摘要：目的为了解不同来源的鼠疫耶尔森氏菌和不同血清型的小肠结肠炎耶尔森氏菌及假结核耶尔森氏菌（ＰＴＢ３）的遗传学差异。方法使用随机引物扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术。结果鼠疫耶尔森氏菌和假结核耶尔森氏菌的扩增主带型相似，而与小肠结肠炎耶尔森氏菌的差异较大；不同来源的鼠疫耶尔森氏菌株ＲＡＰＤ图谱亦有细微差别。小肠结肠炎耶尔森氏菌不同血清型的菌株以及同一血清型不同来源株的ＲＡＰＤ亦有较大差异。这为耶尔森氏菌更进一步的分型提供了一种新方法。此外，还根据小肠结肠炎耶尔森氏菌肠毒素基因设计了一对引物，将７个血清型６６株小肠结肠炎耶尔氏菌分成两组，一组的扩增为预期的２８９ｂｐ片段，另一组为约２００ｂｐ的片段。结论实验表明，鼠疫菌和假结核菌可以通过ＲＡＰＤ和其它生物学技术相结合加以区分。使用ＲＡＰＤ技术可对同一血清型不同来源的小肠结肠炎耶尔森氏菌进行更进一步分型。上述方法可用于分子流行病学调查。

摘要：目的　对幽门螺杆菌 (Hp)ureB核苷酸序列及推定氨基酸序列进行同源性比较分析 ,确定Hp菌株的ureB基因差异性 ,为疫苗的研究和诊断用品的评价提供依据。方法　自行设计引物 ,PCR扩增来自国内不同病人的 4株Hp菌株的ureB基因 ,与pGEM T载体克隆连接、测序 ;进一步同GenBank上发表的其他 4株国外Hp菌株ureB的全基因序列进行比较分析。结果　 8株Hp菌株的ureB基因序列出现了 3种长度 ,CAPMF3和CPM6 30分别为 12 6 9bp和 16 80bp ,其他为 1710bp。 6株1710bp的ureB基因序列的分析表明 ,国外 3株Hp的ureB同源性较高 ,三者氨基酸的同源性达到10 0 %。而国内 3株Hp的ureB变异较大 ,推定氨基酸同源性为 98 7%～ 98 9%。结论　UreB作为保护性抗原时存在免疫保护覆盖率问题 ,研究疫苗和诊断用品时要注意选择使用在人群中流行占优势的Hp菌株的高度保守的UreB抗原肽 ,使其具有更高的覆盖率。

摘要：以根据立氏立克次体分子量为１９０×１０＾３蛋白抗原基因序列设计的一对引物Ｒｒ１９０．７０ｐ和Ｒｒ１９０．６０２ｎ，用聚合酶链反应技术从斑点热群立克次体ＨＬ－９３株染色体ＤＮＡ中扩增出了１９０×１０＾３蛋白基因的部分片段。通过载体质粒ｐＧＥＭ－Ｔ将该部分基因片段克隆进入了大肠杆菌ＪＭ１０１，并进行了核苷酸序列分析。

摘要：目的　在真核系统表达XHFVS基因片段 ,制备安全、特异、便于操作的S蛋白。方法设计引物 ,扩增得到S基因编码片段 ,用杆状病毒表达载体pFastBacHTb克隆S基因 ,并在昆虫细胞中表达S基因。结果　地高辛探针杂交和PCR扩增结果表明成功地构建了含XHFVS基因片段的pBac Sxhf质粒。SDS PAGE分析表达产物在相对分子质量 (Mr)为 6 6× 10 3 下方出现 1条明显的蛋白条带 ,Westernblot发现该蛋白带可以与抗XHF病毒核蛋白单克隆抗体发生反应。结论　构建的含XHFVS基因的重组杆状病毒可以在昆虫细胞表达S蛋白 。

摘要：根据普氏立克次体弱毒株－Ｅ株１４ｋＤ表面蛋白基因的ＤＮＡ序列设计合成了一对寡核苷酸引物，二引物的５＇端分别加上了限制性内切酶ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ酶切位点。采用此引物对成功地扩增了普氏立克次体强毒株－－Ｂｒｅｉｎｌ株（国际标准株）的１４ｋＤ表面蛋白基因，基因的分子大小为０．７２ｋｂ。扩增获得的基因ＤＮＡ经限制性内切酶ＨｉｎｄⅢ和ＥｃｏＲＩ酶切后与经相同酶切的质粒载体ｐＵＣ１９连接，转化受体大肠杆菌工程菌ＪＭ１０３，经酶切和ＤＮＡ斑点杂交鉴定，成功地克隆了扩增的普氏立克次体强毒株（Ｂｒｅｉｎｌ株）的１４ｋＤ表面蛋白基因。

