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正交试验优化八角ISSR-PCR反应体系: 收藏
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引用; 《生物技术通报》2014年第8期30卷 65-69页; 作者：冯丹宁德鲁陈少瑜李勇杰张艳丽吴涛陈海云云南省林业科学院昆明650201 云南省森林植物培育与开发利用重点试验室国家林业局云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点试验室昆明650201; 利用正交试验设计研究Taq DNA聚合酶、DNA模板、引物(UBC 886)、dNTP、Mg2+浓度5个因素对云南八角ISSR-PCR反应的影响,建立其最佳反应体系。结果表明:25μL的反应体系中5个因子的最佳水平为:Mg2+3 mmol/L、Taq DNA聚合酶0.5 U、DNA模板0...; 利用正交试验设计研究Taq DNA聚合酶、DNA模板、引物(UBC 886)、dNTP、Mg2+浓度5个因素对云南八角ISSR-PCR反应的影响,建立其最佳反应体系。结果表明:25μL的反应体系中5个因子的最佳水平为:Mg2+3 mmol/L、Taq DNA聚合酶0.5 U、DNA模板0.016 ng、引物0.8μmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L。PCR最佳反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,46℃退火45 s,72℃延伸1 min,40次循环;72℃最后延伸7 min,4℃保存。; 来源：详细信息评论

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