摘要：目的建立快速鉴别羊种布鲁菌1、2、3型的基因分型方法。方法根据羊种布鲁菌标准参考菌株16MRpoB基因的单核苷酸多态性和羊种布鲁菌基因组中串联重复序列（tandem repeat sequence，TRS）Bin42基因的差异，分别设计引物．建立鉴别羊种布鲁菌标准参考菌株的***和TRS-PCR方法．用建立的方法对临床分离的羊种布鲁菌进行鉴别。并与常规生物分型方法进行比较。结果RpoB-PCR和TRS-PCR对羊种布鲁菌标准参考菌株（生物型1、2、3型）的鉴定结果与常规鉴定方法结果一致。51株临床分离羊种布鲁菌，RpoB—PCR的鉴别结果显示，50株[包括1（17株）、2（3株）、3（30株）生物型]羊种菌均鉴别为RpoB-2基因型，仅1株羊种1型菌鉴别为RpoB-3基因型。生物型相同的标准参考菌株与临床分离菌株，基因型鉴定结果不完全一致。TRS-PCR的鉴别结果显示，51株羊种菌均鉴别为羊种2型布鲁菌（TRS-2基因型）。结论羊种布鲁菌生物型与基因型未见明显关联．羊种布鲁菌分离株与标准参考菌株的RpoB基因存在显著差异，Bru42不能用于临床分离羊种布鲁菌的基因分型。

摘要：目的利用多重实时荧光PCR技术,建立快速鉴定布鲁氏菌的方法。方法根据布鲁氏菌特异性基因BCSP31,AlkB/IS711和BMEI1162/IS711的部分片段作为靶基因,分别设计探针引物,将扩增产物连接到PUCm18-T载体上,制备标准品及标准曲线,确定此方法的灵敏度。利用布鲁氏菌的其他生物型菌株和同源性较近的致病菌(汉赛巴尔通体、霍乱弧菌、土拉弗朗西斯菌、大肠杆菌O157∶H7、大肠杆菌O∶16、小肠结肠炎耶尔森菌O∶9、沙门氏菌N群血清型、嗜麦芽假单胞菌)验证所建立方法的特异性。通过布鲁氏菌标准菌株建立方法,优化体系后扩增97株地方株进行验证。结果应用多重Taq-Man荧光PCR技术检测布鲁氏菌结果显示,布鲁氏菌属、牛种布鲁氏菌和羊种布鲁氏菌有各自的荧光信号,而与其同源性较高的致病菌均未见荧光信号;由标准曲线可知该方法的单重和多重荧光PCR最低检测下限均约为102copy/μL(13～24fg/μL),是常规PCR灵敏度的100倍。结论建立的方法有灵敏度高、快速易操作等优点,可用于布鲁氏菌快速鉴定,并同时确定是否为牛种或羊种布鲁氏菌。

摘要：布病是当前最为流行的细菌性人兽共患传染病,因导致家畜流产可引发重大经济损失,也是发展中国家面临的最为重要的公共卫生问题。阐明布鲁氏菌的致病机制是设计和研发疫苗的关键,而疫苗免疫是预防布病较为有效的方法。但目前无安全有效的人用疫苗,唯一的预防策略是动物免疫,但每年的人间和动物发病率仍然较高,动物免疫可能存在缺陷。当前,布鲁氏菌的多种免疫蛋白已被鉴定、评价,新型亚单位疫苗也表现出了良好的免疫潜能。因此,本文就布鲁氏菌的胞内生存机制、国内外常见疫苗的应用研究情况进行综述,为开展相关研究提供有价值的参考。

摘要：目的观察急性布鲁菌病患者黄疸的临床生化指标,及其强化期治疗对黄疸的影响。方法对71例急性布鲁菌病患者的临床资料进行回顾性分析,其中16例出现黄疸(黄疸组),其余55例作为对照组。对2组患者的肝功能指标及胆红素指标进行比较。采用配对χ2检验对黄疸组患者异常直接胆红素(DBIL)和间接胆红素(IBIL)升高所占比率比较;采用完全随机两样本资料的秩和检验对黄疸组和对照组年龄和病程中位数进行比较;采用完全随机设计四格表χ2检验比较黄疸组和对照组生化等指标;采用配对秩和检验比较强化期治疗前后总胆红素(TBIL)、DBIL和IBIL差异。结果黄疸组异常DBIL和异常IBIL所占比率差异有统计学意义(P0.05);2组性别差异有统计学意义(P0.05),2组DBIL异常率差异有统计学意义(P0.05);强化期治疗前后TBIL、DBIL和IBIL比较,差异有统计学意义(P<0.01),16例急性布鲁菌病患者黄疸全部消失。结论布鲁菌可致急性布鲁菌病患者黄疸的特征主要是隐性高DBIL血症黄疸,2组比较,急性布鲁菌病黄疸与患者的性别有关与年龄、ALT、AST、ALP、γ-GT异常率无关;强化期治疗对消除急性布鲁菌病黄疸非常有效。

摘要：目的调查中国羊种布鲁氏菌rpoB基因的多态性。方法利用AMOS-PCR对分离菌株进行种型鉴定;根据布鲁氏菌rpoB基因的4个多态性位点设计特异性引物,对299株羊种布鲁氏菌流行株(羊1型菌38株、羊2型菌19株、羊3型菌242株)的rpoB基因的4个多态性位点进行扩增,并将PCR产物测序结果与羊种布鲁氏菌标准菌株的扩增结果进行比对。结果羊种布鲁氏菌的rpoB基因检测发现,有169株为rpoB-2变异型、103株为rpoB-2型、24株为新的rpoB基因型(rpoB-4型)及3株为rpoB-1型。结论我国羊种布鲁氏菌rpoB基因具有较高的多态性,可作为羊种布鲁氏菌的分子流行病学调查靶基因,我国羊种菌rpoB基因型和生物型无相关性。