摘要：为了改进灭鼠方法,提高效果或效率,必须开展试验研究,对新提出的方法进行检验。然而,正确的结论来自准确的数据和客观的分析,而准确的数据与试验方法是否科学密切相关。多年来,一些似乎是从实践中提出的灭鼠方法在大规模推广时失败,除试验者的主观因素外,和设计不严密(主要是缺少对照)有直接关系。

摘要：目的　体外进行了幽门螺杆菌 (Hp)对弗莱莫星、庆大霉素、达克普隆等药物单联及联合应用的敏感性试验 ,并对体外药敏试验的结果与体内的临床疗效加以比较。方法　体外药敏试验采用滤纸片琼脂扩散法及试管稀释法 ,对临床常用 13种抗溃疡及抗Hp药物的敏感性进行检测。根据检测结果 ,采用对细菌敏感的弗莱莫星、庆大霉素结合质子泵抑制剂达克普隆进一步作三联疗法的临床疗效观察。随机选择Hp相关性十二指肠溃疡 (DU)病人 2 3例 ,比较达克普隆 30mg/d、6 0mg/d共 14d与弗莱莫星 1 0 g每日 2次共 7d、庆大霉素 8万U每日 2次共 7d联合治疗后Hp根除率 ,用药 2周及停抗生素 4周DU愈合率。 结果　 (1)Hp在药敏实验中对弗莱莫星、庆大霉素、克拉霉素、痢特灵等高度敏感 ,对德诺或达克普隆与弗莱莫星、庆大霉素联合应用后呈高度敏感。 (2 )但根据药敏实验设计的两组病人的Hp根除率仅为 6 0 9% ,DU 2周愈合率 91 3%。 (3)达克普隆 30mg/d与 6 0mg/d组DU2周愈合率分别为 90 0 % ,92 3%。结论　达克普隆治疗消化性溃疡愈合率高 ,不良反应发生率低。体外药敏试验的结果与人体临床疗效并不完全一致。

摘要：目的　探索幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,简称Hp)vacA基因 (vacuolatingcytotoxingeneA)的变异性及其与产生空泡毒素活性的关系。方法　用自行设计的两两配对的 4条引物对 1 7株Hp的vacA基因进行PCR扩增。结果　每株细菌均可扩增出包括vacA基因不同区域的 4条产物 ,但每种产物在不同菌株间长度有差异 ;对产毒株与非产毒株的扩增产物长度比较 ,未发现与产毒有关的区域。结论　HpvacA基因的变异性相当大 ,变异部位不仅仅局限于某一区域 ,尚不能确定与产毒有关的基因区域。推测Hp表达VacA活性与否可能与分泌的量有关。

摘要：为建立一种针对出血性大肠埃希菌的特异性聚合酶链反应（ＰＣＲ）诊断方法，根据Ｏ１５７：Ｈ７血清型大肠埃希菌ｈｌｙＡＢ基因的ＤＮＡ序列，设计８个引物，使用３２株Ｏ１５７：Ｈ７血清型。结果表明，引物ＲＨ２８－ＲＨ３０和ＲＨ２６－ＲＨ３１敏感性和特异性好，达１００％。ＲＨ２６－ＲＨ３１产物的分子量较大，为２ｋｂ。ＲＨ２８－ＲＨ３０的产物为３３８ｂｐ，比较适合检验使用。研究还发现，使用煮沸法制备ＰＣＲ模板，方法简便、快速、实用，且对ＰＣＲ反应的特异性和敏感性无影响。ｈｌｙＡＢ基因片段作为出血性大肠埃希菌ＤＮＡ探针的特异性和敏感性是明显的，且实用性好。根据出血性大肠埃希菌独特的ｈｌｙＡＢ基因序列设计的ＰＣＲ引物，在理论和实际应用方面均有其优越性。

摘要：嗜肺军团菌是军团病的主要病原体，它所导致的军团病病例占临床病例的80％以上，多数军团病暴发由嗜肺军团菌所引起。通过针对嗜肺军团菌种保守基因（mipgene）设计的引物，我们建立了一种多聚酶链反应（PCR）检测方法，可以准确捕获环境标本中的嗜肺军团菌，同时具有很好的特异性，其最低可检出18cfu／ml的细菌。该方法的建立为嗜肺军团菌病的诊断以及在军团病流行病学调查中嗜肺军团菌病原的追踪提供了一条便捷、准确、可靠的途径。