摘要：目的采用肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导的肌细胞营养不良模型和核糖核酸干扰技术，研究Atrogin-1基因沉默对肌细胞营养不良的保护作用。方法设计5对Atrogin-1-siRNA靶序列及对照序列，逐步克隆到慢病毒核心载体FG12中，重组FG12与三种包装质粒（pRSVREV、pMDLg／pRRE、pHCMV-G）共同转染293T细胞以包装病毒，感染C2C12细胞，并将其分化成肌管，用TNF-α进行刺激，实时荧光定量PCR法、Western blot法检测肌管中Atrogin-1表达，观察比较各组肌管的形态学变化。结果重组载体中含大小、序列正确的片段，能成功感染C2C12细胞，TNF-α能引起对照组肌管Atrogin-1表达上调、肌管萎缩，但RNA干扰组肌管无此现象。结论沉默Atrogin-1基因可避免产生TNF-α诱导的肌细胞营养不良，Atrogin-1基因可作为肿瘤恶液质的理想治疗靶点。

摘要：外科临床研究的结果有内在和外在的真实性,内在真实性与研究的设计和实施有关,反映的是临床研究的真实可信性;外在真实性反映的是研究结果是否有推广价值。临床研究的设计和实施过程中因各种原因而产生偏倚,会影响研究的内在和外在真实性。通过双盲、随机、研究方案的标准化等措施可一定程度上避免偏倚的产生。外科医生熟悉临床偏倚产生的环节和原因,有助于判断外科临床研究结论的真实性,从而在自己的临床实践中更好地运用研究结果。

摘要：靶向治疗是胰腺癌综合治疗一个重要的组成部分。胰腺癌发生、发展过程中有许多分子可作为靶向治疗的靶点。但目前众多的靶向治疗药物中,只有小分子酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼在前瞻性对照研究中证明对晚期胰腺癌有效。不同于传统的细胞毒药物,胰腺癌靶向治疗的研究需综合考虑病人的异质性、选择适合的研究终点和研究设计。

摘要：目的调研了解上海市二级甲等及以上医院普痛外科有关静脉血栓栓塞症(VTE)院内防控体系建立情况、医生相关知识掌握,住院病人发病情况。方法2019年9月1—12日以上海市普通外科临床质量控制中心为平台,设计问卷并以质量控制中心官方邮件及微信平台共同推送二维码形式对上海市二级甲等及以上医院普通外科进行电子问卷调查。问卷内容设计严格按照国内外普通外科领域VTE防治指南为标准。结果共69家医院普通外科参与调研,回收有效问卷112份,肺动脉栓塞(PE)确诊例数占住院手术例数的0.06%(5/7843),深静脉血栓形成(DVT)确诊例数占1.02%(80/7843)。上海市二级及以上医院已有88.39%(99/112)的科室建立VTE防控体系;84.82%(95/112)的科室有VTE和PE的联合会诊团队;96.43%(108/112)的科室入院时为病人做VTE风险评估,74.11%(83/112)的科室在病人手术后评估VTE风险,38.39%(43/112)的科室出院前为病人评估VTE风险。有53.57%(60/112)的科室为VTE高风险病人进行术前抗凝,至术前12 h停药。34.61%(18/52)的科室因顾虑出血,以及23.07%(12/52)的科室认为外科手术前无须抗凝,而术前不予抗凝治疗。在术后抗凝治疗中,对良性疾病病人,43.75%(49/112)的科室对予术后抗凝3~5 d,23.21%(26/112)予抗凝至出院前,4.46%(5/112)予抗凝至可自由行走,2.68%(3/112)予抗凝至术后28 d,25.89%(29/112)术后未予常规预防性抗凝;对于恶性疾病病人,47.32%(53/112)科室予抗凝至出院前,23.21%(26/112)予术后抗凝3~5 d,仅有8.04%(9/112)根据规范推荐抗凝至术后28 d。院内预防中有96.43%(108/112)的科室选择低分子肝素;院外预防中有43.75%(49/112)的科室使用阿司匹林,16.07%(18/112)使用低分子肝素,24.11%(27/112)使用新型口服抗凝药,15.18%(17/112)使用华法林。结论与2年前对比,上海市普通外科VTE防治的理念和实践有了很大的进步,但对照先进国家的防治实践,存在较大差距,尤其在为病人选择正确用药及恶性肿瘤等VTE高危病人的预防上仍有改善空间。

