摘要：目的　构建针对人端粒酶催化亚单位 (humantelomerasecatalyticsubunit,hTERT)基因的小分子干扰RNA(smallinterferingRNA ,siRNA)表达载体pU6 hTERT siRNAs,观察其对胃癌SGC790 1细胞hTERT基因的特异性抑制作用。方法　采用报告基因质粒pCX GFP( 5 5 10bp)和含有鼠U6启动子pU6 ( 330 0bp)质粒 ,设计合成针对绿色荧光蛋白 (GFP)基因的发夹RNA(shRNA)序列 ,构建SHi pU6 GFP质粒。应用LipofectamineTM2 0 0 0将pCX GFP质粒和SHi pU6 GFP质粒转染K5 6 2细胞、SGC790 1细胞 ,并用荧光显微镜观察转染效果。设计合成针对hTERT的siRNAs ,构建重组pU6 hTERT siRNAs质粒。LipofectamineTM2 0 0 0介导pU6 hTERT siRNAs质粒转染SGC790 1细胞。分别应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和荧光定量聚合酶链式反应 (FQ PCR)定性和定量检测hTERT基因表达情况。结果　质粒pU6和SHi pU6 GFP经EcoRⅤ和XbaⅠ酶切电泳后 ,前者出现 330 0bp和约 30 0bp条带 ,而后者出现 330 0bp和约 35 0bp条带 ,与实验设计的针对GFP的shRNA长度相符。说明本实验已成功构建了针对绿色荧光蛋白GFP基因的SHi pU6 GFP质粒。K5 6 2细胞和SGC790 1细胞中分别观察到转染pCX GFP质粒和SHi pU6 GFP质粒前后发绿色荧光的细胞数目明显减少。定性。

摘要：目的构建针对绿色荧光蛋白(GFP)基因的发夹结构RNA表达载体(SHipU6GFP),观察SHipU6GFP对结肠癌LoVo细胞的GFP特异性抑制作用。方法设计合成针对绿色荧光蛋白GFP基因的发夹RNA(shRNA)序列,构建SHipU6GFP质粒。采用报告基因质粒pCXGFP(5510bp)和含有鼠U6启动子pU6(3.3kb)质粒,应用LipofectamineTM2000将pCXGFP质粒和SHipU6GFP质粒转染K562细胞和LoVo细胞。荧光显微镜观察转染效果和不同时间的转染效率。结果质粒pU6和SHipU6GFP经EcoRⅤ和XbaⅠ酶切电泳后,前者出现3.3kb和约300bp条带,而后者出现3.3kb和约350bp条带,与实验设计的针对GFP的shRNA长度相符。说明本实验已成功构建了针对绿色荧光蛋白GFP基因的SHipU6GFP质粒。K562细胞和LoVo细胞中分别观察到转染pCXEGFP质粒和SHipU6GFP质粒前后发绿色荧光的细胞数目明显减少。结论结肠癌LoVo细胞存在RNA干扰现象,可以进行相关RNA干扰抑制实验。

摘要：Sonic hedgehog（Shh）信号通路是在动物胚胎发育过程中调节细胞间相互作用的重要信号分子之一,在胰腺癌的发生发展过程中发挥重要作用.Rab23是该信号通路副调控基因,其功能受到抑制后会导致hedgehog信号通路活性受阻.该研究设计针对Rab23基因的siRNA将其沉默,观察对胰腺癌细胞PANC-1增殖和凋亡的影响,为胰腺癌的临床诊断、治疗及预后提供依据.

