催化域结构模型为受体,用已知激酶抑制剂进行分子对接,对抑制剂与各激酶变异体的结合亲和力进行了定量计算。结果显示,本文所建立的多靶点分子对接系统可以准确预测抑制剂与激酶变异体的相互作用,结合自由能的计算值与实验值有很强的相关性。所以,该分子对接系统可用于多靶点激酶抑制剂的计算筛选,为激酶抑制剂开发与抗肿瘤药物设计提供理论依据。

摘要：A new ruthenium polypyridine complex, [Ru(phen) 2(pMIP)] 2+(phen=1,10-phenanthroline, pMIP=2-(4-methylphenyl)imidazo phenanthroline), was synthesized and characterized by elementary analysis, MS and 1H NMR. Spectroscopic methods have been carried out on the interaction mechanism of the Ru (Ⅱ) complex with yeast tRNA systematically. The experimental results indicate that the complex binds to yeast tRNA with an intercalative mode possibly, and interacts with yeast tRNA enantioselectively. The experimental results also suggest that spectroscopic method is effective on studying the interaction mechanism of Ru (Ⅱ) complexes with RNA. Information obtained from the study is potentially useful in the design of new RNA-targeting drugs.

摘要：剪接是将内含子从前体m RNA(pre-m RNA)中移除,并将侧翼外显子连接在一起形成成熟的m RNA的过程,pre-m RNA剪接过程是高等生物中基因表达和蛋白质组学多样性的重要组成部分,但其发生选择性剪接或剪接因子发生突变,都会导致疾病的发生.利用小分子化合物对剪接过程的调控,或为相关疾病的治疗提供另一种选择.利用circmCherry表达体系进行化合物筛选,发现天然产物LeucamideA的简单衍生物对于剪接过程具有一定的抑制作用,以其为先导化合物,进行了结构改造后,新设计合成了约36个噻唑-噁唑双杂环串联结构的化合物,其中2-[(S)-1-(2-{2-[(S)-1-(4-甲氧基苯甲酰胺)-2-甲基丙基]噻唑-4-基}-5-甲基噁唑-4-甲酰胺基)乙基]噁唑-4-甲酸甲酯(9l)对于剪接过程有较强的抑制作用.