摘要：目的目的探讨靶向HBVX的siRNA（X-siRNA）和5-氮-2’-脱氧胞苷（5-aza-dC）对HBV相关肝细胞癌生长的影响及可能机制。方法设计合成X-siRNA及对照siRNA，用siRNA处理HepG2／GFP-HBx细胞，RT-PCR法测定处理细胞的HBVX基因表达；将HepG2／GFP、HepG2／GFP—HBx细胞接种于裸鼠皮下建立裸鼠肝癌皮下移植瘤，分别用X-siRNA、5-aza-dC单独或联合处理裸鼠并观察移植瘤生长；甲基化PCR测定移植瘤组织p16基因甲基化。结果RT—PCR检测示X—siRNA处理的细胞HBVX mRNA水平明显降低；裸鼠体内实验显示HepG2／GFP—HBx组的皮下移植瘤体积明显大于HepG2／GFP组（P〈0．05）；X-siRNA与5-aza-dC处理组移植瘤体积明显小于未处理组（P〈0．05）；甲基化PER检测示HepG2／GFP—HBx组移植瘤组织存在p16甲基化而HepG2／GFP组未检出p16甲基化；X-siRNA、5-aza—dC处理的移植瘤组织中p16基因甲基化减低。结论X-siRNA及甲基化抑制剂可能通过逆转p16甲基化而能有效抑制肝细胞癌生长，具有潜在应用价值。

摘要：目的建立稳定、高效的HBx、羧基末端截短的中分子表面蛋白(MHBst)体外表达细胞株,以进一步研究HBx、MHBst蛋白在肝癌发生中的作用及其机理。方法设计特异性引物,采用PCR方法从adr亚型HBV质粒pHBV DNA中扩增HBx、羧基末端截短至155位氨基酸的中分子表面蛋白(MHBst155)编码基因,并定向插入绿色荧光蛋白(GFP)表达载体pEGFP-C1的BglⅡ、KpnⅠ和BglⅡ、BamHⅠ酶切位点,转化宿主菌DH5α,提取质粒,分别用上述内切酶酶切及DNA测序鉴定重组质粒。采用脂质体介导将空载体、重组质粒分别转染到人肝肿瘤细胞株HepG2中,G418筛选抗性细胞克隆,荧光显微镜下观察GFP表达,挑取表达GFP的抗性克隆扩大培养、传代。采用RT-PCR、蛋白印迹检测抗性细胞中HBx、MHBst155的mRNA及蛋白水平。结果经酶切及测序鉴定成功构建了pGFP-HBx、pGFP-MHBst155重组表达载体,将空载体及重组质粒转染HepG2,经G418筛选约20 d获得抗性细胞克隆。将带有绿色荧光的抗性克隆扩大培养并经传代40次,细胞仍表达强的绿色荧光。RT-PCR及蛋白印迹检测表明转染重组体的HepG2/GFP-HBx、HepG2/GFP-MHBst155细胞有相应的条带,而空载体、空白对照组未出现条带。结论成功构建了HBx、MHBst155真核重组表达载体pGFP-HBx、pGFP-MHBst155,获得了稳定表达融合蛋白GFP-HBx、GFP-MHBst155的HepG2细胞系,为进一步研究HBx及MHBst蛋白在肝癌发生中的作用及分子机制构建了良好的平台。

摘要：目的 调查妊娠期抗HBV治疗对阻断母婴传播的有效性及对母婴的安全性. 方法 设计回顾性调查表格,收集广东省内18家医院33名专家填写的妊娠期服用抗HBV药物且资料完整的病案,统计分析新生儿及产妇的相关数据. 结果 共收集到122例妊娠或授精期抗病毒治疗及随访资料较完整的病案;74例女性妊娠期抗病毒药物涉及最多为拉米夫定,其次为替比夫定;48例男性授精前抗病毒药物涉及最多的为拉米夫定,其次为阿德福韦酯;122例新生儿均未感染HBV;74例产妇均未发生产科并发症;1例女性孕期全程服用替比夫定出现新生儿低体质量（2.1kg）,2例男性服用阿德福韦酯意外授精后分别出现新生儿兔唇及腹股沟疝各1例,其余均未发现其他出生缺陷. 结论 广东地区回顾性资料显示,妊娠期抗病毒治疗能有效协助阻断母婴传播,且安全性好.

摘要：干扰素α用于慢性乙型肝炎抗病毒治疗在临床实践中积累了丰富的经验,最初的治疗目标是维持患者病毒学持续应答,以改善长期预后。更深入的临床实践和研究提示,聚乙二醇干扰素α治疗慢性乙型肝炎在部分患者中可能实现临床治愈,从而引起极大关注。临床治愈可以作为某些优势人群的治疗目标已逐渐形成共识,但如何通过调整聚乙二醇干扰素α的治疗方法来进一步提高临床治愈率仍缺乏大样本、设计良好、有对照的临床试验数据的支持。关于以临床治愈为目标的初治患者的适合疗程、一次性治疗还是分阶段治疗、持续性治疗还是间歇性治疗,以及停药指征和复发相关因素等诸多治疗策略问题尚需要更深入地研究。近年来,由研究者发起的以临床治愈为首要治疗目标的研究逐渐增多,奠定了良好的基础。本文旨在强调要加强和重视以临床治愈为治疗终点的聚乙二醇干扰素α治疗策略的研究,以进一步提高临床治愈率。