摘要：目的探讨基于贝叶斯网络建立进展期胆囊癌患者根治性切除术后生存预测模型的临床价值。方法回顾性分析国内9家中心2010年1月至2015年12月收治的经根治性手术治疗的进展期胆囊癌患者临床资料，纳入生存时间、阳性淋巴结数目（NMLN）、T分期、病理学分级、切缘、黄疸、肝脏浸润、年龄、性别、肿瘤形态10个变量因素，运用Bayesia Lab软件建立模型，基于树增益朴素贝叶斯算法建立以生存时间为目标节点的中位生存时间预测模型。采用混淆矩阵和受试者工作特征（ROC）曲线及ROC曲线下面积评价模型预测效果的优劣。运用Bayesia Lab进行10个变量因素的先验统计分析和以生存时间为目标变量、剩余因素为属性变量的后验分析，基于后验分析结果开展多态Birnbaum重要度计算，给出各属性变量的重要度排序。排序结果筛选前4种因素建立胆囊癌生存概率预测表。使用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，生存分析采用Log-rank检验。结果共316例患者纳入研究，其中男性109例，女性207例，男女比例为1.0∶1.9，年龄（62.0±10.8）岁。R0切除298例（94.3%），R1切除18例（5.7%）。T分期：T3期287例（90.8%），T4期29例（9.2%）。总体中位生存时间（MST）为23.77个月，1、3、5年累积生存率分别为67.4%、40.8%、32.0%。正确预测值分别为121例（MST≤23.77个月）和115例（MST〉23.77个月），模型预测精确度为74.86%。生存时间的先验概率为0.503 2（MST≤23.77个月）和0.496 8（MST〉23.77个月）。重要度排序结果表明，NMLN（0.366 6）、切缘（0.350 1）、T分期（0.319 2）和病理分级（0.258 9）是影响患者术后生存时间的前4位预后因素。将NMLN、切缘、T分期和病理学分级4个因素作为观测变量，得出不同状态下患者处于各个生存时间段的概率。在此基础上，设计一种基于NMLN、切缘、T分期、病理分级的生存预测评分系统，4～9分患者的中位生存时间分别为66.8、42.4、26.0、9.0、7.5、2.3个月，差异有统计学意义（P〈0.01）。结论基于贝叶斯网络建立的进展期胆囊癌生存预测模型具有较高的准确性，NMLN、切缘、T分期和病理学分级是影响患者术后生存时间的预后因素，基于NMLN、切缘、T分期及病理分级的生存预测评分系统可用于进展期胆囊癌患者的生存预测与治疗决策指导。

摘要：目的分析国内胃肠间质瘤(GIST)患者伊马替尼服药依从性现状及其影响因素。方法采用横断面调查方法进行问卷调查。调查时间为2020年10月1日至11月31日;调查对象为在具有GIST诊疗资质的公立三级甲等综合医院和肿瘤专科医院诊治,且正在服用伊马替尼的GIST患者,排除未得到病理确诊者和未曾服用伊马替尼者,或既往服用伊马替尼但当前已停药者。使用“问卷星”网络平台设计中国GIST患者伊马替尼服药依从性调查问卷,通过微信方式向调查对象发送问卷链接,问卷内容包括患者基本信息、用药情况及Morisky服药依从性量表。结果共回收2162份来自全国31个省、自治区、直辖市的GIST患者调查问卷,其中有效问卷2005份,有效率92.7%。调查对象中男性1104例,女性901例,中位年龄56(22~91)岁。生活状态:单位在职工作609例(30.4%),退休729例(36.4%),灵活就业及无业667例(33.3%);文化程度:大学本科及以上477例(23.8%),高中658例(32.8%),小学或初中782例(39.0%),未受过教育88例(4.4%);婚姻状况:1789例(89.2%)已婚、179例(8.9%)离异或丧偶,37例(1.8%)未婚。初诊GIST时肿瘤发生转移者294例(14.7%),其中肝脏转移203例,腹膜转移52例,其他部位39例。1869例(93.2%)接受了手术治疗,其中1642例(81.9%)行完整切除术。患者服用伊马替尼中位时间为25(1~200)个月,服用伊马替尼的主要不良反应包括眶周水肿1701例(84.8%),白细胞减少1031例(51.4%),乏力948例(47.3%),恶心呕吐781例(39.0%),皮疹709例(35.4%)和双下肢水肿670例(33.4%)。Morisky服药依从性量表评分显示,伊马替尼服药依从性差392例(19.6%),依从性中等1023例(51.0%),依从性好590例(29.4%)。单因素分析显示,患者性别、年龄、居住城市、工作状态、经济收入、居住地、文化程度、婚姻、服药时间及药物不良反应均与患者伊马替尼服药依从性有关(均P36个月(OR=1.478,P36个月及药物不良反应是GIST患者服药依从性差的主要影响因素;术后依从性差者复发风险较高;应针对影响伊马替尼服药依从性的因素进行干预和管理,进而改善GIST患者预后。

