摘要：目的:探究牛膝最佳盐炙工艺。方法:采用超高效液相色谱串联质谱技术,以牛膝补肾壮骨的5种有效成分——β-蜕皮甾酮、25R-牛膝甾酮、25S-牛膝甾酮、人参皂苷R0及竹节参皂苷Ⅳa为评价指标,采用单因素和Box-Behnken设计方法,选择加盐量、炒制温度和炒制时间为考察因素,优化牛膝的盐炙工艺。结果:牛膝盐炙最佳工艺为2%加盐量,炒制温度100℃,炒制时间20 min。结论:所得牛膝盐炙工艺稳定可靠,有利于提高牛膝盐炙品的质量均一性。

摘要：【背景】肺炎链球菌是社区获得性肺炎最常见的致病菌之一,它也会引起脑膜炎、鼻窦炎、中耳炎、菌血症等一系列疾病,对人类(特别是儿童、老人、免疫缺陷患者)健康造成重大威胁。铁是肺炎链球菌生存和感染所必需的元素之一,其中血红素转运系统PiuABCD是肺炎链球菌最重要的铁转运系统。【目的】克隆、表达和纯化肺炎链球菌血红素转运系统脂蛋白PiuA,并在体外表征PiuA蛋白的血红素结合特性。【方法】将肺炎链球菌D39菌株中的piuA(spd_1652)基因连接到载体pBAD-HisA上,在大肠杆菌Top10菌株中进行异源表达,然后运用Ni-NTA亲和层析纯化PiuA-His蛋白,并用肠激酶切掉His标签获得不含标签的PiuA蛋白,最后运用圆二色谱、紫外光谱和荧光光谱表征PiuA蛋白的血红素结合特性。【结果】构建了pBAD/HisA-PiuA重组表达载体,获得了纯度大于95%的PiuA蛋白,圆二色谱显示PiuA蛋白与Hemin结合后,其二级结构不发生改变;紫外光谱结果显示PiuA蛋白具有血红素结合能力;荧光光谱结果显示apo-PiuA蛋白与Hemin结合常数K=3.4×10~5 L/mol。【结论】肺炎链球菌血红素转运系统脂蛋白PiuA能够特异地结合血红素,为肺炎链球菌的生存和感染提供必需的铁源,PiuA蛋白的体外表征结果为针对PiuABCD血红素转运系统设计抗菌药物奠定了基础。

摘要：目的:采用星点设计-效应面法优选升麻中总皂苷的提取工艺。方法:以乙醇体积分数、提取时间、溶媒比为自变量,以升麻总皂苷得率为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,用效应面法选取最佳工艺,同时进行预测分析。结果:确定最优提取工艺为15倍量65%乙醇提取3次,每次170 min,提取预测值与理论值偏差0.4%,二项式拟合复相关系数r=0.988 4。结论:星点设计-效应面法优化的升麻总皂苷提取工艺,方法简单,精密度高,可预测性较优。

摘要：目的应用固体分散技术,提高二氢槲皮素及其片剂的体外溶出度。方法以PEG-4000、PEG-6000和PVP-K30为载体,采用溶剂-熔融法制备了二氢槲皮素固体分散体,考察不同载体对固体分散体溶出度的影响。同时制得二氢槲皮素固体分散体片,并着重考察了片剂的体外溶出度。结果以亲水性PVP-K30为载体制备的固体分散体能够显著的提高二氢槲皮素的体外溶出度,制成固体分散片剂后,二氢槲皮素固体分散体片的溶出度可达86.8%。结论以PVP-K30为载体的固体分散体片可提高二氢槲皮素的溶解度,制备二氢槲皮素固体分散片达到设计要求,且制法简便可行。

摘要：目的:优化复方栀子金花的提取工艺条件。方法:以复方栀子金花提取的干膏率、栀子苷转移率、黄芩苷转移率及其抗肿瘤活性和抗炎活性为评价指标,利用Plackett-Burnman联合Box-Behnken设计对复方栀子金花的提取工艺进行考察,确定最佳提取工艺参数。结果:最佳提取条件为44倍量29%的乙醇,回流提取3次,每次3h。结论:本研究确定的提取工艺合理可行,能够缩短实验周期,显著提高有效成分的转移率,且结合活性评价,筛选结果更具有指导意义。

