摘要：生物过程是一个复杂的相互作用的过程。工业生物催化被认为是生物技术的第三次浪潮 ,作为其核心内容之一的生物过程优化的目的在于提高终产物的产率 ,它是生物技术产业化不可缺少的一项工作。综述了国际上近年来较为流行的生物过程优化技术 ,包括非统计优化技术 (如单次单因子法 )和统计优化技术 (如Plackett_Burman设计法、部分因子设计法、中心组合设计法和Box_Behnken设计法等响应面法 )两大类。在多因子实验中寻找其最佳条件时 ,响应面法是一个比单次单因子法更加有效的优化技术。

摘要：通过SSH法获得了一个与不定根形成相关的差异表达的cDNA片段 ,其推导的氨基酸序列与拟南芥的生长素反应因子 (ARF)类蛋白具有较大的同源性 ,因此将它命名为MiARF。用所设计的基因特异引物进行 3′RACE扩增获得包含完整读码框架 (ORF)的MiARF1(GenBank登录号为AY2 5 5 70 5 )和MiARF2 (GenBank登录号为AY30 0 80 8)。MiARF1全长为 32 72bp ,其中 ,ORF含 2 5 2 3bp ,5′非翻译区 (5′UTR)含 2 85bp ,3′非翻译区 (3′UTR)含 4 6 4bp。由该序列所推导的氨基酸序列与拟南芥ARF2 (BAB10 16 2 )的ID值为 6 4 % ,E值为 0 ,在DNA结合区域 (DBD)、III和IV区域的同源性更高 ,ID值均大于 80 %。MiARF2cDNA全长为 14 74bp ,其中ORF含 981bp ,5′非翻译区含 2 85bp ,3′非翻译区含 2 0 8bp ,由该序列所推导的氨基酸序列与拟南芥ARF2 (BAB10 16 2 )的ID值为 84 % ,E值为e- 1 51 。MiARF2仅具有DBD保守区并与MiARF1的基本相同 ,但缺乏III和IV区域。VirturalNorthern杂交表明 :MiARF2在生根的组织中表达水平高 ,而在非生根的组织中未见表达 ;MiARF1在生根及非生根的组织中均有表达。

摘要：对中国的一个胡萝卜品种进行了冷诱导前后幼苗总蛋白组成的比较、分析 ,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果表明两者在相对分子质量 36 0 0 0附近有一条蛋白带的差别。由此推测实验的胡萝卜品种在冷诱导过程中有抗冻蛋白 (AFP)表达。根据相关的研究结果设计引物 ,以胡萝卜幼苗基因组DNA为模板 ,通过PCR扩增得到了长 10 99bp的抗冻蛋白基因。测序结果表明其与GenBank公布的afp序列仅有 3个碱基的差别。将此抗冻蛋白基因克隆进大肠杆菌表达载体pGEX4T1,在IPTG的诱导下表达出了含有AFP的约 6 0 0 0 0的融合蛋白 。

摘要：目的:研究海带多糖的工业提取工艺及其降血脂活性。方法:使用正交设计L9(34)方法探讨用碱量、时间、温度等因素对提取海带多糖的影响,从而得出最佳的提取工艺;紫外分光光度法测定多糖的含量并计算产率;连续15 d给予不同剂量的多糖粗提取物以及纯品海带多糖,观察多糖对高血脂小鼠甘油三酯和总胆固醇水平的影响。结果:最佳的提取工艺为5%Na2CO3溶液在80℃提取3 h,得到产率为2.13%;不同剂量和纯度的海带多糖对高血脂小鼠的甘油三酯和总胆固醇水平有不同程度的降低作用。结论:海带多糖有明显的降血脂作用。

摘要：RRD3是通过复性动力学从水稻基因组中克隆到的一个中度重复序列,序列分析揭示其含有多个保守的启动子元件,包括4个TATA-boxes和CAAT-box,在Escherichia coli及哺乳动物表达系统中均表现出启动子活性。我们将RRD3片段插入到植物启动子捕获载体pCAMBIA1391Z中,检测RRD3片段是否在植物中也有启动子活性,转基因烟草再生植株和水稻愈伤组织均显示了gusA基因的表达,表明其在单子叶和双子叶植物中均可行使启动子功能。基于RRD3的双效启动子特性,我们设计并构建了植物通用双元RNAi载体pCRiRRD3,适于进行植物的RNA干涉实验研究。我们在植物RNAi载体pCRiRRD3的内含子(200bp)的上下游分别引入了2个多克隆位点,方便了正义及反义片段的接入。转基因烟草植株的GUS组织化学及荧光定量分析表明该载体可有效进行RNA沉默。这些研究结果表明,利用单子叶和双子叶双效活性的RRD3启动子而构建的植物RNAi载体,可同时有效地应用于大部分单子叶和双子叶植物的RNAi实验及研究。

