摘要：根据亲缘关系较近的鲤鱼胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )cDNA设计一对引物 ,通过RT PCR从草鱼(Ctenopharyngodonidellus)肝组织首次克隆了草鱼 IGF ⅠcDNA开放阅读框 (ORF)片段。经序列分析表明克隆的草鱼IGF ⅠcDNA为Ea 2亚型 ,ORF与鲤鱼有 95 %的同源性 ,与人有 6 3%的同源性 ;草鱼IGF Ⅰ蛋白与鲤鱼IGF Ⅰ仅 2个氨基酸残基不同 ,与人IGF Ⅰ也仅有 13个残基不同。将表达成熟草鱼IGF Ⅰ (gcIGF Ⅰ)蛋白的cDNA片段亚克隆至谷胱甘肽S 转移酶 (GST)融合表达载体 pGEX 4T 3,再将构建的重组表达载体 pGEX T gcIGF Ⅰ转入大肠杆菌BL2 1。在IPTG的诱导下 ,GST gcIGF Ⅰ融合蛋白高效表达。兔抗鲑鱼IGF Ⅰ抗血清进行的WesternBlot检测显示重组草鱼IGF Ⅰ蛋白具有免疫活性。

摘要：促性腺激素释放激素(GnRH)的主要作用是刺激脑垂体促性激素(GtH)的释放,亦可促进鱼类生长激素(GH)的释放。促黄体素释放激素类似物(LHRH-A)是哺乳类GnRH的类似物,为了分析LHRH-A对尼罗罗非鱼生长调节的作用,设计了长期和短期2个实验,采用腹腔注射(剂量0.1μg/g体重)方法,分析LHRH-A对尼罗罗非鱼绝对生长率、特定生长率、肝体系数和肥满度的影响,并应用荧光实时定量PCR方法检测在注射LHRH-A后不同时段(6h、12h、24h、2周)尼罗罗非鱼垂体GH、肝脏GHR和肝脏IGF-I基因的表达变化。结果表明,LHRH-A组尼罗罗非鱼的绝对生长率、特定生长率、肝体系数、肥满度均显著高于对照组(P<0.05);注射LHRH-A后12h、24h垂体GH mRNA表达水平均显著升高(P<0.05),2周后恢复到对照组水平;注射LHRH-A后24h和2周肝脏GHR mRNA表达水平显著上升(P<0.05);注射LHRH-A后6h肝脏IGF-I mRNA表达水平显著升高(P<0.05),12h、24h和2周恢复到对照组水平。以上结果提示,LHRH-A可显著上调尼罗罗非鱼生长轴相关基因的表达,从而促进鱼类的生长。

摘要：NLRP3基因是能够识别PAMPs和胞内危险信号的1种重要的炎性小体,参与机体对体内外病原微生物的防御和维持自身稳态。首次发现翘嘴鳜存在1个雄性特异的NLRP3基因。通过设计基因特异扩增引物,并在22条雌鱼和22条雄鱼中进行PCR扩增,证实了该基因只在翘嘴鳜雄鱼中存在。为了解该NLRP3基因的潜在功能,成功克隆得到该基因的全长蛋白编码序列,并通过序列比对和系统发育分析,初步证明该基因具有NACHT、LRR和PYD等多个关键结构域,在鲈形目鱼类中具有较高的保守性。另外,通过荧光定量分析的方法研究了NLRP3基因在雄性翘嘴鳜不同组织以及在不同时期性腺中的表达差异,发现翘嘴鳜NLRP3基因在肝脏、胃和肠等组织有较高的表达,且在翘嘴鳜雄性性别分化早期有显著高表达,在性别分化后几乎不表达。