摘要：目的：优化仙鹤草总黄酮的超声提取工艺,并对其体外抗氧化、抗肿瘤活性进行研究。方法：以总黄酮提取量为考察指标,在单因素实验基础上,通过Plackett-Burman（PB）试验设计筛选影响总黄酮提取量的显著性因素,运用Box-Behnken设计（BBD）对影响提取工艺的显著性因素进行优化,对试验数据进行多元线性回归和二项式拟合,应用效应面法对最佳工艺进行预测分析,优选仙鹤草总黄酮的超声提取工艺;采用FRAP法、清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基和羟基自由基的方法,对最佳工艺所得总黄酮的抗氧化活性进行评价,并采用CCK-8比色法对其抗胃癌MKN-45、肝癌Hep G2、骨髓瘤U266、乳腺癌MCF-7、肺癌A549、宫颈癌He La 6种人源肿瘤细胞增殖活性进行研究。结果：对仙鹤草总黄酮提取量影响较大的4个因素为液料比、超声时间、乙醇体积分数、超声温度;最优超声提取工艺为：乙醇体积分数64. 00%,液料比10. 50 m L·g-1,超声时间74. 00 min,超声温度40. 00℃,超声功率200 W,超声次数3次,在此条件下总黄酮提取量为106. 28 mg·g-1,与预测值108. 12 mg·g-1相对误差为1. 70%;总黄酮总抗氧化活性的FRAP值为56. 87 mg-1,其抗氧化活性随着质量浓度的增大而增强,对DPPH和羟基自由基的半数抑制浓度（IC50）分别为19. 53和16. 27μg·m L-1;总黄酮对MKN-45、Hep G2、U266、MCF-7、A549、He La细胞的增殖均有抑制作用,且呈现明显的浓度依赖性,IC50分别为127. 50、53. 31、202. 10、206. 80、54. 17、170. 40μg·m L-1。结论：优选的仙鹤草总黄酮的超声提取工艺合理、可行,且仙鹤草总黄酮在体外具有良好的抗氧化、抗肿瘤活性。

摘要：目的:考察接骨木总苷片的制剂工艺。方法:通过对吸湿性、颗粒外观、崩解时间、脆碎度、休止角的考察,确定接骨木总苷片的制剂工艺,同时进行了3批工艺验证试验。结果:确定了接骨木总苷片的制剂工艺。结论:该制剂工艺处方设计合理,工艺稳定。

摘要：针对临床标本基因组DNA的提取方法缺乏广泛适用性,提取步骤繁琐,需要进行离心操作,并且提取过程中会用到苯酚、氯仿等有机试剂,会对操作人员有一定的危害性等不足,本研究拟建立一种适用于临床标本的基因组DNA快速提取方法。在传统的基因组DNA提取试剂和方法的基础上,本研究采用二氧化硅修饰的超顺磁珠设计了一种基因组DNA快速提取方法;探讨磁珠用量、裂解液p H、盐酸胍浓度等因素对基因组DNA提取效率的影响并采用凝胶电泳实验进行验证。当磁珠用量在50~100μg/100 mg样品,裂解液p H约为6,盐酸胍的浓度为6 mol/L时基因组DNA提取效果好、效率高,且磁珠的用量与吸附表面积成正比,但达到一定用量后不会增加提取量,对于100 mg肺组织,适宜的磁珠用量为80μg。此基因组DNA提取方法高效省时,简便快捷,性价比高,适用临床大量样本基因组DNA提取。

摘要：目的:研究吴茱萸多糖水提法的工艺优化。方法:采用加热回流的提取方法,用L9(34)正交试验设计方案,考察提取温度、提取时间、料水比3种因素对吴茱萸多糖提取率和多糖含量的影响。结果:水提吴茱萸多糖的最佳工艺条件是:提取温度95℃,提取时间3h,料水比1∶30,其多糖最高提取率和多糖含量分别为5.58%和59.53%。结论:该工艺优化可用于吴茱萸多糖的提取。

摘要：目的:采用星点设计-效应面法优化洋金花叶中醉茄内酯类化学成分的提取工艺。方法:以乙醇体积分数、提取时间、溶媒比为自变量,醉茄内酯总得率为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,采用效应面法优选提取工艺条件,同时进行预测分析。结果:确定最优提取工艺为加40倍量60%乙醇提取3次,每次提取时间70min;醉茄内酯类提取率的实测值与预测值偏差-1.56%,二项式拟合复相关系系数0.9308。结论:星点设计-效应面法优化的洋金花叶醉茄内酯提取工艺简单、精密度高,且预测性良好。