摘要：目的:观察构建成功的三个针对人转化生长因子β1(TGF-β1)的小发夹RNA(shRNA)真核表达质粒抑制人肺成纤维细胞TGF-β1的表达。方法:将真核表达载体psiSTRIKE-RNAi1、psiSTRIKE-RNAi2、psiSTRIKE-RNAi3和对应的阴性对照载体经酶切鉴定和测序分析后,以Lipofectamine2000介导转染人肺成纤维细胞,48小时后应用实时荧光定量PCR检测人肺成纤维细胞TGF-β1mRNA的表达并用ELISA检测细胞上清液中TGF-β1蛋白质的浓度。结果:重组质粒经酶切和DNA测序证实插入片段的碱基序列与预期设计一致。转染组细胞TGF-β1表达受到明显抑制,以psiSTRIKE-RNAi2的抑制效应最为显著(P<0.01)。结论:三个针对TGF-β1shRNA的重组质粒均能抑制TGF-β1在人肺成纤维细胞中的表达。

摘要：《国际儿童风湿病试验组织(PRINTO)幼年特发性关节炎新分类标准专家共识(启动步骤)》于2018年10月发表于Journal of Rheumatology,随后在2018年美国风湿病学会(ACR)年会上,相关专家在大会上进行了介绍。在西方国家,这一新的幼年特发性关节炎(JIA)分类标准还在完善中,PRINTO设计了2步前瞻性研究,完成后将形成成熟的JIA新的分类标准。这一学科的新动向及进展对JIA的诊治及研究具有重大意义。中国儿童免疫与健康联盟组织了部分中国专家对这一国际共识进行解读,旨在对JIA新分类提出中国专家的建议观点,并为我国以后JIA相关真实世界研究提供依据,为与国际新标准接轨提出中国专家的意见。该文仅进行忠实于英文原文的解读,JIA新的分类标准在我国的形成及运用还需要进一步研究及探讨。

摘要：目的研究靶向存活素(survivin)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制survivin基因表达对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(rheumatoid arthritis synovial fibroblasts,RASFs)增殖与凋亡的影响。方法体外分离培养RA患者滑膜成纤维细胞(RASFs),设计合成靶向survivin的siRNA及阴性对照,用脂质体法转染RASFs细胞;实时定量聚合酶链反应和蛋白印迹法检测RASFs中survivin的mRNA表达及蛋白水平。四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖;TUNEL法检测细胞凋亡。结果实验组与阴性对照siRNA组及空白对照组相比,转染48h后滑膜成纤维细胞survivin的mRNA及蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。实验组与阴性对照siRNA组及空白对照组相比,转染后的滑膜成纤维细胞增殖能力明显下降(P<0.05)。实验组转染后24h、48h、72h生长抑制率分别为(11.5±2.6)%、(26.2±3.4)%、(47.6±4.1)%,于转染后72小时最为显著。实验组凋亡率为(23.87±1.6)%,显著高于阴性对照组(9.72±1.15)%和空白对照组(8.70±1.09)%(均P<0.05)。结论靶向survivin的siRNA通过下调survivin表达水平,抑制滑膜成纤维细胞增殖并促进其凋亡。