摘要：目的构建小鼠成纤维活化蛋白（FAP）基因的真核表达载体，并检测其在人胚肾细胞及小鼠体内的表达。方法根据GeneBank中mFAP基因（NM_007986）全序列设计聚合酶链反应（PCR）引物，获得其开放式阅读框（ORF）。将目的基因片段克隆至真核表达载体pcDNA6／myc—His—B，转化并筛选。将重组质粒注射入小鼠尾静脉，在注射后1、3、5、7d抽提小鼠腓肠肌组织的总RNA，检测FAP表达。结果经过酶切鉴定、测序比对，确定所筛选的阳性克隆为pcDNA6-mFAP重组子，其可在真核细胞及小鼠体内正常表达，并产生相应蛋白质产物。在小鼠体内注射后第5天，重组子的基因（0．841±0．040）和蛋白表达量（85．380±4．425）％最高，和空白对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论成功构建FAP真核表达载体，为研究该基因产物的功能和进行疫苗抗肿瘤实验提供基础。

摘要：目的探索胰腺癌MUC1VNTR核酸疫苗的构建,以进一步研究对胰腺癌的治疗作用。方法首先对VNTR编码基因进行了重组设计,氨基端插入人单核细胞趋化蛋白Ⅰ信号肽基因序列,起始码前插入KOZAK促真核翻译序列。将人工合成的重组人VNTR基因定向克隆入真核表达载体pcDNA3.1/Mychis(+)A质粒的MCS中。将通过测序鉴定的含有准确插入序列的pcDNA3.1VNTR/Mychis(+)A重组质粒转染COS7细胞,进行体外转染实验和Westernblot检测VNTR在细胞内外的表达。结果自转化平板筛选的阳性克隆通过测序鉴定,pcDNA3.1VNTR/Mychis(+)A重组质粒含有完整的阅读框架和目的基因。重组质粒可在COS7细胞内外表达VNTR,以胞内为主。所表达的VNTR分子量比人工合成的VNTR多肽大。结论自行构建的胰腺癌MUC1VNTR核酸疫苗序列准确,可在哺乳动物细胞中表达VNTR。

摘要：目前肝细胞癌(HCC)的主要治疗手段包括手术、化疗和放疗等。随着分子生物学技术的不断发展,分子靶向治疗迅速崛起。针对HCC发生发展相关的信号通路中某些特定位点设计靶向药物,成为HCC治疗研究的新热点。就近年来HCC的相关信号通路和对应的靶向治疗药物进行简要阐述。

摘要：目的评价两种主要临床营养期刊中随机对照试验（RCT）的质量。方法查阅2000～2008年《中国临床营养杂志》和《肠外与肠内营养》发表的RCT研究，按Cochrane协作网标准评价，并进行Jadad评分。结果两种期刊共发表238篇RCT研究，Jadad评分为（1．65±0．82）分。高质量RCT仅28篇（11．76％），评分为满分5分的仅5篇（2．10％）。随机分组的方法、组间可比性、纳入排除标准、盲法、撤除和退出的数量和理由、样本含量等方面存在各种问题。结论国内临床营养领域RCT研究的设计和质量控制还存在不足或欠缺，水平尚待提高。

摘要：目的建立一种全营养混合液(total nutrient admixture,TNA)计算机化医师医嘱输入系统(computerized physician order entry,CPOE)和系统内辅助临床决策支持系统(clinical decision support,CDS)的功能设计,保障TNA医嘱的正确开具。方法通过梳理TNA、医嘱开具的工作流程,改进并设计新工作流程。建立TNA医嘱专属的CPOE界面,并在界面中建立一种临床决策支持方式,在TNA医嘱各组分输入同时,通过CDS的运算与反馈,判断是否同时满足患者的临床营养需要与药学工艺要求,并在界面直接通知开具医嘱的临床医师。CDS通过确保TNA医嘱的适宜性,及时保证肠外营养的临床使用安全。通过判断医嘱选择的合理性,并对不合理医嘱提供实时报警反馈,完成前置审方功能,并对临床医师的开具肠外营养的医嘱行为兼具教育功能。结果通过CDS后台可选择药品目录的建立,杜绝了TNA医嘱中加入治疗性药物的不合理医嘱。肠外营养CPOE辅助支持系统后台运算能正确判断载体输液是否合理,并能在CPOE界面对临床医师进行实时反馈。结论该CPOE辅助支持系统的建立杜绝了TNA医嘱中成分比例不合理、加入其他治疗性药物等,确保TNA医嘱保证患者每日所需能量,成分配比合理,相容性与稳定性良好,使患者肠外营养的用药安全获得了保证。

摘要：胃癌腹腔镜和开腹根治性全胃切除术安全性的多中心、随机、对照临床研究(CLASS-02)是中国腹腔镜胃肠外科研究组(CLASS)成立后的第2个系列研究,目前已基本完成入组和数据核查工作,预计2019年6月将完成数据分析。CLASS-02研究设计及实施过程中对医学伦理学、入组病例基线评估、消化道重建方式、并发症记录、严重不良事件预案、随访、数据管理等方面问题进行了严格的质量控制。CLASS-02研究完成入组将为后续的腹腔镜全胃切除术的有效性Ⅲ期临床研究(CLASS-02.2)奠定基础。CLASS系列研究将助力中国高质量临床研究数据的发布和外科技术创新。