摘要：根据苜蓿基因组ALDH基因和稳定表达Actin基因mRNA序列,设计3对引物。提取苜蓿总RNA,采用oligo dT18作为反转录引物,经反转录获得cDNA,通过优化反应体系及反应条件,建立以苜蓿Actin基因为内参对照,检测苜蓿乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)基因(a亚基和b亚基)的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,苜蓿ALDH基因(a亚基和b亚基)和Actin基因扩增曲线和标准曲线显示其基因扩增效率均大于99.9%,熔解曲线分析表明3个基因的扩增产物为特异性单峰,其Tm分别为(86.4±0.2),(80.6±0.1)和(83.0±0.1)℃。该方法为利用苜蓿Actin基因作为内参基因进行苜蓿ALDH基因的相对定量表达分析提供了方法学基础。

摘要：为探明德钦苜蓿对根际高温胁迫的响应,采用二因素随机区组设计,恒温和变温各设5个温度和5个取样时间,分析根际温度对云南地方品种德钦苜蓿形态特征和水分状况的影响。结果表明:根际高温影响德钦苜蓿的外观质量。根际温度高于25℃时德钦苜蓿的株高、总叶数和叶宽的累计增长率减小,地上部分生长受到抑制; 25-30℃时根系的长度及根毛新生显著增加,两者的增幅分别介于13. 93%-40. 69%和2 283. 31%-4 868. 58%之间; 40±胁迫72h后,植株上部叶片失水萎靡、反卷,下部叶片完全黄化、焦枯、脱落,地下部分变细、变软,停止新生根产生,40℃为德钦苜蓿生长的上限温度。叶片和根系的相对含水量随胁迫温度的升高和胁迫时间的延长而下降,但根系相对含水量降幅较叶片小;此时叶片和根系的相对电导率升高。

摘要：以云南本地黄牛的背最长肌和股二头肌为材料,采用L9(34)正交设计研究了不同提取条件对背最长肌和股二头肌的盐溶蛋白热诱导凝胶保水性、蛋白组分及凝胶超微结构的影响。结果表明,云南本地黄牛背最长肌和股二头肌的盐溶蛋白最佳提取条件均为NaCl浓度0.6mol/L、温度70℃、pH7.0,凝胶的保水性分别是96.21%、96.35%。SDS-PAGE电泳和扫描电镜显示,背最长肌和股二头肌在保水性最佳的条件下,其肌球蛋白含量较高,同时凝胶的网络比较均匀、细致。而保水性较差,其肌球蛋白含量比较低,凝胶网络结构粗糙、疏松、不均匀。

摘要：以辣椒核质互作雄性不育系9704A、保持系9704B和恢复系9701(简称"三系")为材料,根据GenBank报道的茄科作物线粒体CoxⅡ和atp6基因编码序列分别设计引物,PCR扩增辣椒"三系"线粒体DNA目的基因片段,研究辣椒"三系"线粒体DNACoxⅡ和atp6基因的差异及与雄性不育的关系。结果表明:从辣椒核质互作雄性不育系中扩增到两个基因的部分序列atp6-706和CoxⅡ-708,GenBank登录号分别为FJ986191和FJ986190,生物信息学分析发现分离的atp6-706和CoxⅡ-708片段与GenBank报道的茄科作物线粒体CoxⅡ和atp6基因的相似性高达95%以上;在保持系和恢复系中均未能扩增到任何序列,说明辣椒雄性不育系的CoxⅡ和atp6基因与保持系和恢复系在线粒体DNA水平上存在差异,这种结构上的变化暗示可能与辣椒雄性不育相关。

摘要：大肠杆菌是引起奶牛乳房炎的一种主要细菌。为了建立PCR直接检测奶牛乳房炎致病菌的方法,本试验以大肠杆菌为主要研究对象,根据已发表的致病性大肠杆菌16-23S rRNA特异性序列设计并合成一对引物,对昆明市的某发生奶牛乳房炎的病牛的牛奶进行大肠杆菌PCR检测,并对扩增片段进行序列分析,建立一种直接从牛奶中检测大肠杆菌的PCR快速诊断方法。结果表明,该方法能够检测到乳样中的大肠杆菌,而且具有快速、准确和特异的优点。

摘要：树鼩可作为人类疾病的良好模型,但缺乏对其免疫功能研究的基本标志和单克隆抗体。该研究应用RT-PCR技术,分别从3只树鼩的肝脏、脾脏和血液中克隆了CD3ε全长编码序列并用Discovery Studio等软件对其分子特征进行了分析。结果显示,树鼩CD3εcDNA的开放阅读框全长582bp,编码193个氨基酸。树鼩与其他哺乳动物的CD3ε蛋白整体结构近似,与人和恒河猴CD3ε的亲缘关系较近,胞内域与跨膜域高度保守,但胞外域出现2个潜在的糖基化位点,表面电荷亦存在差异。该研究为今后制备树鼩CD3单克隆抗体及功能研究奠定初步的基础。