摘要：评述了组成ＤＮＡ的配体和芳香氮碱配合物分子内芳环间堆积作用的研究现状及作者的研究成 果．着重介绍了几个重要的三元混配配合物体系：核苷酸－金属离子－多元芳胺、氨基酸－金属离子－多元 芳胺、核苷酸－金属离子－类吡啶芳胺、核苷酸－金属离子－氨基酸、核苷酸－金属离子－核酸碱基、核酸碱 基－金属离子的研究进展，并讨论了影响配合物分子内芳环间堆积作用的几个主要因素．从研究组成 ＤＮＡ的小分子配体和芳香氮碱配合物堆积作用着手，进一步阐明大分子ＤＮＡ和芳香氮碱配合物的作 用机制，并为设计和合成作为ＤＮＡ的分子器件的配合物提供理论基础．

摘要：测定了发生于我国东南海域赤潮原因种Phaeocystissp.及相关种类P globosa和P pouchetii18SrDNA序列,并以Phylip35分析软件构建序列距离矩阵和分子系统发育树图.结果表明,该赤潮原因种与球形棕囊藻P globosa18SrDNA序列完全相同,从分子水平鉴定了该原因种为P globosa.分子系统发育树图表示的P globosa和P pouchetii的分化顺序表明,分布于我国东南海域的P globosa可能是一种本地起源的暖水种.Phaeocystisglobosa不同株系的形态差异,可能是适应不同生活环境的结果.根据分子生物学的数据对有害赤潮藻类进行系统发育分析,并设计用于有害赤潮藻快速鉴定的特异性分子探针,对赤潮的监控和防治具有重要意义.

摘要：为了提高灵芝(Ganoderma lucidum)AM21菌株菌丝产灵芝三萜的能力,采用响应面法对其液体发酵培养基配方进行优化。首先采用Plackett-Burman设计法对影响菌丝体三萜含量的9个相关因素进行筛选,确定主要影响因子为豆粕粉和山药,然后用最陡爬坡试验逼近2个主要因素的最大响应区域,并通过中心组合设计和响应面分析,确定主要影响因子的最佳浓度。优化后的培养基组成为1.84%豆粕粉,1%玉米粉,1%葡萄糖,0.92%山药,0.5%酵母粉,0.1%麸皮,0.1%KH2PO4,0.1%MgSO4.7H2O,0.01%VB1。使用该培养基生产的灵芝菌丝体中三萜含量较使用基础发酵培养基生产的高29.13%。

摘要：以重组质粒pET-CN为模板设计引物CASN1和CASN2,PCR方法扩增约267bp的人血管能抑素N端1～89氨基酸基因片段,用EcoR I和Sal I双酶切将其克隆进pET-22b(+)载体获得重组表达质粒pET-22b(+)-CN,转化*** BL21(DE3),用IPTG诱导表达Canstatin-N,产物以包涵体形式存在。本文在摇瓶发酵条件下研究了诱导剂浓度、诱导培养时间对目标蛋白表达的影响,结果表明IPTG的最佳诱导浓度为0.1mmol/L;37℃下诱导培养2h时产物表达量最高。纯化获得的融合his6的重组Canstatin-N具有免疫和抑制鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)新生血管生成活性。

摘要：从烟草突变体T-cldf叶片表达基因的SSH文库中,筛选到一个与真菌抗性相关的表达序列标签P1T10(GenBank Access ***102896)。以P1T10序列为模板设计引物,用末端快速扩增(RACE)技术扩增得到T-Phylloplanin的cDNA全长(GenBank Access ***451214)。利用DNASTAR软件的EditSeq程序(Version 5.01)分析T-Phylloplanin基因,显示它包含一个完整的开放读码框,编码一个含有110个氨基酸、等电点为7.74、分子量为11.3 kD的小分子量蛋白(GenBank Access ***03627)。通过BLAST比对发现它与烟草叶片的一个表面抗性蛋白全长基因(GenBank Access ***705384)的同源性为93%。通过半定量RT-PCR分析表明,T-Phylloplanin在烟草突变体T-cldf叶片中的表达量高于烟草K346。