摘要：目的:克隆中华蟾蜍肿瘤坏死因子受体超家族(TNFRSF)BbgTNFRSF11b、BbgTNFRSF9基因的全长序列,并分析其序列特征。方法:根据转录组测序所得的TNFRSF11b、TNFRSF9基因片段设计特异性引物,以中华蟾蜍蟾皮为材料,利用逆转录聚合酶链式反应(PCR)技术获得BbgTNFRSF11b、BbgTNFRSF9基因全长互补脱氧核糖核酸(cDNA)序列,并采用生物信息学手段分析其序列特征,通过实时荧光定量PCR方法检测BbgTNFRSF11b、BbgTNFRSF9基因在中华蟾蜍7种组织/器官中的表达情况。结果:克隆获得蟾蜍BbgTNFRSF11b基因的全长cDNA序列为1233bp,编码410个氨基酸,理论相对分子质量为46.97kDa,等电点为8.64,不存在跨膜区及信号肽,为亲水性蛋白,具有多个磷酸化位点。BbgTNFRSF9基因的全长cDNA序列为829bp,编码247个氨基酸,理论相对分子质量为67.874kDa,理论等电点为5.12,存在信号肽,为疏水性蛋白,具有多个磷酸化位点,进化树分析发现BbgTNFRSF11b、BbgTNFRSF9基因与其他动物TNFRSF11b、TNFRSF9基因相似度不高,表明该基因虽有特殊结构域但不同物种间差异较大。组织表达分析显示,BbgTNFRSF11b、BbgTNFRSF9基因在耳后腺中表达显著高于其他部位。结论:成功获得蟾蜍BbgTNFRSF11b、BbgTNFRSF9基因序列,掌握其序列特征,为后续深入研究该蛋白的功能提供参考。

摘要：高良姜素是一种天然来源的黄酮醇类化合物,药理作用广泛,但尚未有关于其结构修饰的研究报道。本文以高良姜素为原料,设计、合成了5个高良姜素含氮衍生物,并对其结构进行1H NMR、13C NMR及MS表征;然后采用MTT法测试结构修饰产物的抗肿瘤活性,结果表明化合物2-苯基-3,5,7-三羟基-8-(吗啉甲基)-4H-色烯-4-酮(2c)和2-苯基-3,5,7-三羟基-8-(哌嗪-1-甲基)-4H-色烯-4-酮(2d)对人前列腺癌PC-3细胞株的增殖抑制活性(IC_(50):11.37和13.57μmol/L)显著优于高良姜素(IC50:41.66μmol/L),分别提高了3.66倍和3.07倍;化合物2-苯基-3,5,7-三羟基-8-(哌嗪-1-甲基)-4H-色烯-4-酮(2d)对人结肠癌LOVO细胞株的增殖抑制活性较高良姜素提高了5.22倍。该系列衍生物的抗肿瘤活性的增强可能与8-位上含氮杂环的引入有关。

摘要：目的鉴定茅苍术根系分泌物中的自毒物质,研究其对茅苍术种子萌发、幼苗生长及生理生化的影响,并初步探究自毒物质的作用机制。方法利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析茅苍术根系分泌物成分,利用单物质浇灌试验鉴定自毒物质,设计盆栽实验分析自毒物质对茅苍术种子萌发及幼苗生长的抑制作用,采用分光光度法测定幼苗过氧化氢和丙二醛含量及超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶和抗坏血酸过氧化物酶的活性,并用半定量GC-MS法测定自毒物质处理后茅苍术中苍术素、β-桉叶醇、茅术醇和苍术酮的含量。结果鉴定出2,4-二叔丁基酚、邻苯二甲酸二丁酯、硬脂酸甲酯、棕榈酸等8种自毒物质,这些物质显示出抑制种子发芽及幼苗生长的作用,并对幼苗造成氧化胁迫和损伤,同时抑制了苍术素、β-桉叶醇、茅术醇和苍术酮的合成。结论鉴定出了茅苍术根系分泌的8种自毒物质,发现了自毒物质可能通过氧化胁迫作用抑制种子萌发、幼苗生长及活性成分的生物合成,为揭示苍术连作障碍提供了基础。