摘要：目的:探讨肝癌Hep3B细胞白细胞抗原-G(HLA-G)过表达对NK细胞体外杀伤作用的影响。方法:实验分为正常对照组(无干预措施,Hep3B组)、空载体对照组(转染空质粒,Hep3B-GFP组)和实验组(转染pEGFP-C1-HLA-G质粒,Hep3B-HLA-G组)。构建HLA-G真核表达质粒,转染至Hep3B细胞,经G418筛选,建立稳定过表达HLA-G的肝癌Hep3B细胞。Real-time PCR及Western blotting检测肝癌Hep3B细胞HLA-G mRNA及蛋白质水平的表达。分析肝癌Hep3B细胞HLA-G过表达及HLA-ABC抗体封闭靶细胞相应位点对NK细胞体外杀伤作用的影响。结果:经酶切及测序鉴定证实,插入序列与设计的序列相符。Real-time PCR和Western blotting结果均表明,转染重组质粒的Hep3B细胞HLA-G过表达(P<0.01)。NK细胞对转染pEGFP-C1-HLA-G的Hep3B细胞杀伤作用明显降低(P<0.01),HLA-ABC单抗封闭靶细胞相应位点后,NK细胞对Hep3B、Hep3B-GFP和Hep3B HLA-G细胞的杀伤均增加(P<0.01)。结论:pEGFP-C1-HLA-G表达载体可有效增加HLA-G表达,HLA-G过表达可以削弱NK细胞对肝癌细胞的杀伤效应。HLA-ABC单抗封闭靶细胞相应位点后,NK细胞对靶细胞的杀伤能力普遍有所提高。

摘要：经腹腔镜腹膜前间隙腹股沟疝修补术因其创伤小、恢复快、术后麻木疼痛少,已成为当前主流术式。然而资料统计显示腹腔镜疝修补术没有使并发症和复发得到彻底消除。通过分析腹膜前间隙肌耻骨孔区域的膜解剖平面结构,得出当前3D塑形补片可能存在的缺陷,并尝试提出改进补片设计的方案。

摘要：【目的】分析我国医学科技期刊的数字化出版特征及从业者对著作权认知、行为实践和关切现状,期望提升从业者在著作权保护方面的“知行合一”能力,为我国的科技创新、出版人员规范化培训提供参考和依据。【方法】选择68种2004年以来创办的医学电子科技期刊及18种已开展数字出版的医学科技期刊,使用自行设计的匿名自填式问卷,对以上期刊的主要从业人员进行问卷调查。【结果】目前我国医学科技期刊已由纸质、光盘出版向网络出版过渡,但多处于初级阶段;基本建立了著作权保护制度,但侵权审查流程不够严密。从业人员对著作权保护及侵权的认知状况处于中上水平,70%以上在自我约束、非合理使用等方面有保护意识,但选择违法必究的比例不到1/3,目前数字出版著作权维护还存在诸多困难、障碍。【结论】我国医学科技期刊的数字化出版尚需完善整体配套方案。医学科技期刊从业者的著作权维护意识较强,但实际保护行为较少。期刊出版单位应重视数字出版人才的“定制培养”,注重办公设备的合规性,提高应对数字出版著作权保护及纠纷的能力。

