摘要：利用稻瘟病菌的一段倒位重复序列Pot2设计的一对引物 ,采用rep PCR分子指纹技术对来自云南省弥勒县粳稻种植区的水稻品种 (净栽合系 4 1、净栽黄壳糯、混栽合系 4 1和黄壳糯 )多样性田间 2 4 2个稻瘟病单孢分离菌株的DNA进行扩增。结果显示所有供试菌株均扩增出 2～ 2 8条谱带 ,扩增片段大小为 4 0 0bp～ 2 3kb ,但 80 %左右的片段集中在 0 .4～ 6 .0kb。将供试菌株扩增谱带进行聚类分析 ,比较了混栽与净栽田间病菌群体遗传结构的组成差异。结果表明 ,在粳稻种植区 ,水稻品种多样性种植有利于对稻瘟病菌的稳定性选择 ,在不同的遗传相似水平 ,菌株遗传宗群复杂度与栽培方式有一定的相关性。混栽田间病菌遗传宗群较净栽田间复杂。在 80 %的相似水平上 ,净栽糯稻田间的稻瘟病菌被划为 1 3个宗群 ,而混栽粳稻和黄壳糯田间由糯稻品种上分离的稻瘟病菌群体被划为 2 0个宗群 ;净栽粳稻田间的稻瘟病菌可划为 9个宗群 ,而混栽粳稻和糯稻田间由粳稻品种上分离的稻瘟病菌群体可划为 1

摘要：植物竞争是指不同植物间对限制性资源的共同需求而产生阻碍或制约的相互关系,是生物学领域一个非常重要的方面。竞争特征可以归结为3个方面:(1)竞争强度和重要性,(2)竞争影响和反应;(3)竞争后果。基于不同的角度,形成了一系列植物竞争能力的测度系数,而特定的竞争系数通常要求与相应的试验设计相匹配,这样不同研究间的结果比较非常困难,选用哪种竞争系数来测度植物竞争关系非常困惑。本文简要总结了植物竞争能力的基本组成元素,根据竞争特征对植物竞争测度方法进行归类综述,对竞争能力系数应用领域的可适用性和其功能的局限性进行分析评价,为相关研究正确选择试验设计和测度方法提供帮助。

摘要：构建包含RAc1基因cDNA片段的质粒,作为水稻肌动蛋白基因RAc1之mRNA定量检测的标准品,建立检测方法,为水稻其他基因的定量建立内参。从水稻叶总RNA中逆转录扩增总cDNA,PCR扩增RAc1基因中设计的目的片段,将纯化的目的片段与pMD19-TSimple载体进行连接,转化宿主菌JM-109,提取重组质粒DNA,PCR鉴定并测序分析。纯化质粒并检测260nm吸光值,确定重组质粒原液的拷贝浓度并以此制备荧光定量PCR梯度浓度标准品,进行实时荧光定量PCR实验。建立了RAc1基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法,特异性好,检测灵敏度达102拷贝,线性范围为102～107拷贝,阈值循环数(Ct)与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系(r=1.000),扩增效率高(E=98.2%)。建立了基因RAc1实时定量PCR的质粒标准品。

摘要：采用液体培养,研究了18种碳源、18种氮源成分对韦氏芽孢杆菌Bacillus weihenstepha-nensis菌株MC67产挥发性物质杀线虫活性的影响。以单因素分析法,确定了MC67菌株杀线虫活性的最佳碳源和氮源分别为麦芽糖和酵母膏。采用Plackett-Burman设计法,对影响菌株MC67杀线虫活性的主要因素进行筛选,确定影响该菌株发酵液挥发物杀线虫活性的4个重要因子依次为麦芽糖、酵母膏、温度和pH值。采用响应曲面法研究4个显著因子的最佳水平,通过对二次多项回归方程求解得知,当麦芽糖10.6g/L、酵母膏0.66g/L、培养温度29.6℃、pH值6.6时,菌株发酵液挥发物杀线虫活性的预期值为99.1%。对模型培养基验证的结果表明,该菌株对松材线虫的杀线虫活性为98.2%,接近预期值。

摘要：在云南省昆明市的文心兰栽培基地发现了具有病毒病典型症状的感病文心兰植株。感病样品在电镜下可观察到长460-500 nm的线状病毒粒体和长约300 nm的杆状病毒粒体中的一种或两种,分别与已报道的建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒粒体大小一致。感病样品可以和建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒血清中的一种或两种呈阳性反应。利用建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的特异性引物,运用RT-PCR方法可以扩增到与引物设计预期大小一致的核酸条带。由此证明,云南文心兰病毒病的病原是建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒中的一种或两种。

摘要：为了进一步开展高效粘虫板的研发与应用,本实验选用5种常见花粉(即玫瑰、油菜、茶花、桃花和松花花粉)并分别配比5种不同浓度(即0.05 g/板、0.15 g/板、0.30 g/板、0.50 g/板、0.75 g/板)制成花粉粘虫板,采用完全随机裂区设计方法,在昆阳镇塑料大棚内红色切花月季上进行西花蓟马诱集实验。2016年连续调查2个红色切花月季的生长周期,结果表明:不同花粉的诱集效果间无显著性差异;不同浓度的诱集效果间差异极显著,且随着花粉处理浓度升高诱集效果先升高后降低,0.30 g/板时花粉粘虫板的诱集效果最好;花粉与浓度之间也存在极显著的交互效应,浓度为0.15 g/板的油菜花粉粘虫板(平均诱集量为57.44头/板)和浓度为0.30 g/板的茶花花粉粘虫板(平均诱集量为51.00头/板)对西花蓟马的诱集效果最好;红色切花月季不同时间的诱集效果间也存在极显著性差异,且随着诱集时间延长,花粉粘虫板对西花蓟马的诱集效果呈下降趋势,至末花期诱集效果又开始有所回升。总之,花粉粘虫板对切花月季上的西花蓟马有显著的诱集效果。

摘要：本研究利用通用引物(rDNA1/rDNA2)研究了21个国内甘薯茎线虫(Ditylenchus destructor)群体和1个韩国马铃薯茎线虫(***)群体的rDNA-ITS序列,从21个国内群体中扩增出2个大小不同的ITS片段,分别约为940 bp和1 100 bp;经克隆、序列测定和分析比对发现其ITS区存在特异性差异,分别命名为A型和B型,其中18个群体DdTH、DdCL、DdJN、DdMY1、DdYX1、DdZZ、DdLN、DdDX1、DdFN、DdYX2、DDSX1、DdDX2、DdXY、DdLL、DdSX2、DdLY、DdMY2和DdPY的ITS扩增产物约为940 bp,称之为A型马铃薯腐烂茎线虫(940 bp),3个群体DdSH,DdTS,DdYS为B型马铃薯腐烂茎线虫(1 100 bp)。设计构建并筛选出A型和B型马铃薯腐烂茎线虫2对特异性引物DdS1/DdS2和DdL1/DdL2,分别扩增出A型马铃薯腐烂茎线虫、B型马铃薯腐烂茎线虫群体的特异片段252 bp和485 bp;引入D3A/D3B作为内标,设计出一步双重PCR检测技术;同时优化了检测体系和PCR反应程序。该技术具有较高的特异性和灵敏性,能快速、准确地检测出不同型的马铃薯腐烂茎线虫群体。

摘要：子预44是具有广谱持久抗瘟性的云南地方粳稻品种。为揭示子预44广谱持久抗瘟分子机制,本研究利用Shang等(2009)设计的三对假基因化PCR标记,对Pib、Pi9和Pid3三个广谱抗瘟基因在子预44、江南香糯、日本晴和籼稻93-11中等位基因假基因化情况进行了检测和分析。研究结果表明,在大多数粳稻品种中发生假基因化的Pib、Pi9和Pid3三个等位基因在粳稻子预44中均未发生假基因化。我们推测粳稻子预44的广谱持久抗瘟特性可能与其稻瘟病抗性基因假基因化频率较低,含有多个稻瘟病抗性基因有关。

摘要：番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)寄主广泛,危害多种作物,近年发现侵染烟草引起严重经济损失。研究该病毒的分子检测方法,对健康烟草种苗培育和指导病害防控具有重要意义。本文根据TSWV核壳体蛋白基因(N基因)序列设计引物,用RT-PCR方法对采于云南疑似番茄斑萎病毒症状的5个烟草病害标样(102,514,自10,自16,自58)进行检测,PCR产物连接pMD载体并测序。测序结果表明:这5种烟草病害分离物与已报道TSWV N基因核酸序列相似性大于97.04%,所编码氨基酸序列的相似性达97.67%以上。这说明获得的5种病毒分离物均属于TSWV。本研究建立了侵染云南烟草的番茄斑萎病毒(TSWV)的RT-PCR检测方法。

摘要：采用单因素试验和正交试验设计,探讨提取时间、料液比、提取溶剂和提取次数对柿叶总黄酮和总多糖提取率的影响,筛选出了最佳提取工艺。正交试验结果表明,柿叶总黄酮提取的最佳工艺为:60%乙醇回流提取2 h,提取2次,料液比为1 g∶30 mL;总多糖提取的最佳工艺为:60%乙醇回流提取1 h,提取1次,料液比为1 g∶20 mL。本研究为节省提取工艺成本、降低能耗和工业化生产的合理化提供了科学依据,并为柿叶多糖和黄酮类化合物的开发应用研究奠定了理论基础。