摘要：目的观察放射性直肠损伤患者合并焦虑、抑郁及躯体症状障碍的发生率及治疗。方法采用横断面调查研究方法。以《中华胃肠外科杂志》编委会编委收治的放射性直肠损伤患者为调查对象。调查对象纳入标准:(1)患有盆腔肿瘤,接受过盆腔放疗;(2)肠镜提示直肠有炎性反应或溃疡。排除标准:(1)放射治疗前有心身疾病史;(2)不会使用智能手机,无法阅读和理解手机展示的问卷中的问题;(3)拒绝签署知情同意书。根据主客观管理分析(SOMA)自评量表、躯体症状健康量表(PHQ-15)、广泛性焦虑障碍量表(GAD-7)和抑郁症筛查量表(PHQ-9)来设计《放射性直肠损伤心理调查》电子问卷。通过微信群将该问卷发给编委管理的放射性直肠损伤患者。本研究观察指标:(1)放射性直肠损伤症状评估:采用SOMA自评量表,放射性直肠损伤症状分级:轻度(≤3分)、中度(4~6分)和重度(≥6分);(2)焦虑和抑郁及躯体症状障碍的发生率:分别采用GAD-7、PHQ-9和PHQ-15自评量表进行评估;(3)焦虑、抑郁、躯体症状障碍与放射性直肠损伤症状分级相关性。结果共回收71份合格问卷,41份(56.9%)来自广州。71例患者中,男6例,女65例;年龄(55.7±9.3)岁,<60岁者48例(67.6%),确诊放射性直肠损伤中位病程2.0(1.0,5.0)年。放射性直肠损伤症状评估:轻度18例(25.4%)、中度27例(38.0%)、重度26例(36.6%)。焦虑和抑郁及躯体症状障碍发生率:无合并症的患者共12例(16.9%);发生焦虑、抑郁或躯体症状障碍的患者共59例(83.1%),其中2例患者只合并焦虑、1例患者只合并抑郁、9例合并躯体症状障碍、2例合并焦虑+抑郁、4例合并焦虑+躯体症状障碍、2例合并抑郁+躯体症状障碍、三者并发者40例。焦虑、抑郁、躯体症状障碍与放射性直肠损伤症状分级相关性:与放射性直肠损伤症状轻-中度组患者相比,重度患者的焦虑和躯体症状障碍的严重程度均更高,差异有统计学意义(Z=-2.143,P=0.032;Z=-2.045,P=0.041);但两组患者间抑郁程度的差异则无统计学意义(Z=-1.176,P=0.240)。Pearson相关性分析结果显示,放射性直肠损伤症状评分与患者的焦虑(r=0.300,P=0.013)、抑郁(r=0.287,P=0.015)及躯体症状障碍(r=0.344,P=0.003)程度均呈正相关,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论放射性直肠损伤患者的焦虑、抑郁、及躯体症状障碍的发病率极高。有必要加强躯体症状障碍的诊断及治疗,以减轻患者盆腔会阴疼痛等症状,提高生活质量。

摘要：目的介绍"中国结直肠癌手术病例登记数据库(CCCD)"的登记研究方法,通过对全国多中心现有结直肠癌手术病例资料进行回顾性及前瞻性的收集和分析,了解目前全国结直肠癌手术治疗现状,为进一步建设数据库提供依据。方法依托中华医学会外科学分会结直肠外科学组成立"中国结直肠外科大数据研究协作组(C-CBD)",设计并建立CCCD",基于"真实世界研究"的理念,通过回顾性及前瞻性收集并分析自2018年3月至2019年10月,来自全国性、多中心登记录入CCCD的结直肠癌手术病例,进行标准化整理及统计学处理,分析中国结直肠癌诊断及手术治疗效果。结果共计纳入来自全国61个中心的结直肠癌手术病例72650例,其中直肠癌占57.9%,结肠癌42.1%,术前临床TNMⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期的比例分别为18.6%、42.5%、30.7%及8.2%;行腹腔镜手术占56.7%,开腹手术占43.3%,行D1、D2及D3淋巴结清扫比例分别为占2.1%、51%及46.4%;行R0、R1、R2手术切除等分别为96.2%、2.2%、1.6%;消化道重建方式以器械吻合为主(约占98%),手工吻合仅占2%;术后最为常见的并发症为切口感染,总体发生率为3.2%;结直肠癌手术切除标本平均检出淋巴结15.9枚,直肠癌手术标本环周切缘阳性率为1.7%。结论中国结直肠癌手术病例数量庞大,术后近期效果良好,但诊断及治疗的规范化仍然有待进一步提高,围手术期资料、随访资料的完整性亦有待进一步完善。